抗-T细胞奈米抗体暨其核酸编码序列及其应用制造技术

本发明专利技术提供一种抗

【技术实现步骤摘要】
ID NO.4、SEQ ID NO.5、SEQ ID NO.6，及SEQ ID NO.4、SEQ ID NO.5和SEQ ID NO.6的任意组合。
[0012]本专利技术的另一目的为提供一种医药组成物，包含一如前所述的抗
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T细胞奈米抗体及一医药学上可接受的载剂。
[0013]本专利技术的另一目的为提供一种如前所述的抗
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T细胞奈米抗体用于制备一治疗癌症、免疫调节及活化免疫细胞的医药品的用途。
[0014]本专利技术的另一目的为提供一种用于检测CD3ε表现量的方法，包含对一待测样品投予一如前所述的抗
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T细胞奈米抗体。
[0015]在本专利技术的一实施例中，该待测样品是血液、尿液、痰液、唾液、体液、肿瘤、器官、组织或细胞。
[0016]综上所述，本专利技术抗
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T细胞奈米抗体的功效在于：藉由T细胞(即周边血液单核细胞)增殖及活化分析(T cell(i.e.,peripheral blood mononuclear cell,PBMC)proliferation and activation assay)证明抗
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CD3ε奈米抗体可促进T细胞群聚增生及活化、增强PBMC中CD3阳性T细胞增殖、增强γδT(GDT)细胞中CD3阳性T细胞增殖、藉由西方墨点分析(Western blotting)证明抗
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CD3ε奈米抗体可以识别人类T细胞的细胞溶解产物中的CD3ε蛋白质、藉由免疫组织化学染色(immunohistochemistry staining,IHC staining)及流动式细胞测量分析(flow cytometric analysis)证明抗
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CD3ε奈米抗体可藉由流动式细胞测量分析侦测细胞样品中CD3ε的表现、藉由表面电浆子共振结合分析(surface plasmon resonance binding assay,SPR binding assay)证明抗
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CD3ε奈米抗体以0.5056nM内的KD有效结合CD3ε/CD3δ异二聚体，及藉由免疫细胞化学分析证明抗
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CD3ε奈米抗体可用来侦测细胞样品中CD3ε的表现，藉此可达到治疗癌症、免疫调节及活化免疫细胞的效用。特别地，本专利技术抗
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T细胞奈米抗体可扮演调节免疫功能及活化免疫细胞的角色，且相较于习知的抗体必须藉由载体将基因转染至细胞中表现抗体功能而有低产量及效果不彰的缺点，本专利技术抗
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T细胞奈米抗体可在体外大规模制备后直接投药至需要的个体内进行治疗。另外，本专利技术也可达到检测CD3ε表现量的效用。
[0017]以下将进一步说明本专利技术的实施方式，下述所列举的实施例是用以阐明本专利技术，并非用以限定本专利技术的范围，任何熟习此技艺者，在不脱离本专利技术的精神和范围内，当可做些许更动与润饰，因此本专利技术的保护范围当视权利要求书所界定者为准。
[0018]【图式简单说明】
[0019]图1A及图1B显示抗
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CD3ε奈米抗体的T细胞(即周边血液单核细胞)增殖及活化分析(T cell(i.e.,peripheral blood mononuclear cell,PBMC)proliferation and activation assay)结果。
[0020]图2A至图2C显示抗
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CD3ε奈米抗体在增强PBMC中CD3阳性T细胞增殖上的效用评估的结果，其中CD3e nb表示抗
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CD3ε奈米抗体，Vehicle表示载体。
[0021]图3A至图3D显示抗
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CD3ε奈米抗体在增强gamma delta T(GDT)细胞中CD3阳性T细胞增殖上的效用评估的结果，其中CD3e nb表示抗
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CD3ε奈米抗体，*表示p<0.05，**表示p<0.01，***表示p<0.001。
[0022]图4显示抗
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CD3ε奈米抗体的西方墨点分析(Western blotting)结果，其中上排数字表示T细胞蛋白质溶解产物(protein lysate)的量(μg)，(a)使用传统抗体#ab135372，其
nanobody”、“抗
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CD3ε奈米抗体”及“抗
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T细胞奈米抗体”可交换使用。
[0033]如本文中所使用的，“治疗(treating)”或“治疗(treatment)”意指缓解(alleviating)、减少(reducing)、改善(ameliorating)、减轻(relieving)或控制(controlling)一疾病(disease)或障碍(disorder)的一或多个临床征兆(clinical sign)，以及降低(lowering)、停止(stopping)或逆转(reversing)一正在被治疗中的病况(condition)或症状(symptom)的严重性(severity)的进展(progression)。
[0034]依据本专利技术的医药品可利用熟习此技艺者所详知的技术而被制造成一适合于非经肠道地(parenterally)投药的剂型(dosage form)，这包括，但不限于：注射品(injection)[例如，无菌的水性溶液(sterile aqueous solution)或分散液(dispersion)]、无菌的粉末(sterile powder)、锭剂(tablet)、片剂(troche)、口含锭(lozenge)、丸剂(pill)、胶囊(capsule)、分散性粉末(dispersible powder)或细颗粒(granule)、溶液、悬浮液(suspension)、乳剂(emulsion)、糖浆(syrup)、酏剂(elixir)、浓浆(slurry)以及类似之物。
[0035]依据本专利技术的医药品可以一选自于由下列所构成的群组中的非经肠道途径(parenteral routes)来投药：腹膜内注射(intraperitoneal injection)、皮下注射(subcutaneous injection)、表皮内注射(intraepidermal injection)、皮内注射(intradermal injection)、肌肉内注射(intramuscular injection)、静脉内注射(intravenous injection)以及病灶内注射(intralesional injection)。
[0036]依据本专利技术的医药品可包含有一被广泛地使用于药物制造技术的医药学上可接受的载剂。例如，该医药学上可接受的载剂可包含一或多种选自于由下列所构成的群组中的试剂：溶剂(solvent)、乳化剂(emulsifier)、悬浮剂(suspending agent)、分解剂(decomposer)、黏结剂(binding agent本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种抗
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T细胞奈米抗体，其特征在于，所述抗
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T细胞奈米抗体与一CD3ε(CD3 epsilon)专一性结合，所述抗
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T细胞奈米抗体包含一选自于下列所组成的群组中的胺基酸序列：SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.2、SEQ ID NO.3，及SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.2和SEQ ID NO.3的任意组合。2.根据权利要求1所述的抗
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T细胞奈米抗体，其特征在于，其中所述胺基酸序列是所述抗
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T细胞奈米抗体的一重链可变域(heavy chain variable domain,VHH)的一胺基酸序列。3.根据权利要求2所述的抗
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T细胞奈米抗体，其特征在于，所述抗
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T细胞奈米抗体进一步包含一可结晶片段区域(fragment crystallizable region,Fc region)。4.根据权利要求3所述的抗
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T细胞奈米抗体，其特征在于，所述抗
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T细胞奈米抗体与一第二抗体缀合以形成双特异性T细胞连接(bispecific T
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cell engager,BiTE)、三特异性T
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细胞连接(triple specific T
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cell eng...

【专利技术属性】
技术研发人员：周德阳，邱绍智，黄士维，潘志明，陈美智，林育全，陈晔，
申请(专利权)人：台湾中国医药大学附设医院，
类型：发明
国别省市：