靶向末端甘露糖的嵌合抗原受体及其应用制造技术

本发明专利技术提供靶向末端甘露糖的嵌合抗原受体及其应用。具体涉及一种嵌合抗原受体，包含甘露糖结合分子、铰链区、跨膜区、胞内共刺激区和任选的信号传导区，任选还包含信号肽序列。表达所述嵌合抗原的免疫细胞，可以有效抑制肿瘤生长和复发。瘤生长和复发。瘤生长和复发。

Chimeric antigen receptor targeting terminal mannose and its application

【技术实现步骤摘要】
靶向末端甘露糖的嵌合抗原受体及其应用


[0001]本专利技术涉及细胞治疗领域，具体涉及靶向甘露糖的嵌合抗原受体及其应用。

技术介绍

[0002]随着生物技术的发展，癌症疾病迎来了细胞免疫治疗新手段。目前上市或在研的细胞治疗产品主要集中于血液肿瘤领域，然而受实体瘤折磨的癌症患者数量明显高于血液恶性肿瘤患者数量。尽管目前也有一些针对实体瘤领域的细胞免疫疗法处于临床前/临床阶段，然而靶点特异性不足、各器官间靶点差异性大、新靶点开发难度受限、恶性肿瘤治疗效果欠佳、治疗过程容易引发严重的毒副作用等使得实体肿瘤领域的研发进程受阻，至今仍无针对实体瘤的细胞治疗产品获批。

技术实现思路

[0003]本专利技术提供的靶向末端甘露糖的嵌合抗原受体特异性识别肿瘤细胞或者病变位点处抗原/配体上含末端甘露糖的N
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糖结构。
[0004]本文一方面提供一种嵌合抗原受体，包含甘露糖结合分子、铰链区、跨膜区和胞内区，任选还包含信号肽序列。
[0005]在一个或多个实施方案中，所述甘露糖结合分子包含选自以下的一种或多种：甘露糖结合蛋白或其甘露糖结合结构域、特异性结合甘露糖的抗体或其抗原结合片段、特异性结合甘露糖的核酸适配体或其衍生物。
[0006]在一个或多个实施方案中，甘露糖结合蛋白是甘露糖凝集素。
[0007]在一个或多个实施方案中，甘露糖结合蛋白具有：（1）SEQ ID NO:2所示的序列，或（2）与SEQ ID NO:2具有至少60%（例如至少70%、至少80%、至少90%、至少95%，至少98%，至少99%）序列相同性并保留其甘露糖结合活性的序列。
[0008]在一个或多个实施方案中，项目（2）所述序列具有甘露糖结合基序WGG、RL2Q、EGP中的一个或二个或全部，其中L2为1~3个任意氨基酸。L2优选为2个任意氨基酸。
[0009]在一个或多个实施方案中，项目（2）所述序列具有1
‑
5个甘露糖结合基序WGGL1RL2QL3EGP，其中，L1为12~18个任意氨基酸，L2为1~3个任意氨基酸，L3为20~25个任意氨基酸。
[0010]在一个或多个实施方案中，项目（2）所述序列具有1
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2个所述甘露糖结合基序。
[0011]在一个或多个实施方案中，L1为15个任意氨基酸，L2为2个任意氨基酸，L3为24个任意氨基酸。
[0012]在一个或多个实施方案中，（2）是与SEQ ID NO:2具有至少60%（例如至少70%、至少80%、至少90%、至少95%，至少98%，至少99%）序列相同性并在其对应于SEQ ID NO:2的选自以下的至少12个或至少13个或至少16个或全部位点具有与SEQ ID NO:2相同的氨基酸的序列：第10、11、12、28、31、56、57、58、77、78、79、95、98、123、124、125位。
[0013]在一个或多个实施方案中，（2）具有SEQ ID NO:17
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27中任一所述的序列。
[0014]在一个或多个实施方案中，甘露糖结合蛋白的甘露糖结合结构域包含甘露糖结合基序WGG、RL2Q、EGP中的一个或二个或全部，其中L2为1~3个任意氨基酸。L2优选为2个任意氨基酸。
[0015]在一个或多个实施方案中，甘露糖结合蛋白的甘露糖结合结构域包含甘露糖结合基序WGGL1RL2QL3EGP，其中，L1为12~18个任意氨基酸，L2为1~3个任意氨基酸，L3为20~25个任意氨基酸。优选地，L1为15个任意氨基酸，L2为2个任意氨基酸，L3为24个任意氨基酸。
[0016]在一个或多个实施方案中，甘露糖结合蛋白的甘露糖结合结构域是SEQ ID NO:2的包含选自以下的至少12个或至少13个或至少16个或全部位点的片段：第10、11、12、28、31、56、57、58、77、78、79、95、98、123、124、125位。
[0017]在一个或多个实施方案中，从N端到C端，该嵌合抗原受体依次含有甘露糖结合分子、铰链区、跨膜区和胞内区。
[0018]在一个或多个实施方案中，所述铰链区包括选自CTLA4、CD28、CD7、IgA1、IgA2、IgG1、IgG4、IgD、CD8α、PD
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1的铰链区或胞外区衍变序列。所述铰链区优选为CD8α铰链区。
[0019]在一个或多个实施方案中，所述铰链区的氨基酸序列如SEQ ID NO:4所示。
[0020]在一个或多个实施方案中，所述跨膜区包括选自TCRα、TCRβ、TCRγ、TCRδ、CD4、CD8α，CD28、CD3ζ、CD3ε、CD3γ、CD3δ、CD45、CD5、CD9、CD16、CD22、CD33、CD37、CD64、CD80、CD86、CD134、CD137和CD154的跨膜结构域。所述跨膜区优选为CD28跨膜域。
[0021]在一个或多个实施方案中，所述跨膜区的氨基酸序列如SEQ ID NO:5所示。
[0022]在一个或多个实施方案中，胞内区包括胞内共刺激区和/或信号传导区。
[0023]在一个或多个实施方案中，胞内共刺激区包括选自以下蛋白的共刺激区：MHC I类分子、TNF受体蛋白、免疫球蛋白样蛋白、细胞因子受体、整联蛋白、信号淋巴细胞活化分子(SLAM蛋白)、激活NK细胞受体、BTLA、Toll配体受体、OX40、CD2、CD7、CD27、CD28、CD30、CD40、CDS、ICAM
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1、LFA
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1(CD11a/CD18)、4
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1BB(CD137)、B7
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H3、CDS、ICAM
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1、ICOS(CD278)、GITR、BAFFR、LIGHT、HVEM(LIGHTR)、KIRDS2、SLAMF7、NKp80(KLRF1)、NKp44、NKp30、NKp46、CD19、CD4、CD8α、CD8β、IL2Rβ、IL2Rγ、IL7Rα、ITGA4、VLA1、CD49a、ITGA4、IA4、CD49D、ITGA6、VLA
‑
6、CD49f、ITGAD、CD11d、ITGAE、CD103、ITGAL、CD11a、LFA
‑
1、ITGAM、CD11b、ITGAX、CD11c、ITGB1、CD29、ITGB2、CD18、LFA
‑
1、ITGB7、NKG2D、NKG2C、TNFR2、TRANCE/RANKL、DNAM1(CD226)、SLAMF4(CD244、2B4)、CD84、CD96(Tactile)、CEACAM1、CRTAM、Ly9(CD229)、CD160(BY55)、PSGL1、CD100(SEMA4D)、CD69、SLAMF6(NTB
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A、Ly108)、SLAM(SLAMF1、CD150、IPO
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3)、BLAME(SLAMF8)、SELPLG(C本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种嵌合抗原受体，该嵌合抗原受体依次含有甘露糖结合分子、铰链区、跨膜区和胞内区，其中胞内区包含胞内共刺激区和信号传导区，所述甘露糖结合蛋白如SEQ ID NO:2所示，所述铰链区的氨基酸序列如SEQ ID NO:4所示，所述跨膜区的氨基酸序列如SEQ ID NO:5所示，所述胞内共刺激区的氨基酸序列如SEQ ID NO:6所示，和所述信号传导区的氨基酸序列如SEQ ID NO:7所示。2.如权利要求1所述的嵌合抗原受体，其特征在于，所述嵌合抗原受体还含有位于N端的信号肽和位于甘露糖结合蛋白和铰链区之间的接头，所述信号肽如SEQ ID NO:1所示，所述接头如SEQ ID NO:3所示。3.一种核酸分子，包含选自以下的序列：（1）权利要求1或2所述的嵌合抗原受体的编码序列；（2）（1）的互补序列。4.一种核酸构建物，其包含权利要求3所述的核酸分子。5.如权利要求4所述的核酸构建物，其特征在于，所述核酸构建物是载体。6.一种宿主细胞，所述宿主细胞：（1）表达权利要求1或2所述的嵌合抗原受体，和/或（2）包含权利要求3所述的核酸分子和/或权利要求4或5所述的核酸构建物。7.如权利要求6所述的宿主...

【专利技术属性】
技术研发人员：杨旸，刘学欢，朱圣淋，杨宇，周伸奥，张全，
申请(专利权)人：上海荧辉医疗器械有限公司，
类型：发明
国别省市：