一种细胞色素C提取纯化系统技术方案

本实用新型专利技术公开了一种细胞色素C提取纯化系统，包括依次通过管路连通的粉碎提取装置、吸附洗脱装置、浓缩透析装置和洗脱透析装置，所述粉碎装置包括粉碎机和两个提取组件，所述提取组件包括相互连通的提取罐和压滤机，所述吸附洗脱装置包括吸附罐和洗脱柱，所述多孔硅胶设于吸附罐内，所述浓缩透析装置包括反应罐、离心机和透析袋，所述反应罐分别与洗脱柱和离心机连通，所述透析袋连通于离心机，所述洗脱透析装置包括相互连通的层析柱和收集罐。洗脱透析装置包括相互连通的层析柱和收集罐。洗脱透析装置包括相互连通的层析柱和收集罐。

【技术实现步骤摘要】
一种细胞色素C提取纯化系统


[0001]本技术属于细胞色素加工领域，具体涉及一种细胞色素C提取纯化系统。

技术介绍

[0002]细胞色素C是含铁卟啉的结合蛋白质，铁卟啉环和蛋白质部分比例1:1、猪心细胞色素C相对分子质量12200,酵母细胞色素C相对分子质量13000左右，pI10.2～10.8.因以赖氨酸为主的碱性氨基酸含量较多，故呈碱性。每个分子含一个铁原子，约为相对分子质量的0.43％。
[0003]不同原料提取的细胞色素C,在结构、组成、相对分子质量、含铁量和pI等方面可有不同：有趣的是不同种属生物细胞色素C的104个氨基酸组成比较表明，人与黑猩猩没有差异，人与猴有1处差异，人与鸡有13处差异，人与酵母则有44处差异。
[0004]细胞色素C对干燥、热和酸稳定，氧化型在pH2.5～9.35之间不发生变性反应，蛋白部分和铁卟啉环的结合不被酸性丙酮解离。细胞中以氧化型和还原型两种状态存在，除严格厌氧细菌之外，其他一切生物细胞中都含有，是唯一容易从线粒体中分离出来的活性物质。溶于水，氧化型水溶液呈深红色，在饱和硫酸铵中可溶解，还原型水溶液呈桃红色，溶解度较小。现有的细胞色素C在提取时，纯化收率低。

技术实现思路

[0005]本技术目的在于提供一种细胞色素C提取纯化系统，以解决上述
技术介绍
中提出的现有的细胞色素C纯化收率低的问题。
[0006]为了解决现有技术存在的上述问题，本技术所采用的技术方案为：
[0007]细胞色素C提取纯化系统，包括依次通过管路连通的粉碎提取装置、吸附洗脱装置、浓缩透析装置和洗脱透析装置。
[0008]所述粉碎装置包括粉碎机和两个提取组件，所述提取组件包括相互连通的提取罐和压滤机。
[0009]所述吸附洗脱装置包括吸附罐、洗脱柱和多孔硅胶，所述多孔硅胶设于吸附罐内。
[0010]所述浓缩透析装置包括反应罐、离心机和透析袋，所述反应罐分别与洗脱柱和离心机连通，所述透析袋连通于离心机。
[0011]所述洗脱透析装置包括相互连通的层析柱和收集罐。
[0012]进一步的，所述提取组件包括第一提取组件和第二提取组件，所述第一提取组件包括第一提取罐和第一压滤机，所述第二提取组件包括第二提取罐和第二压滤机，所述压滤机的进口连通于提取罐的出口。
[0013]进一步的，所述粉碎机连通于提取罐。
[0014]进一步的，所述吸附罐内设有多孔硅胶。
[0015]提取工艺：
[0016]步骤一：绞碎、提取、压滤；
[0017]步骤11：取新鲜或冷冻猪心，去血块、脂肪和肌腱等，切成条块洗去血液，用粉碎机将猪心绞碎，获得碎肉；
[0018]步骤12：将碎肉加入第一提取罐，加1.5倍量蒸馏水搅拌均匀，用1mol/L硫酸调整pH至2
‑
5，常温搅拌2.5h，获得混合液a。
[0019]步骤13：将混合液a通入第一压滤机内，1mol/L氨水调节pH至6.1
‑
6.3,过滤，得提取液b和心渣c；
[0020]步骤14：将心渣c通入第二提取罐，加1.5倍量蒸馏水搅拌均匀，用1mol/L硫酸调整pH至2
‑
5，常温搅拌2.5h，获得混合液d。
[0021]步骤15：将混合液d通入第二压滤机内，1mol/L氨水调节pH至6.1
‑
6.3,过滤，得提取液e和心渣f。
[0022]步骤16，将提取液b和提取液e混合，获得混合液g。
[0023]步骤二：中和、吸附、洗脱
[0024]步骤21：将混合液g通入吸附罐内，加2mol/L氨水中和至pH7
‑
8；
[0025]步骤22：在冰浴中静置沉淀杂蛋白，吸取上层清液h。
[0026]步骤23：向上层清液h中，加入多孔硅胶，搅拌吸附30
‑
50min,静置倾去上层清液。
[0027]步骤24：对多孔硅胶进行洗涤，先用蒸馏水洗涤3次，再用2g/L(0.2％)氯化钠洗涤4次，最后用蒸馏水洗至洗液澄清为止。
[0028]步骤25：将洗涤后的多孔硅胶放入洗脱柱内，用25％硫酸铵溶液洗脱，得洗脱液i。
[0029]步骤三：盐析、浓缩、透析
[0030]步骤31：向洗脱液i中加入固体硫酸铵达到45％(相对密度为1.21～1.23)，使杂蛋白析出，过滤，收集透明液j。
[0031]步骤32：向透明液j中缓缓加入20％三氯乙酸(25ml/L,按体积计算)，边加边搅拌使细胞色素C沉淀析出，获得混合液k。
[0032]步骤33：将混合液k离心，收集沉淀l。
[0033]步骤34：将沉淀l荣誉蒸馏水，装入透析袋中透析(先用常水，再用蒸馏水透析至无硫酸根为止)，获得溶液m。
[0034]步骤35：将溶液m过滤，得到细胞色素C粗品溶液。
[0035]步骤四：吸附、洗脱、透析
[0036]步骤41：将细胞色素C粗品溶液通过层析柱吸附，所述层析柱为处理好的Amberlite IRC
‑
50(NH4+)树脂柱。
[0037]步骤42：将层析柱取出，水洗至澄清。
[0038]步骤43：将层析柱装好，用0.6mol/L磷酸氢二钠和0.4mol/L.氯化钠混合液洗脱，获得洗脱液n。
[0039]步骤44：洗脱液用蒸馏水透析去氯离子，得细胞色素C精品。
[0040]本技术的有益效果为通过对加工系统的改进，使得细胞色素C的纯化收率更高。
附图说明
[0041]图1为本技术的结构示意图。
[0042]1‑
粉碎机；21
‑
第一提取罐；22
‑
第一压滤机；23
‑
第二提取罐；24
‑
第二压滤机；3
‑
吸附罐；4
‑
洗脱柱；5
‑
反应罐；6
‑
离心机；7
‑
透析袋；8
‑
层析柱；9
‑
收集罐。
具体实施方式
[0043]下面结合附图及附图标记对本技术作进一步阐述。
[0044]为了能够更清楚地理解本技术的上述目的、特征和优点，下面结合附图和具体实施例对本技术进行详细描述。需要说明的是，在不冲突的情况下，本申请的实施例及实施例中的特征可以相互组合。
[0045]术语“第一”、“第二”、“第三”等仅用于区分描述，而不能理解为指示或暗示相对重要性。
[0046]在本技术的描述中，还需要说明的是，除非另有明确的规定和限定，术语“设置”、“安装”、“相连”、“连接”应做广义理解，例如，可以是固定连接，也可以是可拆卸连接，或一体地连接；可以是机械连接，也可以是电连接；可以是直接相连，也可以通过中间媒介间接相连，可以是两个元件内部的连通。对于本领域的普通本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种细胞色素C提取纯化系统，其特征在于：包括依次通过管路连通的粉碎提取装置、吸附洗脱装置、浓缩透析装置和洗脱透析装置；所述粉碎提取装置包括粉碎机(1)和两个提取组件，所述提取组件包括相互连通的提取罐和压滤机；所述吸附洗脱装置包括吸附罐(3)和洗脱柱(4)；所述浓缩透析装置包括反应罐(5)、离心机(6)和透析袋(7)，所述反应罐(5)分别与洗脱柱(4)和离心机(6)连通，所述透析袋(7)连通于离心机(6)；所述洗脱透析装置包括相互连通的层析柱(8)和收集罐(9)。2.根据权利要求1所述的细胞色素C提取纯化系统，其特征在于：所述提...

【专利技术属性】
技术研发人员：扶柏柯，魏生明，宋秉生，王佳斐，高雅妮，刘涛，慕娟娟，
申请(专利权)人：酒泉大得利制药股份有限公司，
类型：新型
国别省市：