一种燕麦抗氧化肽的制备及纯化鉴定方法技术

本发明专利技术公开了一种燕麦抗氧化肽的制备方法，包括以下步骤：(1)燕麦蛋白的提取；(2)酶解；(3)燕麦抗氧化肽的获得。本发明专利技术通过酶解法获得燕麦抗氧化肽，制备及纯化过程简单易操作，成本低廉。本发明专利技术采用质谱法可以准确识别具有抗氧化活性的燕麦肽段。本发明专利技术鉴定了特定序列的燕麦抗氧化肽，具有开发新的保健食品的潜力，填补了国内在此方面的研究空白，为未来工业生产提供一定的参考价值。工业生产提供一定的参考价值。工业生产提供一定的参考价值。

【技术实现步骤摘要】
一种燕麦抗氧化肽的制备及纯化鉴定方法


[0001]本专利技术属于食品加工
，具体涉及一种燕麦抗氧化肽的制备及纯化方法。

技术介绍

[0002]机体在正常代谢情况下会产生活性氧如自由基和过氧化物等，活性氧可激活各种酶级联和多种转录因子，在机体生理过程中发挥重要的调节作用。正常情况下，活性氧可以被机体自身的抗氧化防御系统有效清除，即活性氧的产生和消除处于平衡状态。当活性氧产生过多或机体抗氧化防御系统受到损伤时，这种平衡就会被打破，导致机体处于氧化应激状态，持续累积的活性氧能够直接或间接地破坏多种生物分子，包括蛋白质、脂质、DNA和碳水化合物等，引发许多疾病。目前，癌症、心血管疾病、糖尿病、神经系统疾病和阿尔茨海默病等200多种常见疾病均与活性氧密切相关。
[0003]抗氧化剂通过向自由基提供电子或氢原子形成复合物，可保护人体免受自由基损伤并延缓许多疾病的进展。当内源性抗氧化剂和修复系统不能有效清除活性氧时，服用外源性抗氧化剂能够帮助限制或抑制机体氧化应激，降低疾病发生率。常见人工合成的抗氧化剂包括丁基羟基茴香醚、没食子酸丙酯、丁基羟基本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种燕麦抗氧化肽的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)燕麦蛋白的提取将磨粉过筛的燕麦粉加水溶解，调节pH至10.0，恒温水浴浸提，离心后分离取上清液，调节上清液pH至蛋白质等电点，离心取蛋白质沉淀，干燥得燕麦蛋白质干粉；(2)酶解步骤(1)制备的燕麦蛋白质干粉加水溶解，调节pH至9
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10，加酶恒温水浴酶解，灭酶冷却后离心，取上清液；(3)燕麦抗氧化肽的获得将步骤(2)获得的上清液经干燥后得粉末状燕麦抗氧化肽。2.根据权利要求1所述的燕麦抗氧化肽的制备方法，其特征在于，步骤(1)中，恒温水浴浸提的条件为置于55℃，浸提120min；恒温水浴浸提后在8000r/min离心15min。3.根据权利要求1所述的燕麦抗氧化肽的制备方法，其特征在于，步骤(1)中，用1mol/L HCl调节上清液pH至4.0，使pH至蛋白质等电点；8000r/min离心20min后取蛋白质沉淀；干燥方法为真空冷冻干燥。4.根据权利要求1所述的燕麦抗氧化肽的制备方法，其特征在于，步骤(2)中，将燕麦蛋白质干粉配置成质量浓度为8％的水溶液；利用1mol/L NaOH溶液调节pH至9.5。5.根据权利要求1所述的燕麦抗氧化肽的制备方法，其特征在于，步骤(2)中，选择碱性蛋白酶Alcalase 2.4L FG进行酶解；酶解条件为：温度设置为55℃，按1.6mL/L的体积比加入碱性蛋白酶Alcalase 2.4L FG，酶解时间为90min；碱性蛋白酶Alcalase 2.4L FG的酶单位为2.4AU。6.根据权利要求1
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5中任一项权利要求所述的燕麦抗氧化肽的制备方法，其特征在于，还包括采用超滤法和凝胶柱层析法对抗氧化肽进行纯化的步骤。7.根据权利要求6所述的燕麦抗氧化肽的制备方法，其特征在于，超滤法和凝胶柱层析法对抗氧化肽进行纯化的具体步骤如下：。(1)超滤纯化将上述制好的燕麦抗氧化肽干粉配置成水溶液，依次通过不同截留分子量的超滤膜进行分级超滤，分别将超滤后的各组分溶液收集后冻干，进行抗氧化活性检测。(2)凝胶柱层析纯化将上述抗氧化活性最高的超滤组分配置成水溶液，通过凝胶柱层析法进一步分离纯化，经过多次上样分别收集各组分，冻干后分别测定其抗氧化活性。8.根据权利要求7所述的燕麦抗氧化肽的制备方法，其特征在于，步骤(1)中，超滤膜分级超滤的不同截留分子量分别为5000Da、3000Da和1000Da；步骤(2)中，凝胶柱层析所用填料...

【专利技术属性】
技术研发人员：何远清，郭蕊，陈敏，
申请(专利权)人：江苏大学，
类型：发明
国别省市：