一株耐寒短杆菌及其除臭剂在禽畜粪便处理中的应用制造技术

本发明专利技术公开了一株耐寒短杆菌及其除臭剂在禽畜粪便处理中的应用，涉及生物菌株利用开发技术领域，其中的耐寒短杆菌TW009已于2022年6月1日保藏于中国典型培养物保藏中心，分类命名为Brevibacterium frigoritolerans TW009，保藏编号为CCTCC NO:M 2022770：保藏地址为中国武汉。本发明专利技术公开的一株耐寒短杆菌，可制成除臭剂应用于禽舍空气和粪便堆肥除臭中。中。中。

【技术实现步骤摘要】
一株耐寒短杆菌及其除臭剂在禽畜粪便处理中的应用


[0001]本专利技术涉及生物菌株利用开发
，尤其涉及一株耐寒短杆菌及其除臭剂在禽畜粪便处理中的应用。

技术介绍

[0002]随着畜禽养殖业的规模化、集约化发展，环境污染问题愈发严重，管理难度加大。畜禽粪便堆放过程中会产生恶臭，导致环境恶化。畜禽粪便产生的臭气成分复杂，通常可以分为以下四大类：一是挥发性含硫化合物，如H2S、CH4S、硫醚类等，这类物质主要来自微生物对硫酸盐的还原和含硫氨基酸的代谢作用；二是含氮化合物，如NH3、三甲胺等，这类物质主要来自微生物对蛋白质和氨基酸的脱氨作用；三是吲哚类和酚类，这类物质主要来源于微生物对苯丙氨酸、酪氨酸的分解；四是挥发性脂肪酸类，如乙酸、丙酸、丁酸、戊酸等，这类物质主要来源于氨基酸的脱氨和碳水化合物的分解。
[0003]目前，国内外畜禽粪便恶臭治理主要有物理法、化学法和生物法三大类技术。物理除臭技术是利用吸附剂和掩蔽剂进行暂时性的吸附、掩盖臭味而达到除臭效果，存在成本高、吸附量有限等缺点。遮蔽法是用芳香味较强的物质如香草酸、胡椒醛、柴罗酮等掩蔽臭味，适用于水产、油脂、皮革和纤维加工等行业，不能从根本上除臭且成本高，应用有局限性。化学除臭技术是通过添加化学物质与恶臭物质发生反应而达到除臭目的，包括氧化法、中和法、杀菌法等。氧化法是利用强氧化剂将还原性恶臭物质氧化成无害无臭物质的过程，常用的氧化剂如臭氧、高铁酸盐等。中和法是在畜禽舍垫料上撒一层过磷酸钙，过磷酸钙与粪中产生的氨气发生反应，生成无味的固体磷酸铵盐，能减少粪便中氨气散发，降低氨气浓度。杀菌法是利用过氧化氢、高锰酸钾、硫酸铜、乙酸、苯甲酸等化学物质喷洒垫料，通过杀菌消毒，抑制有害细菌的活动，达到抑制和降低畜禽舍内有害气体的产生。化学法除臭效果好，但存在成本高、反应复杂、有二次污染、提高粪便资源化利用难度等缺点，难以推广应用。
[0004]生物法除臭技术是上世纪50年代发展起来的技术，日本、德国、荷兰等国家取得了显著成果。生物法主要是利用微生物自身的代谢作用使恶臭成分降解为无臭、无害的终产物，如CO2、H2O等，达到除臭目的。生物法除臭具有效率高、无二次污染、设备简单、运行成本低、管理维护方便等优点，已成为治理恶臭的主要技术发展方向之一。目前常用的菌种包括光合细菌、硝化细菌、反硝化细菌、芽孢杆菌、链霉菌、酵母菌、乳酸菌、米曲霉等。

技术实现思路

[0005]专利技术目的：为了克服现有技术中存在的不足，本专利技术提供一株耐寒短杆菌及其除臭剂在禽畜粪便处理中的应用。
[0006]技术方案：为实现上述目的，本专利技术的一种耐寒短杆菌TW009，其特征在于，该菌株已于2022年6月1日保藏于中国典型培养物保藏中心，分类命名为Brevibacterium frigoritolerans TW009，保藏编号为CCTCC NO:M 2022770：保藏地址为中国武汉。
[0007]进一步地，所述菌株的16S rDNA如SEQ NO.1所示。
[0008]一种除臭剂，该除臭剂包括所述的耐寒短杆菌TW009。
[0009]进一步地，所述除臭剂还包括酵母菌、乳酸菌、枯草芽孢杆菌、光合细菌中的一种或两种及以上的组合。
[0010]进一步地，所述除臭剂中活菌量不低于109cfu/mL或109cfu/g，其中耐寒短杆菌TW009的活菌不低于总活菌量的50％。
[0011]一种制备所述除臭剂的方法，包括以下步骤：
[0012](S1)将耐寒短杆菌TW009在牛肉膏蛋白胨培养基上进行活化，然后接种于液体牛肉膏蛋白胨培养基中，30℃培养16h；
[0013](S2)制备液体发酵培养基：胰蛋白胨15
‑
20g，大豆蛋白胨10
‑
15g，酵母提取物1
‑
5g，NaCl 1
‑
8g，K2HPO
4 1
‑
5g，MgSO4·
7H2O 0.1
‑
0.5g，MnSO4·
H2O0.005
‑
0.0015g，Na2MoO4·
2H2O 0.005
‑
0.015g，蒸馏水溶解定容至1L，pH 7.0，121℃灭菌15
‑
20min；
[0014](S3)将活化好的耐寒短杆菌TW009按1
‑
10％接种量接种于液体发酵培养基，28
‑
37℃、160
‑
220rpm条件下振荡培养16～24h，当培养液中的含菌量达到109cfu/mL时，收集菌液，可以根据需要浓缩制成液体菌剂或冷冻干燥制成固体菌粉。
[0015]所述除臭剂在禽舍空气和禽畜粪便堆肥除臭中的应用。
[0016]本专利技术的一株耐寒短杆菌及其除臭剂在禽畜粪便处理中的应用，至少具有以下技术效果：
[0017](1)本专利技术中的耐寒短杆菌TW009(CCTCC M 2022770)，该菌株从烟台农田土壤中筛选得到，属于非致病细菌，对人畜无害，不污染环境，不危害生态平衡，符合生物安全法规；
[0018](2)本专利技术中的耐寒短杆菌TW009(CCTCC M 2022770)能够应用于畜禽粪便的生物除臭，有效减少畜禽粪便中恶臭气体和挥发性有机物的释放量，从源头上减少臭味的产生；除臭效果稳定，受温度影响较小，在常温条件下仍具有较好的除臭效果；
[0019](3)本专利技术中的耐寒短杆菌TW009(CCTCC M 2022770)既可以单独使用，也可以与其它菌如酵母菌、乳酸菌、芽孢杆菌、光合细菌等制成混合菌剂使用，使用时可原位处理也可异位处理，以0.1％～1.0％接种量直接喷洒菌液或菌粉于粪便中，因其能产生芽孢，抗逆性强，可以在粪便中良好生长，占据有利生态位，抑制产恶臭微生物生长繁殖，降低粪便恶臭气体释放量，每次喷洒可持续发挥除臭时间多日；
[0020](4)本专利技术中的耐寒短杆菌TW009(CCTCC M 2022770)具有制备工艺简单高效、产品稳定可靠的特性，具有易形成商品化的明显的技术优势。
附图说明
[0021]图1为耐寒短杆菌TW009的显微形态；
[0022]图2为耐寒短杆菌TW009基于16S rDNA序列的系统发育树。
具体实施方式
[0023]以下结合图1至图2对本专利技术的原理和特征进行描述，所举实例只用于解释本专利技术，并非用于限定本专利技术的范围。
[0024]实施例1：耐寒短杆菌TW009(CCTCC M 2022770)的分离鉴定。
[0025](S1)采样：取农田土壤10g，溶于90mL无菌水中，200rpm振荡30min，静置10min取上清液为菌悬液备用。
[0026](S2)富集：分别取菌悬液1mL，接入100mL液体富集培养基的三角瓶中，180转/min、30℃振荡培养5天，取1mL培养液进行梯度稀释，取10
‑3、10
‑4、1本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种耐寒短杆菌TW009，其特征在于，该菌株已于2022年6月1日保藏于中国典型培养物保藏中心，分类命名为Brevibacterium frigoritolerans TW009，保藏编号为CCTCC NO:M 2022770：保藏地址为中国武汉。2.根据权利要求1所述的耐寒短杆菌TW009，其特征在于，所述菌株的16S rDNA如SEQ NO.1所示。3.一种除臭剂，其特征在于：该除臭剂包括权利要求1所述的耐寒短杆菌TW009。4.根据权利要求3所述的除臭剂，其特征在于，所述除臭剂还包括酵母菌、乳酸菌、枯草芽孢杆菌、光合细菌中的一种或两种及以上的组合。5.根据权利要求4所述的除臭剂，其特征在于，所述除臭剂中活菌量不低于109cfu/mL或109cfu/g，其中耐寒短杆菌TW009的活菌不低于总活菌量的50％。6.一种制备权利要求3所述除臭剂的方法，其特征在于，包括以下步骤：(S1)将耐寒短杆菌TW009在牛肉膏蛋白胨培养基上进行活化，然后接种于液体牛肉膏蛋白胨培养基中，30℃培养16h；(S2)制备液体发酵培养基：胰蛋白胨15
‑
20g，大豆蛋白胨10

【专利技术属性】
技术研发人员：陈国忠，张兴晓，姜琳琳，李有志，于馨，朱洪伟，张建龙，汤文利，王姣，
申请(专利权)人：山东省饲料兽药质量检验中心，
类型：发明
国别省市：