用于通过基因疗法治疗诸如帕金森病的突触核蛋白病变的病毒颗粒制造技术

本公开内容涉及用于通过基因疗法治疗突触核蛋白病变、特别是偶发性帕金森病的病毒颗粒。更具体而言，本公开内容涉及用于在有需要的受试者中通过基因疗法治疗突触核蛋白病变的病毒颗粒，所述病毒颗粒包含核酸构建体，其包括编码葡萄糖脑苷脂酶的转基因。包括编码葡萄糖脑苷脂酶的转基因。

Viral particles for the treatment of synuclein lesions such as Parkinson's disease by gene therapy

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】用于通过基因疗法治疗诸如帕金森病的突触核蛋白病变的病毒颗粒


[0001]本公开内容涉及包含含有编码葡萄糖脑苷脂酶的转基因的核酸构建体的病毒颗粒及其通过基因疗法在治疗突触核蛋白病变、特别是治疗偶发性帕金森病中的用途。

技术介绍

[0002]帕金森病(PD)是一种无情的神经退化性疾病，其特征为在称为黑质致密部(substantia nigra pars compacta，SNc)的脑部区域中丧失产生多巴胺的神经元。由于此种神经元丧失，脑中的多巴胺水平逐渐下降。降低的多巴胺水平诱发基底神经节回路的功能异常，导致PD的典型主症(颤抖、僵硬、运动迟缓和姿势不稳定)出现。目前，可使用药物治疗(左旋多巴和多巴胺激动剂)和外科治疗(深度脑部刺激)，这些治疗在减轻动作型症状上展现出高的功效。然而，帕金森病是一种一般性神经退化性疾病，其中SNc先受影响，但不限于此。现有的疗法仅为多巴胺对症治疗，对于减缓疾病进展没有任何影响。
[0003]PD和相关的突触核蛋白病变大多为偶发性脑部疾病(也称为特发性疾病；占经诊断患者的超过90
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95％)。本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种病毒颗粒，其包含含有编码葡萄糖脑苷脂酶的转基因的核酸构建体。2.根据权利要求1所述的病毒颗粒，其中所述转基因包含：a)选自SEQ ID NO：1、7、11、12和19的核苷酸序列，或b)编码人葡萄糖脑苷脂酶的核苷酸序列，其中人葡萄糖脑苷脂酶包含SEQ ID NO：5、6、8、17或18。3.根据权利要求1或2所述的病毒颗粒，其中所述核酸构建体还包含可操作地连接至所述转基因的启动子，并且其中所述启动子优选使所述转基因至少在黑质致密部(SNc)的神经细胞和小神经胶质细胞中表达。4.根据权利要求3所述的病毒颗粒，其中所述启动子是普遍存在的启动子，特别是选自包含或由SEQ ID NO：2或20组成的GusB启动子、包含或由SEQ ID NO：9或21组成的CAG启动子、包含或由SEQ ID NO：27组成的JeT启动子和包含或由SEQ ID NO：13组成的hSyn启动子的启动子。5.根据权利要求1
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4中任一项所述的病毒颗粒，其中所述病毒颗粒至少同时靶向神经细胞和小神经胶质细胞。6.根据权利要求1
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5中任一项所述的病毒颗粒，其中所述病毒颗粒至少同时靶向黑质致密部中的多巴胺能神经元和小神经胶质细胞。7.根据权利要求1
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6中任一项所述的病毒颗粒，其中所述病毒颗粒是重组腺相关病毒(rAAV)颗粒，优选包括选自AAV2、AAV5、AAV9、AAV
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MNM004、AAV
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MNM008和AAV TT的衣壳蛋白。8.根据权利要求1
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7中任一项所述的病毒颗粒，其中所述病毒颗粒包含AAV TT衣壳蛋白，其优选包含SEQ ID NO：14的氨基酸序列或与SEQ ID NO：14至少98.5％、优选99％或99.5％同一性的序列。9.根据权利要求1
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8中任一项所述的病毒颗粒，其中所述核酸构建体还包含多腺苷酸化信号序列，优选包含SEQ ID NO：28或3、更优选SEQ ID NO：28的多腺苷酸化信号序列。10.根据权利要求1
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9中任一项所述的病毒颗粒，其中所述核酸构建体包含在病毒载体中，所述病毒载体还包含5'ITR序列和3'ITR序列，优选腺相关病毒的5'ITR序列和3'ITR序列，更优选来自AAV2血清型的5'ITR序列和3'ITR序列，其包含或由SEQ ID NO：15和/或16的序列或具有与SEQ ID NO：15和/或16至少80％或至少90％同一性的序列组成。11.根据权利要求1
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10中任一项所述的病毒颗粒，其中所述病毒载体包含SEQ ID NO：4或具有与SEQ ID NO：4至少80％或至少90％同一性的核酸序列。12.根据权利要求1
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11中任一项所述的病毒颗粒，其中所述核酸构建体包含在启动子的控制下的人葡萄糖脑苷脂酶的编码序列，使所述人葡萄糖脑苷脂酶至少在多巴胺能神经元和小神经胶质细胞两者中表达，其中所述病毒颗粒选自至少靶向黑质致密部的多巴胺能神经元和小神经胶质细胞的病毒颗粒，通常是包括选自AAV2、AAV5和AAV9的衣壳蛋白的AAV颗粒。13.根据权利要求1
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11中任一项所述的病毒颗粒，其中所述核酸构建体包含在启动子的控制下的人葡萄糖脑苷脂酶的编码序列，使所述人葡萄糖脑苷脂酶至少在多巴胺能神经元和小神经胶质细胞两者中表达，优选至少在黑质致密部和大脑皮质的神经元中表达，其中所述病毒颗粒选自具有逆向运输的病毒颗粒，通常是包括选自AAV
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MNM004、AAV
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MNM008
和AAV
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TT的AAVretro衣壳蛋白的病毒颗粒。14.根据权利要求1
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11或13中任一项所述的包含核酸构建体的病毒颗粒，所述核酸构建体包含：a)编码人葡萄糖脑苷脂酶的转基因，其中所述转基因包含SEQ ID NO：19或编码人葡萄糖脑苷脂酶的序列，其中人葡萄糖脑苷脂酶包含SEQ ID NO：5或8；b)可操作地连接至所述转基因的启动子，其中所述启动子优选使所述转基因至少在黑质致密部(SNc)的神经细胞和小神经胶质细胞中表达；其中所述启动子优选是包含或由SEQ ID NO：9或21组成的CAG启动子、包含或由SEQ ID NO：2或20组成的GusB启动子或包含或由SEQ ID NO：27组成的JeT启动子或包含或由SEQ ID NO：13组成的hSyn启动子；c)多腺苷酸化信号序列，优选包含SEQ ID NO：28或3、优选SEQ ID NO：28的多腺苷酸化信号序列；其中所述病毒颗粒是重组腺相关病毒(rAAV)颗粒，优选包含AAV TT的衣壳蛋白，并且更优选包含SEQ ID NO：14或具有与SEQ ID NO：14至少98.5％、优选99％或99.5％同一性的序列；其中所述核酸构建体包含在病毒载体中，所述病毒载体还包含5'ITR序列和3'ITR序列，优选腺相关病毒的5'ITR序列和3'ITR序列，更优选来自AAV2血清型的5'ITR序列和3'ITR序列，并且其中所述5'ITR序列和所述3'ITR序列各自独立地包含或由SEQ ID NO：15或16的序列或具有与SEQ ID NO：15和/或16至少80％或至少90％同一性的序列组成，其中优选5'ITR包含SEQ I...

【专利技术属性】
技术研发人员：G，
申请(专利权)人：生物医学网络研究财团中心UCB生物制药有限责任公司，
类型：发明
国别省市：