一种快速提取血浆中外泌体的方法和提取试剂技术

本发明专利技术公开一种快速提取血浆中外泌体的方法，本提取方法包括以下步骤：S1、滴加试剂、S2、初步离心沉淀、S3、二次离心沉淀和S4、外泌体重悬，其中：S1、滴加试剂：在血浆样本加入提取试剂，震荡混匀后，在温度为2

【技术实现步骤摘要】
一种快速提取血浆中外泌体的方法和提取试剂


[0001]本专利技术涉及生物分离提取
，具体为一种快速提取血浆中外泌体的方法和提取试剂。

技术介绍

[0002]外泌体指包含了复杂RNA和蛋白质的小膜泡(30
‑
150nm)，多种细胞在正常及病理状态下均可分泌外泌体，其主要来源于细胞内溶酶体微粒内陷形成的多囊泡体，经多囊泡体外膜与细胞膜融合后释放到胞外基质中，外泌体天然存在于体液中，包括血液、唾液、尿液、脑脊液和乳汁中，外泌体被视为特异性分泌的膜泡，参与细胞间通讯，对外泌体的研究兴趣日益增长，无论是研究其功能还是了解如何将其用于微创诊断的开发，血浆中外泌体可直接用于下游外泌体鉴定(NTA、TEM或者WB实验)和临床标志物检测，研究显示，外泌体中含有的蛋白或RNA能发挥作为癌细胞等患病细胞生物标记物的作用，与疾病的早期诊断及治疗效果的判断关系密切。
[0003]现有技术的不足：
[0004]现有技术中一般采用离心、免疫捕获或过滤等方法分离、纯化血液或体液中的外泌体，离心的分离方法对外泌体的膜结构会造成一定程度的机本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种快速提取血浆中外泌体的方法，其特征在于：本提取方法包括以下步骤：S1、滴加试剂、S2、初步离心沉淀、S3、二次离心沉淀和S4、外泌体重悬，其中：S1、滴加试剂：在血浆样本加入提取试剂，震荡混匀后，在温度为2
‑
8℃的无菌环境中静置0.5
‑
5min，得到混合液A；S2、初步离心沉淀：将步骤S1、滴加试剂中得到的混合液A在温度为2
‑
6℃的条件下，进行500
‑
1500g的离心，离心时间为1
‑
10min，得到上部为液体，底部沉淀，然后去除上部清液，得到管体底部的淡黄色外泌体沉淀物B；S3、二次离心沉淀：将步骤S2、初步离心沉淀中得到的淡黄色外泌体沉淀物B在温度为3
‑
8℃的条件下，进行500
‑
1500g的离心，离心时间为5
‑
60s，去除残液后得到完全沉淀物C；S4、外泌体重悬：向步骤S3、二次离心沉淀到得到完全沉淀物C中加入PBS缓冲液，移液器吸打混匀使沉淀充分溶解，提取得到的外泌体溶液。2.根据权利要求1所述的一种快速提取血浆中外泌体的方法，其特征在于：本方法S1、滴加试剂中每1倍体积血浆样本加入1/4倍体积的...

【专利技术属性】
技术研发人员：韩云波，何伟，薛良，朱文姣，
申请(专利权)人：江苏格诺生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：