一种多粘芽孢杆菌及其微生物固体菌剂的制备方法与应用技术

本发明专利技术公开了一种多粘芽孢杆菌及其微生物固体菌剂的制备方法与应用，该多粘芽孢杆菌YN

【技术实现步骤摘要】
一种多粘芽孢杆菌及其微生物固体菌剂的制备方法与应用


[0001]本专利技术涉及生物防治
，具体来说，涉及一种多粘芽孢杆菌及其微生物固体菌剂的制备方法与应用。

技术介绍

[0002]人参在东北地区，尤其是以吉林为代表的主产区，作为道地药材常占据着药材交易的主流地位。然而，人参的产量和品质受病害流行和生长季节气候的影响较大。近几十年来，药用植物特别是人参的种植中，土传病原真菌引起的疾病问题日益严重并已经影响人参的产量和质量，造成了难以估量的经济损失。影响人参的土壤传播疾病主要包括锈腐病、灰霉病和根腐病等。其中毁灭柱抱菌是引起人参锈腐病的病原菌。它是一种毒性病原体，可以感染许多植物物种，导致严重减产，并通过受污染的植物残基、种子和土壤传播。毁灭柱孢菌还会产生对人类和动物有害的真菌毒素。因此，研究控制该病原菌的方法至关重要。
[0003]在食品、医药和园艺作物中过度使用化学农药会导致土壤中有害的化学残留物并成为环境污染源。因此，识别和开发适用于可持续生产系统的环保替代疾病控制方法一直是相当多研究的重点。由于其有效性、对动物和人类的相对安全性以及适用于生态农业方法，生物控制是管理土壤传播疾病最具前景的替代策略之一。在这方面，细菌属芽孢杆菌已被证明是一种有效的生物防治剂，因为它能够轻松定植植物，生长迅速，并表现出高度的抗病性。由于上述因素，芽孢杆菌种类一直是生物防治研究的重点。近年来，以芽孢杆菌为主的微生物菌剂因其环境友好、促进植物生长且抗病能力强等特点已成为当前国内外防治植物土传病害的研究热点，具有较为广阔的应用前景。
[0004]经过查阅文献梳理发现，现有微生物菌剂的制备工艺存在一定的缺陷，具体如下：
[0005]专利号CN113816801A中涉及到的一种抑制土传病害土壤改良剂的制备方法，该方法将有机基质进行粉碎处理，得到粉碎基质后，将所述粉碎基质按照比例混合，得到混合基质；将所述混合基质与助剂混合，并调节含水率为50～70％，得到发酵底物；在所述发酵底物内接种由解淀粉芽孢杆菌、多粘芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌、哈茨木霉和淡紫拟青霉混合而成的复合微生物固体菌剂，在室温条件下发酵腐熟,得到腐熟物料，将所述腐熟物料与营养元素混合均匀，得到抑制抑制土传病害土壤改良菌剂。但是该方法存在成本较大且操作复杂的缺点。
[0006]专利号CN113439759A中涉及到一种络铜柠铜多粘芽孢杆菌根部杀菌组合物及其制备方法，该方法向封闭式反应釜中加入氨水，在搅拌下依次加入络氨铜、柠檬酸、硫酸铜、水杨和EDTA，待液体清澈透明且温度降低至25℃以下后，继续向封闭式反应釜中加入多粘芽孢杆菌，再搅拌30分钟后得到杀菌组合物成品。但是该方法存在费时费工、工作环境危险的缺点。
[0007]专利号CN111302860A中涉及到一种预防柑橘溃疡病的特种肥的制备方法，该方法将一水硫酸镁、五水硼砂、解淀粉芽孢杆菌菌粉、LTPP03菌粉等在搅拌机中混匀后得混合物；又将硫酸铵、氮钾肥等辅料在搅拌机中搅拌，期间向其中加入腐植酸原粉、混合物和加
入水溶性防结粉，混匀后得到半成品，将半成品包装后得到特种肥。但是该方法存在抑菌种类少且环境易污染的缺点。
[0008]专利号CN110540461A中涉及到一种防治草莓炭疽病的复合有益微生物菌发酵液的制备方法，该方法将解淀粉芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、固氮芽孢杆菌、多粘芽孢杆菌进行三级培养发酵后按1:1:1:1的比例等体积混合制成复合成有益微生物菌发酵液，又将复合有益微生物菌发酵液和糖蜜搅拌混匀，向其中加入腐植酸，直至其完全溶解，然后依次加入磷酸二氢钾、磷酸氢二钾、聚磷酸铵等辅料直至全部物料完全溶解即得到液体肥。但是该方法存在加工成本高、活菌衰减快的缺点。
[0009]针对相关技术中的问题，目前尚未提出有效的解决方案。

技术实现思路

[0010]针对相关技术中的问题，本专利技术提出一种多粘芽孢杆菌及其微生物固体菌剂的制备方法与应用，以克服现有相关技术所存在的上述技术问题。
[0011]本专利技术的构思如下：从连续种植4年的健康人参根际土壤中，分离筛选并纯化对多种人参致病真菌具有拮抗活性的多粘芽孢杆菌YN
‑
59(L)，经发酵培养、喷雾干燥制成微生物固体菌剂，具备防治人参病害和促进人参根系生长的作用。
[0012]具体的，本专利技术采用的具体技术方案如下：
[0013]根据本专利技术的一个方面，提供了一种多粘芽孢杆菌YN
‑
59(L)，该多粘芽孢杆菌为从健康的人参根际土壤中分离、纯化、筛选出的一株有效拮抗人参病原真菌的生防细菌，具体的，本专利技术首先挖取重茬老参地中依旧茁壮生长的健康人参10株，将其根际土壤抖落后统一收集，然后分离筛选并纯化共145株，最后通过平行对峙实验及牛津杯实验法筛选有效拮抗人参病原真菌的生防细菌。
[0014]进一步的，所述多粘芽孢杆菌YN
‑
59(L)属于芽孢杆菌属(Bacillus Cohn)，所述生防细菌为多粘芽孢杆菌Bacilluspolymyxae。
[0015]根据本专利技术的另一个方面，提供了一种多粘芽孢杆菌YN
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59(L)在拮抗人参病原真菌中的应用，所述病原真菌为人参尖孢镰刀菌、毁灭柱孢菌、腐皮镰孢菌，且所述多粘芽孢杆菌YN
‑
59(L)对该病原真菌的抑菌率大于等于89％。
[0016]作为可选的，所述病原真菌为人参立枯丝核菌、灰葡萄孢菌、链格孢菌、恶疫霉菌，且所述多粘芽孢杆菌YN
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59(L)对该病原真菌的抑菌率大于等于78％。
[0017]作为可选的，所述病原真菌为核盘菌和强壮土赤壳，且所述多粘芽孢杆菌YN
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59(L)对该病原真菌的抑菌率大于等于72％。
[0018]作为可选的，所述多粘芽孢杆菌YN
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59(L)在含100mg/L色氨酸的King培养液中分泌吲哚乙酸的浓度为32.28mg/L。
[0019]根据本专利技术的又一个方面，提供了一种多粘芽孢杆菌YN
‑
59(L)制备的微生物固体菌剂，所述微生物固体菌剂包括以下重量百分比的原料：
[0020]多粘芽孢杆菌YN
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59(L)微生物菌液80～90％和蛭石10～20％。
[0021]根据本专利技术的再一个方面，提供了一种多粘芽孢杆菌YN
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59(L)制备的微生物固体菌剂的制备方法，该微生物固体菌剂采用三级制种加喷雾干燥技术制备得到，包括以下步骤：
[0022]S1、将多粘芽孢杆菌YN
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59(L)接种于种子培养基中，振荡培养制成一级母种菌液；
[0023]S2、将一级母种菌液按照预设质量分数的接种量接种于发酵培养基中，得到二级发酵菌液；
[0024]S3、将二级发酵菌液按照预设质量分数的接种量接种于三级培养基进行扩繁培养，得到三级微生物液体菌剂；
[0025]S4、将三级微生物液体菌剂与吸本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种多粘芽孢杆菌YN
‑
59(L)，其特征在于，该多粘芽孢杆菌为从健康的人参根际土壤中分离、纯化、筛选出的一株有效拮抗人参病原真菌的生防细菌。2.根据权利要求1所述的一种多粘芽孢杆菌YN
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59(L)，其特征在于，所述生防细菌为多粘芽孢杆菌Bacilluspolymyxae。3.一种多粘芽孢杆菌YN
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59(L)在拮抗人参病原真菌中的应用，其特征在于，所述多粘芽孢杆菌YN
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59(L)为权利要求1或2所述的多粘芽孢杆菌YN
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59(L)，所述病原真菌为人参尖孢镰刀菌、毁灭柱孢菌、腐皮镰孢菌，且所述多粘芽孢杆菌YN
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59(L)对该病原真菌的抑菌率大于等于89％。4.一种多粘芽孢杆菌YN
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59(L)在拮抗人参病原真菌中的应用，其特征在于，所述多粘芽孢杆菌YN
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59(L)为权利要求1或2所述的多粘芽孢杆菌YN
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59(L)，所述病原真菌为人参立枯丝核菌、灰葡萄孢菌、链格孢菌、恶疫霉菌，且所述多粘芽孢杆菌YN
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59(L)对该病原真菌的抑菌率大于等于78％。5.一种多粘芽孢杆菌YN
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59(L)在拮抗人参病原真菌中的应用，其特征在于，所述多粘芽孢杆菌YN
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59(L)为权利要求1或2所述的多粘芽孢杆菌YN
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59(L)，所述病原真菌为核盘菌和强壮土赤壳，且所述多粘芽孢杆菌YN
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59(L)对该病原真菌的抑菌率大于等于72％。6.一种多粘芽孢杆菌YN
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59(L)在拮抗人参病原真菌中的应用，其特征在于，所述多粘芽孢杆菌YN
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59(L)为权利要求1或2所述的多粘芽孢杆菌YN
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59(L)，且所述多粘芽孢杆菌YN
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59(L)在含100mg/L色氨酸的King培养液中分泌吲哚乙酸的浓度为32.28mg/L。7.一种多粘芽孢杆菌YN
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59(L)制备的微生物固体菌剂，其特征在于，该微生物固体菌剂以权利要求1或2所述的多粘芽孢杆菌YN
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59(L)为活性成分，且所述微生物固体菌剂包括以下重量百分比的原料：多粘芽孢杆菌YN
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59(L)微生物菌液80～90％和蛭石10～20％。8.一种多粘芽孢杆菌YN
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59(L)制备的微生物固体菌剂的制备方法，用于权利要求7所述的多粘芽孢杆菌YN
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59(L)...

【专利技术属性】
技术研发人员：李琼，闫宁，战宇，苗馨月，陈长宝，
申请(专利权)人：长春中医药大学，
类型：发明
国别省市：