抗TIGIT抗体及其用途制造技术

本申请涉及一种抗TIGIT抗体及其用途，所述抗TIGIT抗体以约5E

【技术实现步骤摘要】
抗TIGIT抗体及其用途


[0001]本申请涉及生物医药领域，具体的涉及一种抗TIGIT抗体及其用途。

技术介绍

[0002]免疫检查点T细胞免疫球蛋白和免疫受体酪氨酸抑制性基序结构域(TIGIT，又名Vstm3，WUCAM)发现于2009年，是I型跨膜蛋白。TIGIT的配体有两种，CD155(也称为脊髓灰质炎病毒受体或PVR)和CD112(也称为脊髓灰质炎病毒受体相关配体2、PVRL2、粘连蛋白
‑
2)，TIGIT与CD155的结合亲和力远高于CD112。
[0003]TIGIT与激活性受体CD226竞争性结合配体CD155，传递抑制信号，抑制细胞过度活化并抑制促炎性细胞因子分泌(Manieri,Trends Immunol,2017,38(1):20
‑
8)。TIGIT主要在调节性T细胞(Treg)、活化的T细胞和自然杀伤细胞(NK)等细胞上表达(YU,Nat Immunol,2009,10(1):48
‑
57)，可以直接抑制T细胞和NK细胞的增殖、杀伤、脱颗粒及细胞因子分泌，也可以通过促进DC细胞分泌IL
‑
10抑制T细胞活性(Nicholas,Trends Immunol.2017,38(1):20
‑
28)。此外，表达在Treg上的TIGIT可以维持Treg的免疫抑制功能(Manieri,Trends Immunol,2017,38(1):20
‑
8)。TIGIT在多种肿瘤细胞、浸润淋巴细胞和外周血单核细胞中显著上调，其配体CD155和CD112也在多种肿瘤细胞广泛表达，提示TIGIT在肿瘤免疫逃逸过程中可能起着关键作用(Tassi,Cancer Res.2017,77:851
‑
861.Kong,Clin Cancer Res,2016,22:3057
‑
66.Casado,Cancer Immunol Immunother,2009,58(9):1517
‑
26.)。
[0004]目前，已知的抗TIGIT抗体还存在选择性不强等缺陷。因此，有必要开发对TIGIT蛋白亲和力高、特异性强的新型抗TIGIT抗体。

技术实现思路

[0005]本申请提供了一种分离的抗原结合蛋白，其具有下列性质中的一种或多种：1)在Biacore测定中，以约5E
‑
09M或以下的KD值与人TIGIT蛋白特异性结合；2)在流式检测中，以约0.5μg/ml或以下的EC50值与表达于CHOK1细胞上的人TIGIT特异性结合；3)阻断CD155与TIGIT结合；以及4)激活CD226
‑
NFAT信号通路。
[0006]在某些实施方式中，所述的分离的抗原结合蛋白包含HCDR3，所述HCDR3包含SEQ ID NO:3所示的氨基酸序列。
[0007]在某些实施方式中，所述的分离的抗原结合蛋白包含HCDR2，所述HCDR2包含SEQ ID NO：2所示的氨基酸序列。
[0008]在某些实施方式中，所述的分离的抗原结合蛋白包含HCDR1，所述HCDR1包含SEQ ID NO：1所示的氨基酸序列。
[0009]在某些实施方式中，所述的分离的抗原结合蛋白包含重链可变区VH，所述VH包含所述HCDR1、HCDR2和HCDR3，所述HCDR3包含SEQ ID NO：3所示的氨基酸序列；所述HCDR2包含SEQ ID NO：2所示的氨基酸序列；以及所述HCDR1包含SEQ ID NO：1所示的氨基酸序列。
[0010]在某些实施方式中，所述的分离的抗原结合蛋白包含H
‑
FR1，所述H
‑
FR1的C末端与
ID NO:22；
[0044]e)L
‑
FR1：SEQ ID NO:19，L
‑
FR2：SEQ ID NO:26，L
‑
FR3：SEQ ID NO:25和L
‑
FR4：SEQ ID NO:27。
[0045]在某些实施方式中，所述的分离的抗原结合蛋白包含轻链可变区VL，所述VL包含SEQ ID NO：79所示的氨基酸序列。
[0046]在某些实施方式中，所述的分离的抗原结合蛋白中所述VL包含SEQ ID NO:30、SEQ ID NO:31、SEQ ID NO:32、SEQ ID NO:33和SEQ ID NO:34中任一项所示的氨基酸序列。
[0047]在某些实施方式中，所述的分离的抗原结合蛋白包含重链恒定区，且所述重链恒定区包括源自IgG的恒定区或源自IgY的恒定区。
[0048]在某些实施方式中，所述的分离的抗体结合蛋白中所述重链恒定区包含源自选自下组蛋白的恒定区：IgG1、IgG2、IgG3和IgG4。
[0049]在某些实施方式中，所述的分离的抗原结合蛋白中所述重链恒定区包含SEQ ID NO:55、SEQ ID NO:56、SEQ ID NO:57和SEQ ID NO:58中任一项所示的氨基酸序列。
[0050]在某些实施方式中，所述的分离的抗原结合蛋白包含轻链恒定区，且所述轻链恒定区包括源自Igκ的恒定区或源自Igλ的恒定区。
[0051]在某些实施方式中，所述的分离的抗原结合蛋白中所述轻链恒定区包括源自人Igκ的恒定区。
[0052]在某些实施方式中，所述的分离的抗原结合蛋白中所述轻链恒定区包含SEQ ID NO：80所示的氨基酸序列。
[0053]在某些实施方式中，所述的分离的抗原结合蛋白包含重链HC，所述HC包含SEQ ID NO:81和SEQ ID NO:82中任一项所示的氨基酸序列。
[0054]在某些实施方式中，所述的分离的抗原结合蛋白包含轻链LC，所述LC包含SEQ ID NO:83、SEQ ID NO:84、SEQ ID NO:85、SEQ ID NO:86和SEQ ID NO:87中任一项所示的氨基酸序列。
[0055]在某些实施方式中，所述的分离的抗原结合蛋白中所述HC和LC包含选自下述任意一组的氨基酸序列：
[0056]a)HC：SEQ ID NO：81和LC：SEQ ID NO：83；
[0057]b)HC：SEQ ID NO：82和LC：SEQ ID NO：84；
[0058]c)HC：SEQ ID NO：82和LC：SEQ ID NO：85；
[0059]d)HC：SEQ ID NO：82和LC：SEQ ID NO：86；
[0060]e)HC：SEQ ID NO：82和LC：SEQ ID NO：87。
[0061]在某些实施方式中，所述的分离的抗原结合蛋白包括抗体或其抗原结合片段。
[0062]在某些实施方式中，所述抗原结合片段选自下组：Fab，Fab
’
，F(ab)2，Fv片段，F(ab
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.分离的抗原结合蛋白，其具有下述性质中的一种或多种：a)在Biacore测定中，以约5E
‑
09M或以下的K
D
值与人TIGIT蛋白特异性结合；b)在流式检测中，以约0.5μg/ml或以下的EC50值与表达于CHOK1细胞上的人TIGIT特异性结合；c)阻断CD155与TIGIT结合；以及d)激活CD226
‑
NFAT信号通路。2.根据权利要求1所述的分离的抗原结合蛋白，其包含HCDR3，所述HCDR3包含SEQ ID NO:3所示的氨基酸序列。3.根据权利要求1
‑
2中任一项所述的分离的抗原结合蛋白，其包含HCDR2，所述HCDR2包含SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列。4.根据权利要求1
‑
3中任一项所述的分离的抗原结合蛋白，其包含HCDR1，所述HCDR1包含SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列。5.根据权利要求1
‑
4中任一项所述的分离的抗原结合蛋白，其包含重链可变区VH，所述VH包含所述HCDR1、HCDR2和HCDR3，所述HCDR3包含SEQ ID NO:3所示的氨基酸序列；所述HCDR2包含SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列；以及所述HCDR1包含SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列。6.根据权利要求1
‑
5中任一项所述的分离的抗原结合蛋白，其包含H
‑
FR1，所述H
‑
FR1的C末端与所述HCDR1的N末端直接或间接地相连，且所述H
‑
FR1包含SEQ ID NO:70所示的氨基酸序列。7.根据权利要求6所述的分离的抗原结合蛋白，其中所述H
‑
FR1包含SEQ ID NO:7和SEQ ID NO:15中任一项所示的氨基酸序列。8.根据权利要求1
‑
7中任一项所述的分离的抗原结合蛋白，其包含H
‑
FR2，所述H
‑
FR2位于所述HCDR1与所述HCDR2之间，且所述H
‑
FR2包含SEQ ID NO:71所示的氨基酸序列。9.根据权利要求8所述的分离的抗原结合蛋白，其中所述H
‑
FR2包含SEQ ID NO:8和SEQ ID NO:16中任一项所示的氨基酸序列。10.根据权利要求1
‑
9中任一项所述的分离的抗原结合蛋白，其包含H
‑
FR3，所述H
‑
FR3位于所述HCDR2与所述HCDR3之间，且所述H
‑
FR3包含SEQ ID NO:72所示的氨基酸序列。11.根据权利要求10所述的分离的抗原结合蛋白，其中所述H
‑
FR3包含SEQ ID NO:9和SEQ ID NO:17中任一项所示的氨基酸序列。12.根据权利要求1
‑
11中任一项所述的分离的抗原结合蛋白，其包含H
‑
FR4，所述H
‑
FR4的N末端与所述HCDR3的C末端直接或间接地相连，且所述H
‑
FR4包含SEQ ID NO:73所示的氨基酸序列。13.根据权利要求12所述的分离的抗原结合蛋白，其中所述H
‑
FR4包含SEQ ID NO:10和SEQ ID NO:18中任一项所示的氨基酸序列。14.根据权利要求1
‑
13中任一项所述的分离的抗原结合蛋白，其包含H
‑
FR1，H
‑
FR2，H
‑
FR3和H
‑
FR4，所述H
‑
FR1包含SEQ ID NO:70所示的氨基酸序列；所述H
‑
FR2包含SEQ ID NO:71所示的氨基酸序列；所述H
‑
FR3包含SEQ ID NO:72所示的氨基酸序列；以及所述H
‑
FR4包含SEQ ID NO:73所示的氨基酸序列。15.根据权利要求1
‑
14中任一项所述的分离的抗原结合蛋白，其包含H
‑
FR1，H
‑
FR2，H
‑
FR3和H
‑
FR4，所述H
‑
FR1包含SEQ ID NO:7和SEQ ID NO:15中任一项所示的氨基酸序列；所述H
‑
FR2包含SEQ ID NO:8和SEQ ID NO:16中任一项所示的氨基酸序列；所述H
‑
FR3包含SEQ ID NO:9和SEQ ID NO:17中任一项所示的氨基酸序列；以及所述H
‑
FR4包含SEQ ID NO:10和SEQ ID NO:18中任一项所示的氨基酸序列。16.根据权利要求15所述的分离的抗原结合蛋白，其中所述H
‑
FR1、H
‑
FR2、H
‑
FR3和H
‑
FR4包含选自下述任意一组的氨基酸序列：a)H
‑
FR1：SEQ ID NO:7，H
‑
FR2：SEQ ID NO:8，H
‑
FR3：SEQ ID NO:9和H
‑
FR4：SEQ ID NO:10；b)H
‑
FR1：SEQ ID NO:15，H
‑
FR2：SEQ ID NO:16，H
‑
FR3：SEQ ID NO:17和H
‑
FR4：SEQ ID NO:18。17.根据权利要求1
‑
16中任一项所述的分离的抗原结合蛋白，其包含重链可变区VH，所述VH包含SEQ ID NO:78所示的氨基酸序列。18.根据权利要求17所述的分离的抗原结合蛋白，其中所述VH包含SEQ ID NO:28和SEQ ID NO:29中任一项所示的氨基酸序列。19.根据权利要求1
‑
18中任一项所述的分离的抗原结合蛋白，其包含LCDR3，所述LCDR3包含SEQ ID NO:6所示的氨基酸序列。20.根据权利要求1
‑
19中任一项所述的分离的抗原结合蛋白，其包含LCDR2，所述LCDR2包含SEQ ID NO:5所示的氨基酸序列。21.根据权利要求1
‑
20中任一项所述的分离的抗原结合蛋白，其包含LCDR1，所述LCDR1包含SEQ ID NO:4所示的氨基酸序列。22.根据权利要求1
‑
21中任一项所述的分离的抗原结合蛋白，其包含轻链可变区VL，所述VL包含所述LCDR1、LCDR2和LCDR3，所述LCDR3包含SEQ ID NO:6所示的氨基酸序列；所述LCDR2包含SEQ ID NO:5所示的氨基酸序列；以及所述LCDR1包含SEQ ID NO:4所示的氨基酸序列。23.根据权利要求1
‑
22中任一项所述的分离的抗原结合蛋白，其包含L
‑
FR1，所述L
‑
FR1的C末端与所述LCDR1的N末端直接或间接地相连，且所述L
‑
FR1包含SEQ ID NO:74所示的氨基酸序列。24.根据权利要求23所述的分离的抗原结合蛋白，其中所述L
‑
FR1包含SEQ ID NO:11和SEQ ID NO:19中任一项所示的氨基酸序列。25.根据权利要求1
‑
24中任一项所述的分离的抗原结合蛋白，其包含L
‑
FR2，所述L
‑
FR2位于所述LCDR1与所述LCDR2之间，且所述L
‑
FR2包含SEQ ID NO:75所示的氨基酸序列。26.根据权利要求25所述的分离的抗原结合蛋白，其中所述L
‑
FR2包含SEQ ID NO:12、SEQ ID NO:20、SEQ ID NO:23、SEQ ID NO:24和SEQ ID NO:26中任一项所示的氨基酸序列。27.根据权利要求1
‑
26中任一项所述的分离的抗原结合蛋白，其包含L
‑
FR3，所述L
‑
FR3位于所述LCDR2与所述LCDR3之间，且所述L
‑
FR3包含SEQ ID NO:76所示的氨基酸序列。28.根据权利要求27所述的分离的抗原结合蛋白，其中所述L
‑
FR3包含SEQ ID NO:13、SEQ ID NO:21和SEQ ID NO:25中任一项所示的氨基酸序列。29.根据权利要求1
‑
28中任一项所述的分离的抗原结合蛋白，其包含L
‑
FR4，所述L
‑
FR4的N末端与所述LCDR3的C末端直接或间接地相连，且所述L
‑
FR4包含SEQ ID NO:77所示的氨
基酸序列。30.根据权利要求29所述的分离的抗原结合蛋白，其中所述L
‑
FR4包含SEQ ID NO:14、SEQ ID NO:22和SEQ ID NO:27中任一项所示的氨基酸序列。31.根据权利要求1
‑
30中任一项所述的分离的抗原结合蛋白，其包含L
‑
FR1，L
‑
FR2，L
‑
FR3和L
‑
FR4，所述L
‑
FR1包含SEQ ID NO:74所示的氨基酸序列；所述L
‑
FR2包含SEQ ID NO:75所示的氨基酸序列；所述L
‑
FR3包含SEQ ID NO:76所示的氨基酸序列；以及所述L
‑
FR4包含SEQ ID NO:77所示的氨基酸序列。32.根据权利要求1
‑
31中任一项所述的分离的抗原结合蛋白，其包含L
‑
FR1，L
‑
FR2，L
‑
FR3和L
‑
FR4，所述L
‑
FR1包含SEQ ID NO:11和SEQ ID NO:19中任一项所示的氨基酸序列；所述L
‑
FR2包含SEQ ID NO:12、SEQ ID NO:20、SEQ ID NO:23、SEQ ID NO:24和SEQ ID NO:26中任一项所示的氨基酸序列；所述L
‑
FR3包含SEQ ID NO:13、SEQ ID NO:21和SEQ ID NO:25中任一项所示的氨基酸序列；以及所述L
‑
FR4包含SEQ ID NO:14、SEQ ID NO:22和SEQ ID NO:27中任一项所示的氨基酸序列。33.根据权利要求32所述的分离的抗原结合蛋白，其中所述L
‑
FR1、L
‑
FR2、L
‑
FR3和L
‑
FR4包含选自下述任意一组的氨基酸序列：a)L
‑
FR1：SEQ ID NO:11，L
‑
FR2：SEQ ID NO:12，L
‑
FR3：SEQ ID NO:13和L
‑
FR4：SEQ ID NO:14；b)L
‑
FR1：SEQ ID NO:19，L
‑
FR2：SEQ ID NO:20，L
‑
FR3：SEQ ID NO:21和L
‑
FR4：SEQ ID NO:22；c)L
‑
FR1：SEQ ID NO:19，L
‑
FR2：SEQ ID NO:23，L
‑
FR3：SEQ ID NO:21和L
‑
FR4：SEQ ID NO:22；d)L
‑
FR1：SEQ ID NO:19，L
‑
FR2：SEQ ID NO:24，L
‑
FR3：SEQ ID NO:25和L
‑
FR4：SEQ ID NO:22；e)L
‑
FR1：SEQ ID NO:19，L
‑
FR2：SEQ ID NO:26，L
‑
FR3：SEQ ID NO:25和L
‑
FR4：SEQ ID NO:27。34.根据权利要求1
‑
33中任一项所述的分离的抗原结合蛋白，其包含轻链可变区VL，所述VL包含SEQ ID NO:79所示的氨基酸序列。35.根据权利要求34所述的分离的抗原结合蛋白，其中所述VL包含SEQ ID NO:30、SEQ ID NO:31、SEQ ID NO:32、SEQ ID NO:33和SEQ ID NO:34中任一项所示的氨基酸序列。36.根据权利要求1
‑
35中任一项所述的分离的抗原结合蛋白，其包含重链恒定区，且所述重链恒定区包括源自IgG的恒定区或源自IgY的恒定区。37.根据权利要求36所述的分离的抗体结合蛋白，其中所述重链恒定区包含源自选自下组蛋白的恒定区：IgG1、IgG2、IgG3和IgG4。38.根据权利要求36
‑
37中任一项所述的分离的抗原结合蛋白，其中所述重链恒定区包含SEQ ID NO:55、SEQ ID NO:56、SEQ ID NO:57和S...

【专利技术属性】
技术研发人员：廖雪梅，刘阳，曹媛媛，陈娜，李贵祥，王瓅，施伟军，栾珊珊，夏广新，柯樱，
申请(专利权)人：上海医药集团股份有限公司，
类型：发明
国别省市：