抗-肿瘤抗原奈米抗体暨其核酸编码序列及其应用制造技术

本发明专利技术提供一种抗

【技术实现步骤摘要】
抗
‑
肿瘤抗原奈米抗体暨其核酸编码序列及其应用


[0001]本专利技术涉及抗
‑
肿瘤抗原奈米抗体
，具体涉及一种抗
‑
肿瘤抗原奈米抗体暨其核酸编码序列及其应用。

技术介绍

[0002]癌症又名为恶性肿瘤，为细胞不正常增生，且这些增生的细胞可能侵犯身体的其他部分，为由控制细胞分裂增殖机制失常而引起的疾病。全世界罹患癌症的人口有不断增加的趋势，癌症是国人十大死因之一，且已连续多年居十大死因的榜首。
[0003]常规的肿瘤治疗方法包括手术治疗、放射线治疗、化学治疗及标靶治疗等。肿瘤免疫治疗为上述治疗方法以外的另一种治疗肿瘤的方法，是通过激活患者自身免疫系统，利用肿瘤细胞或肿瘤抗原物质诱导机体的特异性细胞免疫及体液免疫反应，增强机体的抗癌能力，阻止肿瘤的生长、扩散及复发，以达到清除或控制肿瘤的目的。然而，目前的肿瘤治疗方法仍存在效果不彰及副作用强烈的问题，甚至会衍生出其他免疫相关疾病。
[0004]人类白血球抗原
‑
G(human leukocyte antigen
‑
G,HLA
‑
G)已被发现高度表现于多种实体肿瘤上，且有抑制免疫细胞的特性。因此，已有研究人员致力于研发以HLA
‑
G作为辨识肿瘤的标靶分子并找出这些标靶分子是否具有成为抗癌药物的潜力。
[0005]为了解决上述问题，本领域的技术人员亟需研发出新颖且更有效治疗癌症及免疫相关疾病的医药品以造福有此需求的广大族群。

技术实现思路

[0006]有鉴于此，本专利技术的目的为提供一种抗
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肿瘤抗原奈米抗体，其与一人类白血球抗原
‑
G(human leukocyte antigen
‑
G,HLA
‑
G)专一性结合，该抗
‑
肿瘤抗原奈米抗体包含一选自于下列所组成的群组中的胺基酸序列：SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.2、SEQ ID NO.3，及SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.2和SEQ ID NO.3的任意组合。
[0007]在本专利技术的一实施例中，该胺基酸序列是该抗
‑
肿瘤抗原奈米抗体的一重链可变域(heavy chain variable domain,VHH)的胺基酸序列。
[0008]在本专利技术的一实施例中，该抗
‑
肿瘤抗原奈米抗体与一可结晶片段区域(fragment crystallizable region,Fc region)缀合。
[0009]在本专利技术的一实施例中，该抗
‑
肿瘤抗原奈米抗体与一第二抗体缀合以形成双特异性T细胞连接(bispecific T
‑
cell engager,BiTE)、三特异性T
‑
细胞连接(triple specific T
‑
cell engager,TriTE)、双特异性杀手细胞连接(bispecific killer cell enager,BiKE)、三特异性杀手细胞连接(triple specific killer cell engager,TriKE)，或任一双特异性抗体。
[0010]在本专利技术的一实施例中，该抗
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肿瘤抗原奈米抗体阻断该HLA
‑
G与该HLA
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G的一受体的交互作用及/或结合。
[0011]在本专利技术的一实施例中，该受体是杀手细胞免疫球蛋白样受体两个Ig域及长胞质
尾4(killer cell immunoglobulin like receptor,two Ig domains and long cytoplasmic tail 4,KIR2DL4)或白血球免疫球蛋白样受体子族B成员1(leukocyte immunoglobulin
‑
like receptor subfamily B member 1,LILRB1)。
[0012]本专利技术的另一目的为提供一种经分离的核酸，其编码一如前所述的抗
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肿瘤抗原奈米抗体的胺基酸序列，该经分离的核酸包含一选自于下列所组成的群组中的核苷酸序列：SEQ ID NO.4、SEQ ID NO.5、SEQ ID NO.6，及SEQ ID NO.4、SEQ ID NO.5和SEQ ID NO.6的任意组合。
[0013]本专利技术的另一目的为提供一种医药组成物，包含一如前所述的抗
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肿瘤抗原奈米抗体及一医药学上可接受的载剂。
[0014]本专利技术的另一目的为提供一种如前所述的抗
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肿瘤抗原奈米抗体用于制备一治疗癌症及免疫相关疾病的医药品的用途。
[0015]本专利技术的另一目的为提供一种用于检测HLA
‑
G表现量的方法，包含对一待测样品投予一如前所述的抗
‑
肿瘤抗原奈米抗体。
[0016]在本专利技术的一实施例中，该待测样品是血液、尿液、痰液、唾液或体液。
[0017]综上所述，本专利技术抗
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肿瘤抗原奈米抗体的功效在于：藉由竞争型酵素结合免疫吸附分析法(competitive enzyme linked immunosorbent assay,competitive ELISA)证明抗
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HLA
‑
G奈米抗体在IC50的50％阻断活性内阻断HLA
‑
G与其受体:杀手细胞免疫球蛋白样受体两个Ig域及长胞质尾4(killer cell immunoglobulin like receptor,two Ig domains and long cytoplasmic tail 4,KIR2DL4)及白血球免疫球蛋白样受体子族B成员1(leukocyte immunoglobulin
‑
like receptor subfamily B member 1,LILRB1)之间的交互作用、增强自然杀手细胞(natural killer cell,NK cell)对人类乳癌细胞株MDA
‑
MB
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231的细胞溶解(cytolysis)作用及细胞毒性、藉由西方墨点分析(Western blotting)证明抗
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HLA
‑
G奈米抗体可以识别人类癌细胞株MDA
‑
MB
‑
231及A549细胞的细胞溶解产物中的HLA
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G蛋白质、流动式细胞测量分析(flow cytometric analysis)、藉由免疫细胞化学分析证明抗
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HLA
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G奈米抗体可以识别细胞膜上的HLA
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G蛋白质、HLA
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G的表现与质膜标志Pan
...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种抗
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肿瘤抗原奈米抗体，其特征在于，所述抗
‑
肿瘤抗原奈米抗体与一人类白血球抗原
‑
G(human leukocyte antigen
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G,HLA
‑
G)专一性结合，所述抗
‑
肿瘤抗原奈米抗体包含一选自于下列所组成的群组中的胺基酸序列：SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.2、SEQ ID NO.3，及SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.2和SEQ ID NO.3的任意组合。2.根据权利要求1所述的抗
‑
肿瘤抗原奈米抗体，其特征在于，其中所述胺基酸序列是所述抗
‑
肿瘤抗原奈米抗体的一重链可变域(heavy chain variable domain,VHH)的胺基酸序列。3.根据权利要求2所述的抗
‑
肿瘤抗原奈米抗体，其特征在于，所述抗
‑
肿瘤抗原奈米抗体与一可结晶片段区域(fragment crystallizable region,Fc region)缀合。4.根据权利要求3所述的抗
‑
肿瘤抗原奈米抗体，其特征在于，所述抗
‑
肿瘤抗原奈米抗体与一第二抗体缀合以形成双特异性T细胞连接(bispecific T
‑
cell engager,BiTE)、三特异性T
‑
细胞连接(triple specific T
‑
cell engager,TriTE)、双特异性杀手细胞连接(bispecific killer cell enager,BiKE)、三特异性杀手细胞连接(triple specific killer cell engager,TriKE)，或任一双特异性抗体...

【专利技术属性】
技术研发人员：周德阳，邱绍智，黄士维，潘志明，陈美智，林育全，陈晔，
申请(专利权)人：台湾中国医药大学附设医院，
类型：发明
国别省市：