一种改善宠物犬猫排便功能的低聚肽制备方法技术

本发明专利技术公开了一种改善宠物犬猫排便功能的低聚肽制备方法，涉及活性肽制备领域，具体涉及一种先对小麦谷朊粉进行预水解，利用淀粉酶、葡萄糖氧化酶和超声波空化作用氧化断裂蛋白二硫键，继续适度酶解，制备含高半胱氨酸及其氧化物的小麦低聚肽。本发明专利技术克服了谷朊粉在水中搅拌易粘附成团的缺点，有效打开了蛋白牢固的二硫键，获得的小麦低聚肽水解程度低且半胱氨酸含量高，能有效改善宠物犬猫的肠胃情况，减少宠物犬猫因为饲养地或日粮改变造成的非病理性拉稀、软便等问题。软便等问题。

【技术实现步骤摘要】
一种改善宠物犬猫排便功能的低聚肽制备方法


[0001]本专利技术涉及活性肽制备领域，具体地说，本专利技术涉及一种改善宠物犬猫排便功能的低聚肽制备方法。

技术介绍

[0002]小麦谷朊粉含有75％～85％的蛋白质，5％～7％左右淀粉。小麦蛋白主要由麦醇溶蛋白和麦谷蛋白组成，富含半胱氨酸，其中半胱氨酸含量大约占总氨基酸含量的2.0％～2.5％，高于常见的植物蛋白，而这些半胱氨酸的巯基以分子内和分子间二硫键形式存在，故造成其溶解性差和生物利用率低等问题。
[0003]随着蛋白质营养学研究的深入，研究者发现动物对蛋白质的吸收并非单纯以游离氨基酸形式吸收，还能以低聚肽形式吸收，后者还具有吸收速度快，不易饱和、可促进氨基酸吸收等优点，因此越来越多的蛋白质被水解成多肽来利用。用蛋白酶酶解小麦谷朊粉不仅可以增加其溶解性，还可以获得具有降血压、抗氧化和提高免疫力等多种生物活性的小麦肽，其中含半胱氨酸的多肽还具有广谱抗菌、鳌合金属离子等作用，还可以作为半胱氨酸缓释前体物质在体内发挥重要的生理作用：(1)直接脱去巯基和氨基，生成丙酮酸，参与糖代谢；(2)巯基氧化成亚磺基，然后脱去氨基和亚磺基，最后生成丙酮酸和亚硫酸，前者能参与糖代谢，后者经氧化后可变为硫酸；(3)巯基氧化成亚磺基后，经脱羧形成亚牛磺酸，亚牛磺酸是良好的抗氧化剂，可被氧化生成牛磺酸，牛磺酸是调节机体正常生理活动的活性物质，具有消炎、镇痛、维持机体渗透压平衡、维持正常视觉等功能，也是胆汁酸的组成成分，形成的胆汁酸盐有助于促进脂类的消化吸收；(4)半胱氨酸也是合成谷氨酸的原料，进而合成谷胱甘肽，能帮助犬猫保持正常的免疫系统功能，并具有抗氧化作用、解毒作用。
[0004]蛋白质的二硫键数目越多，蛋白质分子对抗外界因素影响的稳定性就愈大，蛋白酶很难接触到二硫键保护的酶解位点，表现为抗蛋白酶消化的能力比较强，故利用常规方法酶解小麦谷朊粉在较低的水解度下(≤8％)，低聚肽的半胱氨酸含量低(≤0.25％)，在较高的水解度下(≥15％)，可提高低聚肽中半胱氨酸含量(≥1％)，但因为过度水解会导致多肽活性损失和水解物中的游离氨基酸含量偏高(≥25％)。孙媛等(孙媛,孔祥珍,华欲飞.小麦面筋蛋白含半胱氨酸小麦肽的富集与表征[J].食品与发酵工业,2020,46(19):64
‑
69.)利用巯丙基树脂Sepharose 6B对含半胱氨酸小麦肽进行富集，巯基含量由原来的195μmol/g蛋白上升至994.95μmol/g蛋白，但是该方法工艺复杂、成本高，目前能直接在较低的水解度条件下获得半胱氨酸含量高的小麦低聚肽的工艺尚未见到报道。
[0005]便软拉稀是一种经常发生在宠物犬猫身上的症状，其不仅会影响宠物犬猫的正常生理活动，对宠物的健康状态也造成较大的损害，更严重影响了宠物与人类间的交往互动。造成宠物犬猫便软拉稀的原因可分为病理性与非病理性。病理性便软拉稀通常是因为宠物感染了某些致病菌，引起肠道的炎症或者肠道正常微生物种群变化，从而影响了肠道对粪便水分等营养物质的吸收，造成便软拉稀的情况；而非病理性便软拉稀70％～80％是由于宠物犬猫在换粮或生活环境突然改变造成的应激状态，影响其消化道状况或者肠道菌群等
微环境，对营养物质吸收能力变差，从而导致粪便水分等营养物质含量变高。目前，市面上存在许多针对宠物犬猫病理性便软拉稀的产品，但利用小麦低聚肽缓解或者改善宠物犬猫因应激造成的拉稀便软的研究尚未见到报道。

技术实现思路

[0006]为克服已有方法存在的缺陷，本专利技术的目的一方面是提供一种含高半胱氨酸及其氧化物的小麦低聚肽的制备方法，另一方面是提供其在宠物功能食品中的应用方法。
[0007]本专利技术提供一种改善宠物犬猫排便功能的低聚肽制备方法，按照如下步骤进行：
[0008](1)小麦谷朊粉预水解
[0009]将10份小麦谷朊粉加入125～200份水中，加入0.05～0.1份中性蛋白酶，维持pH为5.5～7.0，维持温度为50～60℃，酶解一段时间至水解度为3％～5％。
[0010]通过本设定，小麦谷朊粉经过蛋白酶预水解分子量变小，可以形成粘附性较低的悬浮液，可以克服小麦谷朊粉在水中搅拌易吸附粘结成团的缺点，有利于后续反应。
[0011](2)小麦谷朊粉的半胱氨酸氧化
[0012]将预水解的小麦谷朊粉pH调节为5.5～7.0，加入0.005～0.01份淀粉酶(糖化酶)，0.005～0.01份葡萄糖氧化酶，恒定温度40～50℃，泵入空气，施加发散式超声处理(超声功率密度10～50W/L，超声频率40～60kHz)并搅拌15～20min。
[0013]通过本设定，将小麦谷朊粉中的淀粉水解成葡萄糖，利用葡萄糖氧化酶催化葡萄糖和溶于酶解液的氧气反应生成葡萄糖酸
‑
δ
‑
内酯和H2O2，利用超声波的空化作用产生的瞬时高温辅助H2O2氧化半胱氨酸的游离巯基和二硫键，使得蛋白质局部紧密结构打开，有利于后续的蛋白酶解。
[0014](3)氧化处理的小麦谷朊粉的酶解
[0015]经预处理的小麦谷朊粉不补加蛋白酶或者补加0.02～0.05份中性蛋白酶，维持pH为5.5～7.0和温度为50～60℃，继续酶解一段时间至水解度为10％～12％，反应结束经煮沸15～20min灭酶，离心取上清，喷雾干燥制得小麦低聚肽。
[0016]上述的中性蛋白酶能耐受H2O2氧化，酶活损失小，故可以不补加中性蛋白酶继续反应。
[0017]2、将上述方法获得的小麦低聚肽在改善宠物犬猫的非病理性拉稀、便软等亚健康状况的宠物食品中应用。
[0018]本专利技术具体的优点：
[0019](1)本专利技术中小麦谷朊粉经蛋白酶预水解克服其在水中搅拌易粘附成团的缺点，对于后续的H2O2氧化半胱氨酸的二硫键打开蛋白质牢固的二硫键结构，在低水解度制备高半胱氨酸(及其衍生物)的小麦低聚肽是非常有利的。与传统工艺相比，本方法制备的产品半胱氨酸含量高(>1.1％)，低聚肽水解程度低(<12％)，游离氨基酸少(<10％)，没有过度酶解，苦味低适口性好，产品中含有的葡萄糖酸
‑
δ
‑
内酯还能起到稳定剂、酸味剂、保鲜剂和防腐剂的作用；
[0020](2)本专利技术制备的小麦低聚肽富含半胱氨酸除可供身体补充营养外，还可以进一步转化为牛磺酸参与身体代谢，具有消炎、镇痛、维持机体渗透压平衡、维持正常视觉功能、促进脂类的消化吸收等作用，另外还有比较高比例的谷氨酰胺(20％左右)，对胃肠黏膜上
皮成分己糖胺和葡萄糖胺的生化合成有促进作用，能够发挥其保护肠道粘膜、促进肠道吸收能力。
[0021](3)动物试验证明本专利技术制备的小麦低聚肽可以有效改善宠物犬猫的肠胃情况，减少宠物犬猫因为饲养地或日粮改变造成的非病理性拉稀、软便等问题，犬排便正常率从30％增加到90％以上，猫排便正常率从20％增加到70％以上，增强宠物犬猫对新环境、新粮的适应能力，为本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种改善宠物犬猫排便功能的低聚肽制备方法，其特征在于按照如下步骤进行：(1)小麦谷朊粉预水解将10份小麦谷朊粉加入125～200份水中，加入0.05～0.1份中性蛋白酶，维持pH为5.5～7.0，维持温度为50～60℃，酶解一段时间至水解度为3％～5％；(2)小麦谷朊粉的半胱氨酸氧化将预水解的小麦谷朊粉pH调节为5.5～7.0，加入0.005～0.01份淀粉酶(糖化酶)，0.005～0.01份葡萄糖氧化酶，恒定温度40～50℃，泵入空气，施加发散式超声处理并搅拌15～20min；(3)氧化处理的小麦谷朊粉的酶解经预处理的小麦谷朊粉不补加蛋白...

【专利技术属性】
技术研发人员：李云亮，马海乐，吕少俊，黄姗芬，阮思煜，杨雪，
申请(专利权)人：卫仕宠物营养科学研究院江苏有限公司，
类型：发明
国别省市：