一种甲鱼蛋活性肽冻干粉的制备方法及其应用技术

本发明专利技术涉及生物技术领域，公开了一种甲鱼蛋活性肽冻干粉的制备方法及其应用，包括如下步骤：S1：选取生态良好的甲鱼蛋，甲鱼蛋中受精蛋与未受精蛋的组分比例为30~40：60~70，之后受精蛋进行孵化，未受精蛋冷藏待用；S2：受精蛋与未受精蛋去蛋壳后加水蒸煮，使用木瓜蛋白酶和蛋白酶M酶解灭菌；S3：接着，依次经研磨、过滤、真空浓缩后成浆状，再经冻干后处理，得到甲鱼蛋活性肽冻干粉。本发明专利技术中的甲鱼蛋活性肽冻干粉能够完全保留甲鱼蛋的活性成份，确保生物活性成分不损失；甲鱼受精蛋与未受精蛋一同去壳酶解成小分子活性肽冻干品，更有利于人体消化吸收，营养保健效果更好。营养保健效果更好。

【技术实现步骤摘要】
一种甲鱼蛋活性肽冻干粉的制备方法及其应用


[0001]本专利技术涉及生物
，尤其涉及一种甲鱼蛋活性肽冻干粉的制备方法及其应用。

技术介绍

[0002]甲鱼，学名中华鳖，俗称王八、团鱼、元鱼，是中国几千年来的本土物种。甲鱼具有极强的生命力和长寿基因，有千年王八的民间传说，因此人们以甲鱼为养生食材，并衍生出丰富药食同源的营养健康美食。6000多年前的宁波河姆渡遗址出土有陶罐及甲鱼甲骨，先民在当时已有食用甲鱼的习惯。宁波名菜“冰糖状元甲鱼”的故事讲述宁绍平原有喜食甲鱼健脑益智，强健体力赴京赶考中举状元。《红楼梦》作者曹雪芹把甲鱼烘焙成粉与蜂蜜加工成“定黄丹”治病。公元前460年，越国大臣范蠡功成辞官经商养甲鱼，所著“养鱼经”中的鱼鳖混养技术于现代还有很大的指导意义，现今全国年消费甲鱼20多万吨左右，满足了人们追求营养健康的美食需求。
[0003]甲鱼蛋含有丰富的蛋白质卵磷脂、不饱和脂肪酸、氨基酸、矿物质、叶酸及维生素B1、B
12
、A、E等，具有养颜美容、强身健体、滋阴补阳、预防妇女病、改善更年期障碍等功能特性，特别是对于男女肾功能衰退、肾脏疾病具有食疗改善效果。2001年5月16日“第55次日本营养
·
食粮学会”发表的“甲鱼卵含有食疗丝球体肾炎各种症状的改善效果”，表明在用餐时同时吃适量甲鱼卵能对肾炎有治愈效果。随着现代生物学的发展，越来越多的人利用生物酶解技术酶解甲鱼蛋，从而获得许多具有生理功能的生物活性多肽，例如，公开号为CN104707128B的中国专利技术专利公开了一种将甲鱼蛋进行酶法水解制备抗氧化活性液的方法，包括步骤：反渗透水清洗、搅拌、钝化、过滤、离心、浓缩、膜过滤、灌装密封。但是，该专利技术技术方案制得的抗氧化活性液为氨基酸、肽类和较大分子的蛋白混合液，其中活性肽含量较低，进而生物学价值和经济效益也较低。

技术实现思路

[0004]为了解决甲鱼蛋活性肽制备过程中活性肽含量较低以及营养成分破坏的问题，本专利技术提供了一种甲鱼蛋活性肽冻干粉的制备方法及其应用，利用甲鱼蛋直接酶解制备小分子活性肽冻干粉，其既能充分被人体消化吸收，又不因加工而营养成分破坏损失，具备较佳的营养价值和经济效益。
[0005]本专利技术的具体技术方案为：第一方面，本专利技术提供了一种甲鱼蛋活性肽冻干粉的制备方法，包括如下步骤：S1：选取生态良好的甲鱼蛋，甲鱼蛋中受精蛋与未受精蛋的组分比例为30～40：60～70，之后受精蛋进行孵化，未受精蛋冷藏待用；S2：受精蛋与未受精蛋去蛋壳后加水蒸煮，使用木瓜蛋白酶和蛋白酶M酶解灭菌；S3：接着，依次经研磨、过滤、真空浓缩后成浆状，再经冻干后处理，得到甲鱼蛋活性肽冻干粉。
[0006]甲鱼蛋有受精蛋和未受精蛋，受精蛋必须是活蛋，活胚胎蛋具有生物活性和多种营养功能物质，死胚胎易变质腐败必须除去。未受精蛋必须新鲜，外观发黑发臭，浮在水面的蛋不能使用，须清除干净，否则会严重影响质量。受精蛋孵化完成后，外观蛋胚形成红褐色，受精蛋孵化后的功能营养成分提高，把去壳后受精蛋与未受精蛋加适量水蒸煮后研磨。接着在适宜温度条件下用木瓜蛋白酶和蛋白酶M酶解后灭菌，木瓜蛋白酶和蛋白酶M酶的复合酶解能够达到酶酸碱平衡，有利于更好的酶解。经酶解成小分子活性肽，过滤、真空浓缩成浆状，然后经冷冻后处理得到甲鱼蛋活性肽冻干粉。甲鱼蛋活性肽冻干粉能够完全保留甲鱼蛋的活性成份，确保生物活性成分不损失。并且，甲鱼受精蛋与未受精蛋一同去壳酶解成小分子活性肽冻干品，更有利于人体消化吸收，营养保健效果更好，该制备方法不添加任何防腐剂、香精和助剂，产品达到纯正。
[0007]作为优选，S1中，所述孵化为：温度保持28
±
3℃，湿度80
±
5％，孵化时间22
±
3天。
[0008]作为优选，S2中，所述木瓜蛋白酶和蛋白酶M酶的质量比为1：1～2；所述酶解灭菌的温度为50～60℃。
[0009]作为优选，S2中，所述甲鱼蛋与木瓜蛋白酶和蛋白酶M酶的总质量比为1000：1
‑
4。
[0010]作为优选，S2中，所述木瓜蛋白酶和蛋白酶M酶为使用改性海藻糖固定化，包括如下步骤：将海藻糖、香兰素加入乙二醛水溶液中30～50℃反应3～5h，再加入4
‑
羟基肉桂酸继续反应1～3h，反应完成后过滤、洗涤；将所得物、木瓜蛋白酶、蛋白酶M酶和水混合后于冰浴中搅拌，再依次经过滤、干燥，得到改性海藻糖固定化蛋白酶。
[0011]海藻糖具有较高的稳定性，与蛋白酶混合加热的条件下也不会发生美拉德反应，并且其能够有效地保护、稳定细胞膜和蛋白质结构的特性，保持较高的生物活性功能。此外，海藻糖具有水溶性，能够提高蛋白酶的分散性以及蛋白酶酶解效率。在甲鱼蛋加工提取活性肽的过程中可能产生的腥味或者异臭味，海藻糖还具有矫味、矫臭作用，与海藻糖间通过交联结合的香兰素也能够进一步改善产品气味，提高产品品质。此外，4
‑
羟基肉桂酸加入后的进一步结合反应，一方面能够改变细胞的渗透压，破坏细胞膜物质，提高活性肽的溶出速率，大大提高了提取的效率，另一方面能够作用于蛋白质的疏水端，同时提高蛋白酶和活性肽在水中的溶解度，使得酶解效率提高的同时，所得酶解液中活性多肽的含量提高，各活性多肽间起到增益作用，提高产品营养价值。相比于单独加入4
‑
羟基肉桂酸，其作为蛋白酶载体加入能够进一步提高酶解效率，促进蛋白酶与细胞间的有效接触酶解的同时，促进活性肽的溶出、溶解。
[0012]改性交联后的海藻糖表面富有羟基、羧基等活性基团，可作为蛋白酶的固定化载体，与蛋白酶游离的氨基与羧基具有良好的结合性，蛋白酶吸附在载体上形成改性海藻糖固定化蛋白酶。并且，在冰浴中固定化可降低载体在水中的溶解度，使得蛋白酶能够实现稳定吸附结合，提高固定化的牢固度。
[0013]作为优选，所述海藻糖、香兰素、乙二醛和4
‑
羟基肉桂酸的质量比为100：1～3：5～10：4～10；所述乙二醛水溶液的浓度为15～25％；所述所得物与木瓜蛋白酶和蛋白酶M酶的总质量比为2～5：1。
[0014]乙二醛的添加量决定了物质间的结合稳定性，其添加过多在加热反应时会发生自聚合，副反应增多，降低了固定化载体的稳定性，并且，乙二醛水溶液的浓度与乙二醛在水溶液中的分散度有关，同样影响着乙二醛的反应活性，在该范围内能够降低其发生自聚合
的概率，提高物质间的结合稳定性。固定化载体和蛋白酶间的比例则影响着固定化的稳定性。
[0015]作为优选，S3中，所述冻干后处理包括冷冻真空干燥后磨粉。
[0016]作为优选，所述冷冻真空干燥的温度为
‑
40～
‑
30℃，所得冻干品的水分小于5％。
[0017]作为优选，所述甲鱼蛋活性肽冻干粉的目数为35～40目；所得甲鱼蛋活性肽冻干粉使用PET/AL/PA/PE铝塑复合袋封装。
[0018]第二方面，本专利技术还提供了上述制备方法制备得本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种甲鱼蛋活性肽冻干粉的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：S1：选取生态良好的甲鱼蛋，甲鱼蛋中受精蛋与未受精蛋的组分比例为30~40：60~70，之后受精蛋进行孵化，未受精蛋冷藏待用；S2：受精蛋与未受精蛋去蛋壳后加水蒸煮，使用木瓜蛋白酶和蛋白酶M酶酶解灭菌；S3：接着，依次经研磨、过滤、真空浓缩后成浆状，再经冻干后处理，得到甲鱼蛋活性肽冻干粉。2.如权利要求1所述甲鱼蛋活性肽冻干粉的制备方法，其特征在于，S1中，所述孵化为：温度保持28
±
3℃，湿度80
±
5％，孵化时间22
±
3天。3.如权利要求1所述甲鱼蛋活性肽冻干粉的制备方法，其特征在于，S2中，所述木瓜蛋白酶和蛋白酶M酶的质量比为1：1~2；所述酶解灭菌的温度为50~60℃。4.如权利要求1所述甲鱼蛋活性肽冻干粉的制备方法，其特征在于，S2中，所述甲鱼蛋与木瓜蛋白酶和蛋白酶M酶的总质量比为1000：1~4。5.如权利要求1或3或4所述甲鱼蛋活性肽冻干粉的制备方法，其特征在于，S2中，所述木瓜蛋白酶和蛋白酶M酶为使用改性海藻糖固定化，包括如下步骤：将海藻糖、香兰素加入乙二醛水溶液中30~50℃反应3~...

【专利技术属性】
技术研发人员：张建人，陈敬群，张道平，樊永俊，
申请(专利权)人：杭州萧山天福生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：