一种检测3-(N-亚硝基甲氨基)丙腈含量的液相色谱分析方法技术

技术编号:34900707 阅读:27 留言:0更新日期:2022-09-10 14:05
本公开涉及一种检测3

【技术实现步骤摘要】
一种检测3

(N

亚硝基甲氨基)丙腈含量的液相色谱分析方法


[0001]本公开涉及化合物含量检测
,尤其涉及一种检测3

(N

亚硝基甲氨基)丙腈含量的液相色谱分析方法,特别是一种检测槟榔中3

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亚硝基甲氨基)丙腈含量的液相色谱分析方法。

技术介绍

[0002]亚硝胺类杂质属于ICH M7(R1)(《评估和控制药物中DNA反应性(致突变)杂质以限制潜在致癌风险》)指南中提及的“关注队列”物质。根据世界卫生组织公布的致癌物清单,3

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亚硝基甲氨基)丙腈为2B类致癌物。
[0003]3‑
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亚硝基甲氨基)丙腈的结构式如下:
[0004][0005]槟榔中含有多种人体所需的营养元素和有益物质,且由于其具有“杀虫、破积、降气行滞、行水化湿”的功效,曾被用来治疗绦虫、钩虫、蛔虫、绕虫、姜片虫等寄生虫感染”,包含槟榔的四磨汤主治“七情气逆,上气喘急,妨闷不食”。槟榔的经济价值高,能够进行深加工各种产品,但是其成分中含有一定量的3

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亚硝基甲氨基)丙腈,由于3

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亚硝基甲氨基)丙腈被列为2B类致癌物,因此,需要限制产品中3

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亚硝基甲氨基)丙腈的含量,目前,对于3

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亚硝基甲氨基)丙腈的检测较少,且容易出现“假合格”的现象。
[0006]因此,想要提供一种能够准确检测3

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亚硝基甲氨基)丙腈含量的方法。

技术实现思路

[0007]为了解决上述技术问题,本公开提供了一种检测3

(N

亚硝基甲氨基)丙腈含量的液相色谱分析方法。
[0008]第一方面,本公开提供了一种检测3

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亚硝基甲氨基)丙腈含量的液相色谱分析方法,所述液相色谱分析方法包括如下步骤:
[0009](1)制备标准溶液,并确定3

(N

亚硝基甲氨基)丙腈的标准曲线,在所述标准曲线中,Y为5.50

6.00min和6.30

6.80min对应的峰面积之和;
[0010](2)利用液相色谱分析方法对待测样本进行检测,在得到的色谱图中,目标物对应的峰面积为5.50

6.00min和6.30

6.80min对应的峰面积之和。
[0011]在对标准溶液的液相色谱检测得到的色谱图中,鉴于不同液相色谱仪、不同检测时间以及不同检测人员等原因出现的允许范围内的正常波动,本公开将3

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亚硝基甲氨基)丙腈的色谱峰的出峰时间限定在5.50

6.00min,其异构体的出峰时间限定在6.30

6.80min。
[0012]在目前现有对3

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亚硝基甲氨基)丙腈的检测中,通常仅检测目标物本身的含量,而本公开发现,3

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亚硝基甲氨基)丙腈与其异构体在一定条件下能够相互转化,且转化条件极为简单,因此,在对3

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亚硝基甲氨基)丙腈含量的检测中,本公开创造性的将3

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亚硝基甲氨基)丙腈异构体的浓度也纳入本公开提供的检测方法中,进而避免了在检测结束后,3

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亚硝基甲氨基)丙腈与其异构体相互转化而导致的检测不准的情况。
[0013]在本公开中,所述液相色谱检测参数包括:
[0014]色谱柱为Thermo Hypersil GOLD
TM
,流动相为含有乙腈和甲酸的水溶液,流速为0.8

1.2mL/min,检测波长为230nm,柱温为35

45℃。
[0015]本公开发现,虽然3

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亚硝基甲氨基)丙腈的最大吸收波长为226.6nm,其异构体的最大吸收波长为231.3nm,但本公开优选检测波长为230nm,此时,3

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亚硝基甲氨基)丙腈和其异构体二者的比例大约为80:20,与核磁检测结果能够相互印证,因此对样品的检测更为准确。
[0016]作为本公开的一种优选技术方案,所述流动相中乙腈、甲酸和水的体积比为500:1:9500。
[0017]作为本公开的一种优选技术方案,所述标准溶液中含有6个级别浓度的3

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亚硝基甲氨基)丙腈标准品。
[0018]本公开所述的6个级别浓度分别为4.5μg/mL、9.0μg/mL、22.0μg/mL、44.0μg/mL、110.0μg/mL、440.0μg/mL,同时,还可以将纯溶剂纳入标准溶液中。
[0019]作为本公开的一种优选技术方案,所述待测样本的前处理方法包括:所述待测样本的前处理方法包括:将待测样本进行抽提、浓缩、硅胶柱洗脱、再次浓缩,然后色谱柱分离、干燥,得到能够用于检测分析的样品。
[0020]作为本公开的一种优选技术方案,本公开现提供以下前处理方法:
[0021]当检测样本为固体样本时,将样本进行粉碎,然后利用乙酸乙酯连续提取6h,提取完成后乙酸乙酯用MgSO4干燥,旋转蒸发浓缩至约为2mL;浓缩后样品在2

x 15

cm硅胶柱(40

140目)上用100mL乙酸乙酯洗脱,洗脱液蒸发浓缩至约1mL后,采用薄层色谱(硅胶,2mm;层析液乙醚:甲醇=9:1)分离;对应3

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亚硝基甲氨基)丙腈的条带采用二氯甲烷提取,浓缩至约为1mL,最后用kudena

danish装置干燥,每个样品溶于50μL乙酸乙酯中,用GC

TEA分析。
[0022]当检测样本为液体样本时,收集液体样本,0

5℃保存在50mL丙酮:水(50:50)的混合溶液中,在48h内完成分析;保存的样本用乙酸乙酯连续提取6h,后续参考固体样本的前处理。
[0023]本公开提供的分析方法能够检出极少量的目标物,作为本公开的一种优选技术方案,在所述分析方法中,3倍噪声对应的检出限浓度为0.37μg/mL。
[0024]本公开实施例提供的技术方案与现有技术相比具有如下优点:
[0025]本公开提供的分析方法创造性的本文档来自技高网
...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种检测3

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亚硝基甲氨基)丙腈含量的液相色谱分析方法,其特征在于,所述液相色谱分析方法包括如下步骤:(1)制备标准溶液,并确定3

(N

亚硝基甲氨基)丙腈的标准曲线,在所述标准曲线中,Y为5.50

6.00min和6.30

6.80min对应的峰面积之和;(2)利用液相色谱分析方法对待测样本进行检测,在得到的色谱图中,目标物对应的峰面积为5.50

6.00min和6.30

6.80min对应的峰面积之和。2.根据权利要求1所述的液相色谱分析方法,其特征在于,所述液相色谱检测参数包括:色谱柱为Thermo Hypersil GOLD
TM
,流动相为含有乙腈和甲酸的水溶液,流速为0.8...

【专利技术属性】
技术研发人员:关皓月牛剑钊冯玉飞孙百浩马玲云刘倩
申请(专利权)人:中国食品药品检定研究院
类型:发明
国别省市:

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