一种新型抗氧化高原副干酪乳酪杆菌TDM-2及其无细胞提取物和应用制造技术

本发明专利技术提供了一种新型抗氧化高原副干酪乳酪杆菌TDM

【技术实现步骤摘要】
一种新型抗氧化高原副干酪乳酪杆菌TDM
‑
2及其无细胞提取物和应用


[0001]本专利技术涉及乳酸菌
，尤其涉及一种新型抗氧化高原副干酪乳酪杆菌TDM
‑
2及其无细胞提取物和应用。

技术介绍

[0002]氧化应激可导致体内高活性分子如活性氧自由基(ROS)和活性氮自由基(RNS)产生过多，氧化程度超出氧化物的清除，氧化系统和抗氧化系统失衡，从而导致组织损伤。ROS包括超氧阴离子(O2‑
·
)、羟自由基(OH
·
)和过氧化氢(H2O2)等，其中过氧化氢是氧化应激反应过程中形成的一个重要的氧自由基；RNS包括一氧化氮(NO
·
)、二氧化氮(NO2·
)和过氧化亚硝酸(ONOO
‑
·
)等。ROS和RNS可以通过多种代谢途径产生，如化学毒物与药物代谢、细胞呼吸、辐射、光照等。ROS/RNS具有较高的反应活性，很容易与细胞内的大分子物质如DNA/RNA、膜脂质、蛋白质反应，其氧化损伤与机体的衰老、肿瘤和多种疾病息息相关。乳酸菌则被认为是天然抗氧化剂的主要来源之一。
[0003]乳酸菌包括乳球菌、片球菌、明串球菌、乳杆菌和双歧杆菌。当面临氧胁迫时，乳酸菌可产生多种抗氧化酶类物质，如：超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)等抗氧化酶，可清除OH
·
、O2‑
·
、DPPH自由基等，将ROS及其代谢产物分解或还原，催化ROS使其生成毒性较低的物质，减少机体细胞受到损伤的可能。另一方面，乳酸菌还可以通过抑制脂质过氧化及螯合金属离子、调控宿主细胞抗氧化防御系统和氧化应激相关细胞通路、调控氧化损伤修复系统等机制，发挥抗氧化作用。
[0004]同时，乳酸菌还可以调节肠道菌群。肠道中贮存着种类繁多、功能迥异的微生物，构成了极其复杂的微生态系统，参与调节宿主的能量收获、营养代谢和免疫调节，与机体健康紧密相关。当肠道菌群异常，形成内毒素的细菌过度增殖时会导致血液内毒素水平升高，从而导致系统产生氧化应激效应。乳酸菌可通过调节肠道菌群的组成与结构，促进有益菌的增殖，抑制产内毒素细菌，避免血液内毒素水平升高，减少氧化应激和炎症损伤。此外，乳酸菌能够刺激肠道黏膜分泌更多黏液，防止病原菌入侵肠道粘膜，减少肠道氧化应激的产生。
[0005]随着人们生活水平的提高，人们对功能性食品的渴求日益增加，不同乳酸菌菌种之间功效各异，所以，近些年针对不同菌种的乳酸菌功效探索也成为研究热点，尤其是对乳酸菌抗氧化特性的深入研究对新型功能性食品生产研发具有重大的意义。
[0006]我国青藏高原由于其特殊的地理和气候环境，蕴藏着独特的生物物种资源；尤其是丰富的乳酸菌菌种资源，而当地的特殊环境赋予了乳酸菌的生物学特性及遗传多样性。考虑到我国高寒地区乳酸菌种质资源的宝贵性和特殊性，保护和开发利用我国极端环境下优质乳酸菌种质资源，建立我国极端环境中乳酸菌种质资源数据库，筛选具有明显地域特色和特殊生物学功能的乳酸菌资源具有重要的科学意义。因此十分有必要筛选具有功能特性的高原乳酸菌种。

技术实现思路

[0007]本专利技术的目的在于提供一种新型抗氧化高原副干酪乳酪杆菌TDM
‑
2及其无细胞提取物和应用。
[0008]为了实现上述专利技术目的，本专利技术提供以下技术方案：
[0009]本专利技术提供了一株新型抗氧化高原副干酪乳酪杆菌(Lacticaseibacillus paracasei)TDM
‑
2，该菌株保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，地址北京市朝阳区北辰西路1号院3号 中国科学院微生物研究所，保藏日期为：2023年2月20日，保藏编号为：CGMCCNO.26579。
[0010]本专利技术还提供了所述的新型抗氧化高原副干酪乳酪杆菌TDM
‑
2在制备抗氧化功能性食品中的应用。
[0011]本专利技术还提供了所述的新型抗氧化高原副干酪乳酪杆菌TDM
‑
2制备的抗氧化无细胞提取物。
[0012]本专利技术还提供了一种抗氧化无细胞提取物的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
[0013]收集TDM
‑
2菌活化液中的菌体，调整菌体浓度后进行超声破碎，收集上清液为无细胞提取物。
[0014]优选的，所述收集TDM
‑
2菌活化液中的菌体的方法为离心，所述离心的温度为3～5℃，转速为7500～8500g，时间为5～15min。
[0015]优选的，采用PBS调整菌体浓度，所述菌体浓度调整后为1
×
109CFU/mL～1
×
10
10
CFU/mL。
[0016]优选的，所述超声破碎的功率为320～400W，超声破碎时，采用超声3～7s，停止3～7s的循环，总超声时间为20～40min。
[0017]本专利技术还提供了抗氧化高原副干酪乳酪杆菌TDM
‑
2制备的抗氧化无细胞提取物在制备抗氧化功能性食品中的应用。
[0018]副干酪乳酪杆菌TDM
‑
2可以利用自己的抗氧化酶系统，来抵抗氧化应激；还能有效地刺激宿主的抗氧化系统，提高抗氧化酶的活性。其还可以产生各种具有抗氧化活性的代谢物，如丁酸，叶酸，谷胱甘肽等；同时，其能产生乳酸、丁酸、丙酸等，降低肠道pH，抑制各种病原菌的生长，以保持肠道菌群的平衡，有助于降低氧化应激。本专利技术通过离心收集TDM
‑
2菌体，冰浴超声破碎细胞后收集上清液制备的无细胞提取物，具有良好的DPPH自由基的清除率和H2O2的耐受能力，还具有良好的还原能力和OH
‑
离子的清除能力。
附图说明
[0019]图1为实施例2中菌株TDM
‑
2的系统发育树；
[0020]图2为实施例2中培养的TDM
‑
2的菌株形态。
[0021]保藏说明
[0022]抗氧化高原副干酪乳酪杆菌(Lacticaseibacillusparacasei)TDM
‑
2，该菌株保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，地址北京市朝阳区北辰西路1号院3号 中国科学院微生物研究所，保藏日期为：2023年2月20日，保藏编号为：CGMCC NO.26579。
具体实施方式
[0023]下面结合实施例对本专利技术提供的技术方案进行详细的说明，但是不能把它们理解为对本专利技术保护范围的限定。
[0024]实施例1
[0025]副干酪乳酪杆菌(TDM
‑
2)的获得
[0026]将在高原牧场采集的牛奶样本用无菌吸管吸入灭菌带旋帽的试管中，放入冰袋冻存，并尽快送回实验室。取1mL牛奶样品加入到9mL无菌生理盐水中，振荡混匀，得到10
‑1CFU/mL的悬液。
[0027]取1mL此悬液本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一株新型抗氧化高原副干酪乳酪杆菌(Lacticaseibacillusparacasei)TDM
‑
2，该菌株保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，地址北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏日期为：2023年2月20日，保藏编号为：CGMCCNO.26579。2.一种权利要求1所述的新型抗氧化高原副干酪乳酪杆菌TDM
‑
2在制备抗氧化功能性食品中的应用。3.一种利用权利要求1所述的新型抗氧化高原副干酪乳酪杆菌TDM
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2制备的抗氧化无细胞提取物。4.一种权利要求3所述的抗氧化无细胞提取物的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：收集TDM
‑
2菌活化液中的菌体，调整菌体浓度后进行超声破碎，收集上清液为无细胞提取...

【专利技术属性】
技术研发人员：黄小丹，樊雪妮，李斌，杨婷玉，
申请(专利权)人：兰州大学，
类型：发明
国别省市：