一种肝豆灵片的质量评价方法技术

一种肝豆灵片的质量评价方法，属于复方中药制剂质量评价技术领域，取肝豆灵片适量研碎，加甲醇超声提取，过滤膜过滤；精密称取对照品加甲醇配置成一定浓度对照品溶液；流动相选择乙腈

【技术实现步骤摘要】
一种肝豆灵片的质量评价方法


[0001]本专利技术属于复方中药制剂质量评价
，具体是涉及一种肝豆灵片的质量评价方法。

技术介绍

[0002]目前，中药指纹图谱技术主要包括薄层扫描(TLCS)、高效液相色谱法(HPLC)、气相色谱法(GC)和高效毛细管电泳法(HPCE)等色谱法，以及紫外光谱法(UV)、红外光谱法(IR)、质谱法(MS)、核磁共振法(NMR)和X射线衍射法等光谱法。
[0003]由于高效液相色谱法(HPLC)具有分离效能高、选择性高、检测灵敏度高、分析速度快、应用范围广等特点，而且中药成分绝大多数可在高效液相色谱仪上进行分析检测。因此高效液相色谱法已成为中药指纹图谱技术的首选方法。
[0004]肝豆灵片为安徽中医药大学第一附属医院的医院制剂。该制剂处方主要由黄连，丹参等中药组成，主要功效为清热解毒、化瘀软坚、利胆排铜。目前，该制剂的主要质量控制方法是利用制剂中的黄连为对照药材，采用HPLC法测定制剂中盐酸小檗碱，芦荟大黄素含量。但是，目前这种质量控制方法手段较为单一，不能全面控制和反应该制剂的质量。

技术实现思路

[0005]为了解决上述技术问题，本专利技术提供了一种肝豆灵片的质量评价方法，采用HPLC技术首先建立肝豆灵片的指纹图谱，然后实现较全面地控制制剂的质量。
[0006]本专利技术所采用的技术方案为：一种肝豆灵片的质量评价方法，步骤如下：
[0007](1)肝豆灵片的制备
[0008]肝豆灵片处方组成为：黄连182g、丹参91g、鸡血藤91g、大黄82g、莪术82g、姜黄82g；
[0009]肝豆灵片生产方法为：
[0010]①
大黄、莪术、姜黄混合铺平于烘盘中，放入烘箱干燥(≤75℃)，粉碎，用100目筛，细粉备用；
[0011]②
粗粉同黄连、丹参合并用75％乙醇回流提取二次，第一次加10倍量乙醇回流2小时，第二次加8倍量乙醇回流1.5小时，合并醇提液，滤过，回收乙醇；药渣加8倍量水煎煮1小时，滤过，静置沉淀48小时，吸取上清液，同醇提液合并减压浓缩(压力：
‑
0.02～
‑
0.04MPa)至相对密度为1.10(60℃)的清膏；
[0012]③
鸡血藤加水煎煮提取三次，第一次加10倍量水煎煮1.5小时，第二、三次加8倍量水煎煮1小时，合并煎液，滤过，静置沉淀48小时，吸取上清液，减压浓缩(压力：
‑
0.02～
‑
0.04MPa)至相对密度为1.10(60℃)的清膏；
[0013]④
合并上述两种清膏，加入上述药物细粉、淀粉90g、单糖浆20mL制粒，干燥(＜75℃)，整粒(上筛10目，下筛60目)，加入硬脂酸镁1.5g，混匀，压制成1000片，即得肝豆灵片；
[0014](2)供试品溶液的制备：
[0015]取肝豆灵片10片，研碎，取细粉0.3克，置10ml容量瓶中，加甲醇定容，超声20分钟，以12000r/min转速离心取滤液以0.22μm过滤膜过滤，得到供试品溶液；
[0016](3)对照品溶液制备：
[0017]精密称取对照品表小檗碱，黄连碱、巴马汀、盐酸小檗碱、芦荟大黄素、大黄酸、丹参酮Ⅰ、丹参酮ⅡA一定量，加甲醇配置成表小檗碱0.239mg/ml，黄连碱0.211mg/ml、巴马汀0.277mg/ml、盐酸小檗碱0.216mg/ml、芦荟大黄素0.243mg/ml、大黄酸0.252mg/ml、丹参酮Ⅰ0.224mg/ml、丹参酮ⅡA0.261mg/ml；
[0018](4)色谱条件：
[0019]流动相选择乙腈(A)
‑
磷酸二氢钾溶液(以磷酸调节pH值为3.0)(B)，采用梯度洗脱；洗脱条件为：0
‑
2min，22％A；2
‑
9min，22％A；9
‑
12min，25％A；12
‑
14min，55％A；14
‑
22min，65％A；22
‑
23min，100％A；23
‑
24min，15％A；24
‑
25min，15％A；25min后停止；
[0020]检测器选择DAD，检测波长为250nm；柱温为30.0℃；流速为0.2ml/min；进样量为1ul；色谱柱选择ACQUITY UPLC BEH C
18
；
[0021](5)指纹图谱建立：
[0022]制备10批肝豆灵片样品供试品溶液，按照上述色谱条件分别进样，得到10批样品HPLC图谱，导入相似度评价软件中，计算10批样品相似度，并确定标准指纹图谱；
[0023]将制备的对照品溶液以相同色谱条件进样分析，将所得到的对照品图谱与标准指纹图谱进行对比，指认出标准指纹图谱中对照品对应色谱峰峰号；
[0024](6)质量评价：
[0025]建立指纹图谱后，进行方法学验证考察精密度、稳定性以及重复性，再利用相同色谱条件检测待测样品，检测结果通过相似度评价软件对比评价，相似度大于0.90则符合肝豆灵片质量要求，从而完成对待测肝豆灵片样品的质量评价。
[0026]作为本专利技术的另一目的，本专利技术提出了一种肝豆灵片的组方以及生产方法，其中所述肝豆灵片的处方组成为：黄连182g、丹参91g、鸡血藤91g、大黄82g、莪术82g、姜黄82g；所述肝豆灵片的生产方法为：
[0027]①
大黄、莪术、姜黄混合铺平于烘盘中，放入烘箱干燥(≤75℃)，粉碎，用100目筛，细粉备用；
[0028]②
粗粉同黄连、丹参合并用75％乙醇回流提取二次，第一次加10倍量乙醇回流2小时，第二次加8倍量乙醇回流1.5小时，合并醇提液，滤过，回收乙醇；药渣加8倍量水煎煮1小时，滤过，静置沉淀48小时，吸取上清液，同醇提液合并减压浓缩(压力：
‑
0.02～
‑
0.04MPa)至相对密度为1.10(60℃)的清膏；
[0029]③
鸡血藤加水煎煮提取三次，第一次加10倍量水煎煮1.5小时，第二、三次加8倍量水煎煮1小时，合并煎液，滤过，静置沉淀48小时，吸取上清液，减压浓缩(压力：
‑
0.02～
‑
0.04MPa)至相对密度为1.10(60℃)的清膏；
[0030]④
合并上述两种清膏，加入上述药物细粉、淀粉90g、单糖浆20mL制粒，干燥(＜75℃)，整粒(上筛10目，下筛60目)，加入硬脂酸镁1.5g，混匀，压制成1000片，即得肝豆灵片；肝豆灵片的性状：土黄色的片；气微香，味苦涩。
[0031]本专利技术的有益效果表现在：
[0032](1)指纹图谱技术是一种综合的鉴定手段，专属性强，稳定性高、重复性好，能较全
面的评价药材的真实性、优良性。因此，本专利技术利用超高效液相色谱法构建了肝豆灵本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种肝豆灵片的质量评价方法，其特征在于，步骤如下：(1)肝豆灵片的制备肝豆灵片处方组成为：黄连182g、丹参91g、鸡血藤91g、大黄82g、莪术82g、姜黄82g；肝豆灵片生产方法为：
①
大黄、莪术、姜黄混合铺平于烘盘中，放入烘箱干燥(≤75℃)，粉碎，用100目筛，细粉备用；
②
粗粉同黄连、丹参合并用75％乙醇回流提取二次，第一次加10倍量乙醇回流2小时，第二次加8倍量乙醇回流1.5小时，合并醇提液，滤过，回收乙醇；药渣加8倍量水煎煮1小时，滤过，静置沉淀48小时，吸取上清液，同醇提液合并减压浓缩(压力：
‑
0.02～
‑
0.04MPa)至相对密度为1.10(60℃)的清膏；
③
鸡血藤加水煎煮提取三次，第一次加10倍量水煎煮1.5小时，第二、三次加8倍量水煎煮1小时，合并煎液，滤过，静置沉淀48小时，吸取上清液，减压浓缩(压力：
‑
0.02～
‑
0.04MPa)至相对密度为1.10(60℃)的清膏；
④
合并上述两种清膏，加入上述药物细粉、淀粉90g、单糖浆20mL制粒，干燥(＜75℃)，整粒(上筛10目，下筛60目)，加入硬脂酸镁1.5g，混匀，压制成1000片，即得肝豆灵片；(2)供试品溶液的制备：取肝豆灵片10片，研碎，取细粉0.3克，置10ml容量瓶中，加甲醇定容，超声20分钟，以12000r/min转速离心取滤液以0.22μm过滤膜过滤，得到供试品溶液；(3)对照品溶液制备：精密称取对照品表小檗碱，黄连碱、巴马汀、盐酸小檗碱、芦荟大黄素、大黄酸、丹参酮Ⅰ、丹参酮ⅡA一定量，加甲醇配置成表小檗碱0.239mg/ml，黄连碱0.211mg/ml、巴马汀0.277mg/ml、盐酸小檗碱0.216mg/ml、芦荟大黄素0.243mg/ml、大黄酸0.252mg/ml、丹参酮Ⅰ0.224mg/ml、丹参酮ⅡA0.261mg/ml；(4)色谱条件：流动相选择乙腈(A)
‑
磷酸二氢钾溶液(以磷酸调节pH值为3.0)(B)，采用梯度洗脱；洗脱条件为：0
‑
2min，22％A；2
‑
9min，22％A；9
‑
12min，25％A；12
‑
14min，55％A；14
‑
22m...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈浩，杨文明，汪永忠，韩燕全，敖慧豪，
申请(专利权)人：安徽中医药大学第一附属医院安徽省中医院，
类型：发明
国别省市：