一种利用鸟苷制备鸟嘌呤和D-核糖的方法技术

本发明专利技术提供了一种利用鸟苷制备鸟嘌呤和D

【技术实现步骤摘要】
一种利用鸟苷制备鸟嘌呤和D
‑
核糖的方法


[0001]本专利技术涉及生物工程
，尤其涉及一种利用鸟苷制备鸟嘌呤和D
‑
核糖的方法。

技术介绍

[0002]鸟嘌呤是嘌呤类有机化合物，是由一个嘧啶环和一个咪唑环稠和而成的，是嘌呤的一种，由碳和氮原子组成具有特征性双环结构。鸟嘌呤是一种重要的医药中间体，主要用作抗病毒药物阿昔洛韦和伐昔洛韦的合成，也用于硫鸟嘌呤、开环鸟嘌呤的合成。鸟嘌呤也是天然的白色颜料，无毒。一般化妆品中均可使用，主要用作唇膏、指甲油和眼部化妆品的珠光剂。
[0003]目前鸟嘌呤的传统生产主要为化学合成法和鸟苷的酸解法。化学法主要以5
‑
氨基
‑4‑
咪唑酰胺与异硫氰酸苯甲酯为原料，或以2,4
‑
二氨基
‑5‑
甲酰胺基
‑6‑
羟基嘧啶为主原料制得。化学法制备鸟嘌呤污染非常大。鸟苷酸解法一般以鸟苷为原料，通过酸解方法得到鸟嘌呤。中国专利CN112522351A《一种鸟嘌呤的合成方法》提到用鸟苷发酵液或鸟苷成品制备鸟嘌呤的方法，该方法采用酸解的方式，而且鸟苷水解产的D
‑
核糖没有得到有效回收。

技术实现思路

[0004]有鉴于此，本专利技术的目的在于提供一种利用鸟苷制备鸟嘌呤和D
‑
核糖的方法，本专利技术利用鸟苷不仅能够制备得到鸟嘌呤，还能够回收D
‑
核糖。
[0005]为了实现上述专利技术目的，本专利技术提供以下技术方案：
[0006]本专利技术提供了一种利用鸟苷制备鸟嘌呤和D
‑
核糖的方法，包括以下步骤：
[0007]1)将鸟苷与水混合，得到浑浊液，将所述浑浊液与鸟苷水解酶溶液混合、酶解，得到酶解液；
[0008]2)将所述步骤1)得到的酶解液进行抽滤，得到滤饼和滤液，将所述滤饼依次经打浆、抽滤和烘干，得到鸟嘌呤；
[0009]3)将所述步骤2)得到的滤液依次经上柱处理、脱色、浓缩、结晶和烘干，得到D
‑
核糖。
[0010]优选的，所述鸟苷与水的质量比为1:3～4。
[0011]优选的，所述步骤1)鸟苷水解酶溶液中鸟苷水解酶的酶活为5000～30000U/ml。
[0012]优选的，所述鸟苷的质量与鸟苷水解酶溶液的体积比为1kg:100～250ml，所述鸟苷的质量与产鸟苷水解酶的微生物菌体质量比为25～50:1。
[0013]优选的，所述酶解的条件包括：酶解的温度为37℃，酶解的时间为8～12h。
[0014]优选的，所述步骤2)使用水进行打浆，所述滤饼的质量与水的体积比为1～2L:5L；
[0015]所述打浆重复的次数为4次。
[0016]优选的，所述步骤2)烘干的条件包括：在真空度为
‑
0.095MPa、温度为60℃下烘干12h。
[0017]优选的，所述步骤3)上柱处理使用的柱包括活性炭柱、串联柱或大孔吸附树脂柱；
[0018]所述串联柱为阳离子树脂和阴离子树脂柱的串联柱。
[0019]优选的，所述步骤3)结晶使用的试剂为无水乙醇；
[0020]所述结晶的条件包括：结晶的温度为5℃，结晶的时间为12h。
[0021]优选的，所述步骤3)烘干的条件包括：在真空度为
‑
0.095MPa、温度为60℃下烘干12h。
[0022]本专利技术的有益效果是：
[0023]采用本专利技术提供的方法，鸟嘌呤的摩尔收率为94.1～96.9％，纯度为99.91～99.92％，质量收率为50.2～51.7％；D
‑
核糖的摩尔收率为85.4～88.3％，纯度为99.91～99.93％，透光率为99.5～99.8％，质量收率为45.3～46.8％。
具体实施方式
[0024]本专利技术提供了一种利用鸟苷制备鸟嘌呤和D
‑
核糖的方法，包括以下步骤：
[0025]1)将鸟苷与水混合，得到浑浊液，将所述浑浊液与鸟苷水解酶溶液或产鸟苷水解酶的微生物菌体混合、酶解，得到酶解液；
[0026]2)将所述步骤1)得到的酶解液进行抽滤，得到滤饼和滤液，将所述滤饼依次经打浆、抽滤和烘干，得到鸟嘌呤；
[0027]3)将所述步骤2)得到的滤液依次经上柱处理、脱色、浓缩、结晶和烘干，得到D
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核糖。
[0028]本专利技术将鸟苷与水混合，得到浑浊液，将所述浑浊液与鸟苷水解酶溶液混合、酶解，得到酶解液。
[0029]本专利技术对所述鸟苷的来源没有特殊限定，采用市售产品即可，纯度在99.5％以上。在本专利技术中，所述鸟苷与水的质量比优选为1:3～4。在本专利技术中，所述鸟苷水解酶溶液中鸟苷水解酶的酶活优选为10000～20000U/ml，产鸟苷水解酶的微生物菌体酶活为10000～80000U/g，本专利技术中，所述产鸟苷水解酶的微生物菌体为发酵得到的含有鸟苷水解酶的菌体。在本专利技术中，所述鸟苷水解酶将鸟苷水解为鸟嘌呤和D
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核糖。在本专利技术中，所述鸟苷的质量与鸟苷水解酶溶液的体积比优选为1kg:100～250ml，所述鸟苷的质量与产鸟苷水解酶的微生物菌体质量比为25～50:1。在本专利技术中，所述酶解的条件优选包括：酶解的温度为37℃，酶解的时间为8～12h。本专利技术优选在水浴条件下进行酶解。
[0030]本专利技术将得到的酶解液进行抽滤，得到滤饼和滤液，将所述滤饼依次经打浆、抽滤和烘干，得到鸟嘌呤。
[0031]本专利技术优选抽滤后用水淋洗，合并抽滤液和淋洗液后，得到滤液。本专利技术优选使用水进行打浆，所述滤饼的质量与水的体积比优选为1～2L:5L。在本专利技术中，所述打浆重复的次数优选为4次。在本专利技术中，所述烘干的条件优选包括：在真空度为
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0.095MPa、温度为60℃下烘干12h。
[0032]本专利技术将得到的滤液依次经上柱处理、脱色、浓缩、结晶和烘干，得到D
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核糖。
[0033]在本专利技术中，所述上柱处理使用的柱包括活性炭柱、串联柱或大孔吸附树脂柱；所述串联柱为阳离子树脂和阴离子树脂柱的串联柱。在本专利技术中，当使用活性炭柱时，装填量为300ml活性炭，上柱流速优选为1BV/h。本专利技术对其它使用活性炭柱的处理条件没有特殊
限定，本领域技术人员依据常规操作即可。当使用串联柱时，所述串联柱为阳离子树脂和阴离子树脂柱的串联柱，装填量均为300ml树脂，阳离子树脂为强酸性阳离子交换树脂，优选001
×
4和001
×
7阳离子树脂，阴离子树脂为强碱性阴离子交换树脂，优选711和717树脂。上柱流速优选为1BV/h。本专利技术对其它使用串联柱的处理条件没有特殊限定，本领域技术人员依据常规操作即可。当使用大孔吸附树脂柱时，柱中装有300ml HP
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20大孔吸附树脂，上柱流速优选为1BV/h。本专利技术对本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种利用鸟苷制备鸟嘌呤和D
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核糖的方法，其特征在于，包括以下步骤：1)将鸟苷与水混合，得到浑浊液，将所述浑浊液与鸟苷水解酶溶液或产鸟苷水解酶的微生物菌体混合、酶解，得到酶解液；2)将所述步骤1)得到的酶解液进行抽滤，得到滤饼和滤液，将所述滤饼依次经打浆、抽滤和烘干，得到鸟嘌呤；3)将所述步骤2)得到的滤液依次经上柱处理、脱色、浓缩、结晶和烘干，得到D
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核糖。2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述鸟苷与水的质量比为1:3～4。3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤1)鸟苷水解酶溶液中鸟苷水解酶的酶活为5000～30000U/ml，产鸟苷水解酶的微生物菌体酶活为10000～80000U/g。4.根据权利要求1或3所述的方法，其特征在于，所述鸟苷的质量与鸟苷水解酶溶液的体积比为1kg:100～250ml，所述鸟苷的质量与产鸟苷水解酶的微生物菌体质量比为25～50:1。5....

【专利技术属性】
技术研发人员：吴志卿，吕祖平，徐永鑫，攸德伟，刘存虎，赵喜，
申请(专利权)人：台州市厚普生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：