一种含有PRP的干细胞生物制剂及其应用制造技术

本发明专利技术属于生物制剂技术领域，具体涉及一种含有PRP的干细胞生物制剂及其应用。本发明专利技术提供的含有PRP的干细胞生物制剂是将富血小板血浆与极小胚胎样干细胞液放入细胞培养袋中培养24h，取出液体，过70目筛网，离心，去除大部分上清液，将试管底部液体与试管底部沉淀充分混悬制成。制备得到的含有富血小板血浆和极小胚胎样干细胞的含有PRP的干细胞生物制剂对慢性肾炎、尿毒症具有较好的治疗效果。尿毒症具有较好的治疗效果。尿毒症具有较好的治疗效果。

A stem cell biological preparation containing PrP and its application

【技术实现步骤摘要】
一种含有PRP的干细胞生物制剂及其应用


[0001]本专利技术属于生物制剂
，具体涉及一种含有PRP的干细胞生物制剂及其应用。

技术介绍

[0002]慢性肾小球肾炎简称为慢性肾炎，慢性肾炎是由各种因素导致肾脏异常而引起的功能性障碍的疾病。通常临床表型为水肿、血尿、蛋白尿等。慢性肾炎病有：糖尿病肾病，肾小管间质疾病，原发性与继发性肾小球炎等，起病因素各不同，随着病情延发，病变加重，导致不同程度肾功能减退，经过长时间拖延，最终将发展为尿毒症。
[0003]目前，慢性肾炎的治疗给药主要有环磷酰胺、环孢素、利尿剂等，通过激素利尿剂、抑制免疫介导炎症、减轻肾脏硬化，以延缓肾功能恶化、控制水肿、缓解临床症状目的，但是这些治疗存在着副作用大、疗程长、成本高等副作用，而且肾并无修复功能，治愈率低。因而急需技术人员开发副作用小，疗效强、使用安全的药物，以满足临床需求。
[0004]富含血小板的血浆，亦可称为富血小板血浆(Pla telet RichPlasma，PRP)，其是通过离心全血而得到提取出富含高浓度血小板，含有大量的生长因子，如血小板衍生生长因子(platelet derived growth factor，PDGF)、胰岛素样生长因子(insulin
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like growth factor，IGF)、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor，VEGF)、肿瘤转化因子β(tumor transformationfactor
‑/>β，TGF
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β)等。且各生长因子的比例与体内正常比例相符，使生长因子之间有良好的协同作用，避免了单一生长因子刺激创伤面修复不佳的缺点。
[0005]自从上世纪80年代David R.Knighton等人发现血小板细胞能促进血管增生、胶原合成后，人们便致力于将富血小板血浆(PRP)应用于临床，渴望解决修复能力低下的器官组织的损伤修复问题。PRP对患者的损伤小且制作简单，能有效降低医疗成本，促进患者的创面愈合，PRP含有大量纤维蛋白，为修复细胞提供良好的支架，还可以收缩创面，具有促凝血的作用，可刺激软组织再生，促进伤口早期闭合和防止感染
[0006]极小胚胎样干细胞(very small embryonic
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like stem cells,VSEL，简称Vcell)是一类体积非常小、数量非常少的非造血干细胞，其形态学和细胞标志与胚胎干细胞有相似之处，具有胚胎干细胞多分化潜能特性，可以向包括心肌和血管内皮细胞在内的三个胚层的细胞分化，如血细胞、骨细胞、肌细胞和神经细胞等，且无免疫排异、无伦理问题。极小胚胎样干细胞最先是美国路易斯维尔大学Kucia等人2006年首先发现并命名的，他们从小鼠骨髓单个核细胞发现且成功分离出来，细胞表型为Sca
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1+lin
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CD45
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，随后进一步研究发现人很多组织中同样存在，如骨髓、脐带血、外周血、脑、心肌、肾脏、胰腺等，细胞表型为SSEA
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4+/Oct
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4+/CD133+/CXCR4+/Lin
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/CD45
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，直径为4
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6μm。但是数量极少，约占总的单个核细胞的0.01％
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0.02％，在体外可以被诱导分化成心肌细胞、神经细胞等，在再生医学和临床治疗前景广阔。
[0007]因此，研究和开发出一种有效的慢性肾炎的药物制剂仍是目前亟需解决的难点。

技术实现思路

[0008]为了解决现有技术中的不足，本专利技术提供一种含有PRP的干细胞生物制剂及其应用，该含有PRP的干细胞生物制剂对慢性肾炎、尿毒症具有较好的治疗效果。
[0009]本专利技术提供了一种含有PRP的干细胞生物制剂，该含有PRP的干细胞生物制剂的制备方法为：
[0010]将富血小板血浆与极小胚胎样干细胞液放入细胞培养袋中培养24h，取出液体，过70目筛网，在2500g的条件下离心8～12min，去除大部分上清液，剩试管底部10ml液体，将试管底部液体与试管底部沉淀充分混悬，即得；
[0011]所述富血小板血浆与极小胚胎样干细胞液的体积为1:5。
[0012]进一步地，所述富血小板血浆和极小胚胎样干细胞液来自患者外周血。
[0013]进一步地，所述患者为肾炎患者、慢性肾炎患者或尿毒症患者，抽取患者外周血后在200g条件下离心28～32min。
[0014]进一步地，所述富血小板血浆经0.22nm蓝色过滤器过滤得到。
[0015]进一步地，所述极小胚胎样干细胞液经5.0nm过滤器过滤得到。
[0016]另外，本专利技术提供了所述的含有PRP的干细胞生物制剂在制备治疗肾炎药物中的用途。
[0017]进一步地，本专利技术提供了所述的含有PRP的干细胞生物制剂在制备治疗慢性肾炎药物中的用途。
[0018]进一步地，本专利技术提供了所述的含有PRP的干细胞生物制剂在制备治疗尿毒症药物中的用途。
[0019]自体极小胚胎样干细胞(VSEL)具有多向分化潜能、造血支持和促进干细胞植入、免疫调控、自我更新、分泌蛋白等特点。专利技术人在研究自体极小胚胎样干细胞时发现，其可以向包括心肌和血管内皮细胞在内的三个胚层的细胞分化，具备很好肾脏修复作用。而富血小板血浆含有大量的生长因子，大量纤维蛋白，为修复细胞提供良好的支架，还可以收缩创面，具有促凝血的作用，可刺激软组织再生，促进伤口早期闭合和防止感染。
[0020]专利技术人首次提出将富血小板血浆与自体极小胚胎样干细胞联合使用用于治疗慢性肾炎和尿毒症的疾病，意外地发现，富血小板血浆与自体极小胚胎样干细胞具有很好的组织协同修复作用，具体为：可以有效降低患者的尿蛋白、尿潜血、肌酐和尿酸的含量，减轻脸部、踝部等水肿情况，降低疼痛感，二者联合使用可以大大缩短慢性肾炎和尿毒症患者的病程，提高治愈率。
[0021]与现有技术相比，本专利技术提供的含有PRP的干细胞生物制剂对慢性肾炎、尿毒症等症状具有很好的缓解作用，可以极大的减轻患者的痛苦。同时该含有PRP的干细胞生物制剂副作用小，用药周期短，效果显著，是一种较为理想的治疗慢性肾炎、尿毒症的药物制剂。
附图说明：
[0022]图1为实施例1步骤S3制得的极小胚胎样干细胞的显微镜图；
[0023]图2为实施例1步骤S3制得的极小胚胎样干细胞的流式细胞仪中的检测结果图。
具体实施方式
[0024]以下通过具体实施方式的描述对本专利技术作进一步说明，但这并非是对本专利技术的限制，本领域技术人员根据本专利技术的基本思想，可以做出各种修改或改进，但是只要不脱离本专利技术的基本思想，均在本专利技术的范围之内。
[0025]实施例1、一种含有PRP的干细胞生物制剂
[0026]S1样品前处理：
[0027]抽取确诊为慢性肾炎的患者外周血100ml本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种含有PRP的干细胞生物制剂，其特征在于，该含有PRP的干细胞生物制剂的制备方法为：将富血小板血浆与极小胚胎样干细胞液放入细胞培养袋中培养24h，取出液体，过70目筛网，在2500g的条件下离心8～12min，去除大部分上清液，剩试管底部10ml液体，将试管底部液体与试管底部沉淀充分混悬，即得；所述富血小板血浆与极小胚胎样干细胞液的体积为1:5。2.如权利要求1所述的含有PRP的干细胞生物制剂，其特征在于，所述富血小板血浆和极小胚胎样干细胞液来自患者外周血。3.如权利要求2所述的含有PRP的干细胞生物制剂，其特征在于，所述患者为肾炎患者、慢性肾炎患者...

【专利技术属性】
技术研发人员：吴道贫，莫乾强，谢秀凤，邹洁宜，练劲，
申请(专利权)人：广州准优生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：