特定亚型细胞外囊泡分离和检测试剂盒及其使用方法技术

本发明专利技术公开了一种特定亚型细胞外囊泡分离和检测试剂盒及其使用方法，该试剂盒用于预测肿瘤免疫治疗疗效，包括磁分离单元和ELISA检测单元；磁分离单元用于处理从样品中分离出的总细胞外囊泡，包括用于封闭总细胞外囊泡上非特异性吸附位点的牛血清白蛋白封闭液，用于捕获总细胞外囊泡中所有非肿瘤来源细胞外囊泡的生物素修饰的捕获抗体，用于捕获生物素化细胞外囊泡的链霉亲和素修饰的磁珠以及用于吸附捕获了生物素化细胞外囊泡的链霉亲和素修饰的磁珠的磁力装置；ELISA检测单元用于检测未被磁力装置吸附的细胞外囊泡上的PD

【技术实现步骤摘要】
特定亚型细胞外囊泡分离和检测试剂盒及其使用方法


[0001]本专利技术涉及分子生物学和生物
，涉及一种特定亚型细胞外囊泡分离和检测试剂盒及其使用方法。

技术介绍

[0002]近年来新兴的免疫治疗为恶性肿瘤患者带来了希望。尽管免疫治疗疗效显著，但其响应率仅为10％
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30％，导致大量患者无法从免疫治疗中获益，部分免疫治疗无响应的患者，甚至还会出现免疫治疗导致的疾病快速进展。与传统治疗方法(手术、放疗及化疗等)直接作用于肿瘤细胞不同，免疫治疗通过重新激活患者自身的抗肿瘤免疫，“间接”作用于肿瘤细胞，因此免疫治疗起效较慢，往往需要治疗数月后才进行疗效评估，这无疑会导致大量对免疫治疗无响应的患者错失选择其他治疗方案的时机。因此，在免疫治疗开始前或治疗的早期阶段预测患者是否对免疫治疗响应，是当前免疫治疗领域急需解决的难题。
[0003]细胞外囊泡(Extracellularvesicles,EVs)是细胞分泌的膜性结构的总称，携带丰富的生物活性分子(如蛋白质、核酸等)，并可通过自分泌或旁分泌途径参与对局部或远处细胞的功能调本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种特定亚型细胞外囊泡分离和检测试剂盒，用于预测肿瘤免疫治疗疗效，其特征在于，包括磁分离单元和ELISA检测单元；所述磁分离单元用于处理从样品中分离出的总细胞外囊泡，包括：牛血清白蛋白封闭液，其用于封闭总细胞外囊泡上的非特异性吸附位点；生物素修饰的捕获抗体，其用于捕获总细胞外囊泡中所有非肿瘤来源细胞外囊泡，使其形成生物素化细胞外囊泡；所述捕获抗体包括抗CD3抗体、抗CD235a抗体、抗CD4抗体、抗CD8抗体、抗CD11b抗体、抗CD14抗体、抗CD31抗体、抗CD41抗体、抗CD45抗体和抗CD144抗体；链霉亲和素修饰的磁珠，其用于捕获所述生物素化细胞外囊泡；以及磁力装置，其用于吸附捕获了所述生物素化细胞外囊泡的所述链霉亲和素修饰的磁珠；所述ELISA检测单元用于检测未被磁力装置吸附的细胞外囊泡上的PD
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L1水平。2.根据权利要求1所述的特定亚型细胞外囊泡分离和检测试剂盒，其特征在于：所述链霉亲和素修饰的磁珠的直径为30
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100nm或1
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5μm。3.根据权利要求1所述的特定亚型细胞外囊泡分离和检测试剂盒，其特征在于：所述样品为血液、唾液、尿液、脑脊液、腹腔积液、胸腔积液、汗液、精液、淋巴液、细胞培养上清液中的一种或多种。4.根据权利要求1所述的特定亚型细胞外囊泡分离和检测试剂盒，其特征在于：所述ELISA检测单元包括PD
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L1捕获抗体、多个浓度梯度的标准蛋白溶液、酶标抗体、显色液。5.根据权利要求4所述的特定亚型细胞外囊泡分离和检测试剂盒，其特征在于：所述酶标抗体包括PD
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L1检测抗体和辣根过氧化物酶偶联显色抗体；所述显色液包括A液和B液，所述A液按质量百分数计包括醋酸钠2.72％、柠檬酸0....

【专利技术属性】
技术研发人员：陈刚，余自力，刘星驰，吴敏，赵怡芳，
申请(专利权)人：武汉大学，
类型：发明
国别省市：