红藻凝集素G在制备抑制汉坦病毒感染药物中的用途制造技术

本发明专利技术属于药物制备技术领域，涉及红藻凝集素G(Grifithsin，GRFT)在制备抑制汉坦病毒感染药物中的用途。本发明专利技术中的红藻凝集素G对rVSV

【技术实现步骤摘要】
红藻凝集素G在制备抑制汉坦病毒感染药物中的用途


[0001]本专利技术属于药物制备
，涉及红藻凝集素G在制备抑制汉坦病毒感染药物中的用途。

技术介绍

[0002]汉坦病毒(Hantaviruses,HTV)属于布尼亚病毒科，为单股负链RNA病毒，基因组分三个节段。目前发现汉坦病毒有二十余种血清/基因型，主要包括汉滩病毒(Hantaan virus,HTNV)、汉城病毒(Seoul Virus，SEOV)、普马拉病毒(PuumahVirus,PUUV)、多布拉伐
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贝尔格莱德病毒(Dobrava
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Belgrade virus，DOBV)、辛诺柏病毒(Sin Nombre Virus,SNV)、安第斯病毒(Andes virus，ANDV)等病毒。
[0003]汉滩病毒(Hantaan virus，HTNV)属于布尼亚病毒目(Bunyavirales)汉坦病毒科(Hantaviridae)，有包膜的负链RNA病毒，其基因组包含三节段S、 M、L，分别编码核衣壳蛋白NP，包膜糖蛋白GPC以及RNA依赖的RNA聚合酶RdRp。
[0004]HTNV主要引起肾综合征出血热(hemorrhagic fever with renal syndrome， HFRS)。HFRS在世界各地均有流行。
[0005]目前，利巴韦林在病毒感染早期可以有效治疗HFRS，但也存在一定的副作用，例如溶血性贫血，以及不能用于孕妇治疗等。因此，目前仍迫切需要开发新型抗病毒药物。
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技术实现思路

[0006]本专利技术所要解决的技术问题在于针对现有技术的不足，提供了红藻凝集素 G(Grifithsin，GRFT)在制备抑制汉坦病毒感染药物中的用途，所述红藻凝集素G对rVSV
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HTNV M(I532K/S1094L/
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C6)
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GFP(以下简写为rVSV
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HTNV
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GFP) 和HTNV病毒以及汉坦病毒假病毒存在抑制作用，红藻凝集素G可以结合病毒表面糖基化位点从而抑制病毒入胞。
[0007]本专利技术提供了红藻凝集素G在制备汉坦病毒感染药物中的用途。
[0008]进一步地，所述的红藻凝集素G能够用于制备抑制rVSV
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HTNV
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GFP的药物。
[0009]进一步地，所述的红藻凝集素G能够用于制备抑制HTNV病毒的药物。
[0010]进一步地，所述汉坦病毒包括汉滩病毒、汉城病毒、普玛拉病毒、多布拉伐
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贝尔格莱德病毒、安第斯病毒、辛诺柏病毒。
[0011]进一步地，所述的红藻凝集素G能够结合病毒表面糖基化位点从而抑制病毒进入细胞。
[0012]进一步地，所述细胞为Vero E6细胞或A549细胞。
[0013]本专利技术还提供了上述红藻凝集素G为原料制备得到的抑制汉坦病毒感染药物制剂。
[0014]进一步地，包括所述红藻凝集素G，以及药学上可接受的辅料或载体。
[0015]所述药物制剂为片剂、颗粒剂、胶囊剂、喷雾剂，口服液或注射剂。
[0016]与现有技术相比，本专利技术的有益效果在于：
[0017]1、本专利技术提供了红藻凝集素G在制备抑制汉坦病毒感染药物中的用途，所述红藻凝集素G对rVSV
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HTNV
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GFP和HTNV病毒以及汉坦病毒假病毒存在抑制作用，红藻凝集素G可以结合病毒表面糖基化位点从而抑制病毒入胞。
[0018]2、本专利技术首次发现了一种新型抗病毒药物红藻凝集素G，通过免疫荧光技术在体外鉴定其对HTNV病毒以及汉坦病毒假病毒存在抑制作用，通过添加 D
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mannose证明红藻凝集素G是通过结合在病毒的糖基化位点从而抑制病毒入胞，且本专利技术所使用的红藻凝集素G浓度均已验证对细胞无毒。本专利技术提供了一种高效低毒的新型抗病毒药物，为HFRS防治提供新的思路。
附图说明
[0019]为了更清楚地说明本专利技术实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本专利技术的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。
[0020]图1为本专利技术中红藻凝集素G在Vero E6细胞上抑制rVSV
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HTNV
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GFP进入的IC50；
[0021]图2为本专利技术中红藻凝集素G在A549细胞上抑制rVSV
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HTNV
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GFP进入的IC50；
[0022]图3为本专利技术中红藻凝集素G的细胞毒性分析结果；
[0023]其中，图A为红藻凝集素G对Vero E6的细胞毒性分析结果；
[0024]图B为红藻凝集素G对A549的细胞毒性分析结果；
[0025]图4为本专利技术中红藻凝集素G在Vero E6细胞上抑制HTNV感染的IC50；
[0026]图5为本专利技术中红藻凝集素G在A549细胞上抑制HTNV感染的IC50；
[0027]图6为本专利技术中甘露糖对红藻凝集素G介导的rVSV
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HTNV
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GFP感染抑制的影响；
[0028]图7为本专利技术中红藻凝集素G对汉坦病毒假病毒的抑制效果。
具体实施方式
[0029]下面结合附图和具体实施例对本专利技术进行详细说明，但不应理解为本专利技术的限制。如未特殊说明，下述实施例中所用的技术手段为本领域技术人员所熟知的常规手段，下述实施例中所用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。
[0030]实施例1
[0031]本实施例提供红藻凝集素G在制备抑制汉滩病毒感染药物中的用途，红藻凝集素G是从海洋红藻中提取出来的凝集素(红藻凝集素G由复旦大学惠赠)。
[0032]通过测定红藻凝集素G对细胞的毒性，选定对细胞无毒的合适浓度。在此基础上，测定红藻凝集素G对rVSV
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HTNV
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GFP(由本实验室制备，具体构建方法见公开号为CN113842454A的专利申请中，该专利申请中记载为rVSV
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HTNVM(I532K/S1094L/
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C6)
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GFP)存在抑制作用。然后利用免疫荧光技术，测定红藻凝集素G对HTNV病毒的抑制效果。在此基础上，通过D
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mannose(D
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甘露糖)与rVSV
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HTNV
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GFP共孵育后感染细胞，证明红藻凝集素G可以结合病毒表面糖基化位点从而抑制病毒入胞。
[0033]一、红藻凝集素G药物毒性实验
[0034]1、第一天：在96孔板中接种100μL细胞悬液(A549细胞和Ve本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.红藻凝集素G在制备抑制汉坦病毒感染药物中的用途。2.根据权利要求1所述的红藻凝集素G在制备抑制汉坦病毒感染药物中的用途，其特征在于，所述的红藻凝集素G能够用于制备抑制rVSV
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HTNV
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GFP的药物。3.根据权利要求2所述的红藻凝集素G在制备抑制汉坦病毒感染药物中的用途，其特征在于，所述的红藻凝集素G能够用于制备抑制汉坦病毒的药物。4.根据权利要求3所述的红藻凝集素G在制备抑制汉坦病毒感染药物中的用途，其特征在于，所述汉坦病毒包括汉滩病毒、汉城病毒、普玛拉病毒、多布拉伐
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贝尔格莱德病毒、安第斯病毒...

【专利技术属性】
技术研发人员：叶伟，张芳琳，赵宁博，张惠，刘赫，程林峰，张亮，雷迎峰，徐志凯，
申请(专利权)人：中国人民解放军空军军医大学，
类型：发明
国别省市：