一种检测干血片样本中环孢霉素药物浓度的试剂盒制造技术

本实用新型专利技术公开了一种检测干血片样本中环孢霉素药物浓度的试剂盒，试剂盒包括盒体、内衬、广口瓶、第一样本收集管、第二样本收集管和第三样本收集管，广口瓶内放有样本萃取液，第一样本收集管内放有校准品，第二样本收集管内放有质控品，第三样本收集管内放有空白质控品，第一样本收集管、第二样本收集管和第三样本收集管的内部均设置有玻璃纤维滤纸，玻璃纤维滤纸用于作为标准品和质控品的载体。基于本实用新型专利技术提供的试剂盒的检测方法，先对样本进行前处理，再结合液相色谱串联质谱仪上样检测，最终采用内标法对环孢霉素进行定量分析。本实用新型专利技术避免了红细胞压积效应的影响，降低了职业暴露的风险，提高了检测的稳定性和试剂盒的实用性。盒的实用性。盒的实用性。

【技术实现步骤摘要】
一种检测干血片样本中环孢霉素药物浓度的试剂盒


[0001]本技术涉及体外诊断领域，具体涉及一种检测干血片样本中环孢霉素药物浓度的试剂盒。

技术介绍

[0002]环孢霉素是强效免疫抑制剂之一，对组织移植后可能发生的排异反应以及同种异体器官具有较好的预防作用。环孢霉素被广泛用于提高接受器官移植患者的存活率，许多研究也证明环孢霉素在抵抗器官移植后的免疫排斥方面具有重要作用。环孢霉素由于其药动学的个体差异性和非常窄的治疗窗，患者移植后免疫抑制剂的监测对于降低其毒性和急性排斥反应就非常重要，同时对实施个体化给药亦有实际意义。
[0003]目前，环孢霉素血药浓度监测目前全部在医院的检验科与第三方实验室开展，项目模式大多为实验室自建方法(laboratory developed tests,LDT)，需要自行配制校准品、质控品、提取溶液。LDT模式的检测项目大多缺乏有效的质量控制，分析批、试剂批的不稳定性将造成重现性的巨大风险，实验数据的准确度、精密度、可靠性难以保证。LDT模式项目的开展费时费力，便利性差，试剂配制、方法建立、仪器参数等需要专业、责任心强的员工来保证。以上也是临床科室关心的主要问题点及需求点，同时LDT模式监管难度大，在美国、欧洲、日本等国家监管方式都不一致，部分市场较为混乱。传统的检测方法大多样本量需求大、灵敏度准确度低、同时自配试剂多采用人源样本，存在实验人员医学暴露的风险。
[0004]干血片(Dried Blood Spot,DBS)检测技术，是将生物样本(通常为全血)滴加到滤纸片上干燥保存，再经过萃取后检测干血片样本中分析物的一种方法，其具有采集方便，采血量少，样本易于保存运输的优点，上世纪六十年代开始被用于苯丙酮尿症的新生儿筛查，目前干血片检测应用最成熟的领域依然为新生儿遗传代谢类疾病的筛查，同时其应用逐渐向内源性生物标志物检测，治疗药物监测(therapeutic drug monitoring,TDM)等领域扩展。
[0005]目前使用最广泛的采血卡为棉质滤纸，材质为均匀的棉花纤维，能够使吸收的全血均匀分布。干血片的采集通常为非定量采血，直接将指尖血点到采血卡上，或者用微量毛细管转移。传统的萃取步骤为从干血片中心打下一块固定大小的圆片，置于合适的容器中，用适当的萃取液萃取分析物，检测仪器常为高灵敏度的液相色谱(HPLC)或色谱
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质谱联用仪(LC
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MS)。这种常用的方法相比静脉血液样本在定量准确度上会受到更多的干扰，这也是导致其应用局限性的主要原因。其主要的影响因素红细胞压积效应。
[0006]红细胞压积效应(HCT)是影响干血片定量准确度的最主要因素，HCT变化会极大的影响血液黏度，进而影响全血在滤纸中的扩散特性，而临床上患者血液样本HCT值跨度从20％～60％不等。当HCT升高时，干血片的扩散面积减少，则打下相同面积的干血片含有的样本体积增多，导致检测结果受到显著干扰。
[0007]综上所述，本领域迫切需要一种便捷性强、准确度高、采样量少、样本致病性弱、保存稳定、在严格法规框架下高质量的的新型环孢霉素检测方式。

技术实现思路

[0008]为解决上述技术问题，本技术提供一种检测干血片样本中环孢霉素药物浓度的试剂盒，包括盒体、内衬、样本萃取液、干血片环孢霉素校准品、干血片环孢霉素质控品和空白质控品，其特征在于，所述内衬设置在盒体内部的底端，所述内衬上设置有多个容置槽，所述容置槽内分别放置有广口瓶、第一样本收集管、第二样本收集管和第三样本收集管，所述样本萃取液存放于广口瓶的内部，所述干血片环孢霉素校准品存放于第一样本收集管的内部，所述干血片环孢霉素质控品存放于第二样本收集管的内部，所述空白质控品存放于第三样本收集管的内部，所述第一样本收集管、第二样本收集管和第三样本收集管的内部均设置有玻璃纤维滤纸，所述玻璃纤维滤纸用于作为标准品和质控品的载体。
[0009]具体地，所述第一样本收集管、第二样本收集管和第三样本收集管的底部均设置有环形凸起，所述环形凸起用于固定玻璃纤维滤纸。
[0010]具体地，所述第一样本收集管、第二样本收集管和第三样本收集管的内部均设置有固定管，每一个所述固定管内均设置有干燥剂，所述固定管用于分别将干燥剂固定在第一样本收集管、第二样本收集管和第三样本收集管的内部。
[0011]具体地，所述广口瓶为60mL广口瓶，所述玻璃纤维滤纸为预先打孔的玻璃纤维滤纸。
[0012]具体地，所述盒体还包括与所述盒体一体成形的盒盖，所述盒盖用于完全封闭盒体的顶部。
[0013]具体地，所述干血片环孢霉素校准品和干血片环孢霉素质控品均包含环孢霉素、兔全血和防腐剂，所述空白质控品包含甲醇、兔全血和防腐剂，所述干血片环孢霉素校准品包含50.0
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1500.0ng/mL线性范围内的6个校准点，所述干血片环孢霉素质控品包括高浓度质控品、中浓度质控品和低浓度质控品，所述高浓度质控品的环孢霉素浓度为1200ng/mL，所述中浓度质控品的环孢霉素浓度为600ng/mL，所述低浓度质控品的环孢霉素浓度为300ng/mL。
[0014]具体地，所述防腐剂为0.2％ProClin950和0.1％叠氮化钠。
[0015]具体地，所述样本萃取液包括乙腈、水和环孢霉素
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D4，所述乙腈和水的体积比为7：3，所述样本萃取液中环孢霉素
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D4的浓度为20ng/mL。
[0016]与现有技术相比，本技术的有益效果在于：
[0017]1.本技术采用玻璃纤维滤纸，且对玻璃纤维滤纸预先打孔，能够避免常规采血和萃取方式导致的红细胞压积效应，从而从根本上消除红细胞压积效应对定量检测带来的影响，同时简化了萃取操作，无须使用专业工具在样本中心打下固定面积的血片，避免了交叉污染；
[0018]2.本技术的试剂盒布局合理，结构简单，方便实验员操作和携带，提高了分析检测的效率；
[0019]3.本技术的试剂盒中质控品和校准品均采用基质替代兔全血配制，极大的降低了职业暴露的风险，且相比起现有的全血环孢霉素测定试剂盒仅能在2
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8℃或更低温度下保存的性质，本试剂盒中设置有干燥剂，能够在常温下保存，且即开即用，增强了试剂盒的实用性；
[0020]4.以本技术的试剂盒为载体的干血片环孢霉素检测方法，前处理时间短，且
前处理的操作简单，分析用样本量仅为10μL，减少了病患的标本取样量，同时提高了分析检测的效率。
附图说明
[0021]图1是本技术的试剂盒一具体实施方式的立体结构示意图；
[0022]图2是本技术的试剂盒的内衬的俯视图；
[0023]图3是本技术的试剂盒的样本收集管的结构示意图；
[0024]图4是本技术的试剂盒的样本收集管的另一视角的结构示意图
[0025]图5是本技术的试剂盒的固定管及干燥剂安装方式的结构示意图；本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种检测干血片样本中环孢霉素药物浓度的试剂盒，包括盒体(1)、内衬(2)、样本萃取液、干血片环孢霉素校准品、干血片环孢霉素质控品和空白质控品，其特征在于，所述内衬(2)设置在盒体(1)内部的底端，所述内衬(2)上设置有多个容置槽，所述容置槽内分别放置有广口瓶(3)、第一样本收集管(4)、第二样本收集管(5)和第三样本收集管(6)，所述样本萃取液存放于广口瓶(3)的内部，所述干血片环孢霉素校准品存放于第一样本收集管(4)的内部，所述干血片环孢霉素质控品存放于第二样本收集管(5)的内部，所述空白质控品存放于第三样本收集管(6)的内部，所述第一样本收集管(4)、第二样本收集管(5)和第三样本收集管(6)的内部均设置有玻璃纤维滤纸(7)，所述玻璃纤维滤纸(7)用于作为标准品和质控品的载体。2.根据权利要求1所述的检测干血片样本中环孢霉素药物浓度的试剂盒，其特征在于，所述第一样本收集管(4)、第二样本收集管(5)和第三样本收集管(6)的底部均设置有环形凸起(8)，所述环形凸起用于固定玻璃纤维滤纸(7)。3.根据权利要求1所述的检测干血片样本中环孢霉素药物浓度的试剂盒，其特征在于，所述第一样本收集管(4)、第二样本收集管(5)和第三样本收集管(6)的内部均设置有固定...

【专利技术属性】
技术研发人员：方焯，刘釜均，徐鸣成，颜森森，杨雪，马超月，
申请(专利权)人：苏州药明泽康生物科技有限公司，
类型：新型
国别省市：