一种黑附球菌发酵产物、制备方法及其应用技术

本发明专利技术涉及一种黑附球菌发酵产物、制备方法及其应用。黑附球菌的保藏编号为CGMCC No.40003，可以应用于植物病害的防治，施用该发酵液及其制剂够有效防控小麦赤霉病。与黑附球菌孢子菌剂相比，本发明专利技术利用黑附球菌发酵产物及其制剂受环境影响小，具有施用方法简单，成本低廉等优点。成本低廉等优点。成本低廉等优点。

A fermentation product, preparation method and application of Staphylococcus Niger

【技术实现步骤摘要】
一种黑附球菌发酵产物、制备方法及其应用


[0001]本专利技术属于微生物
，尤其涉及一种黑附球菌发酵产物、制备方法及其应用。

技术介绍

[0002]植物内生菌是一种在植物生命周期的一个时期内寄生在植物体内的微生物，不会诱发疾病症状，也不会产生外在的明显伤害。调查表明，内生菌对寄主植物具有不同的生态功能，如促进植物生长发育、提高植物对病原菌的抗性、协助植物在恶劣条件下的生长发育。此外，有些植物内生菌还产生具有抗菌特性的新次生代谢物，保护植物免受细菌、真菌和昆虫等的侵害。
[0003]目前，国内外主要利用黑附球菌等植物内生菌孢子菌剂防治植物病虫害。菌剂在田间应用时，其生防效果依赖于菌剂的菌量和活性。因此，菌剂的应用效果受到保存条件、田间环境、植物微生态、自然环境等田间的影响很大，需要在合适的时机和条件下施用。具有较高知识水平的农业技术员可以掌握使用方法，从而达到很好的菌剂施用效果。但基层农民往往受限于知识、精力和经济条件，对菌剂的施用存在看天吃饭的心态。因此活体菌剂因其施用方法复杂，不符合基层农民对简约式、集成式施用的需求。
[0004]部分生防微生物是依靠产生有活性的代谢产物来抑制病原微生物的发生和扩展，因此，开发微生物发酵液及其制剂是生防菌应用的重要途径。在菌株发酵液制备时，一是要充分考虑开发低成本的生防微生物菌株发酵工艺，二是要开发生态型的微生物发酵液制剂加工工艺。制剂一般开发为水剂、颗粒剂、可湿性粉剂等方便施用的剂型。目前，关于黑附球菌的发酵液及其制剂对植物病害的防治效果的应用未有报道。r/>
技术实现思路

[0005]鉴于现有技术所存在的问题，本专利技术提供一种黑附球菌发酵产物、制备方法及其应用，可以应用于植物病害的防治，尤其是有效防控小麦赤霉病，具有防控效果好、受环境影响小、施用方法简单和成本低廉等优点。
[0006]本专利技术解决上述技术问题的技术方案如下：
[0007]一种黑附球菌发酵产物，黑附球菌的拉丁文名称为Epicoccum nigrum，保藏编号为CGMCC No.40003。本专利技术提供的黑附球菌，分离自北京市种植的玉米叶片经纯化培养筛选获得，在本专利技术实施例中将其命名为黑附球菌38L1，于2021年12月07日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC)，保藏地址为：中国，北京市朝阳区北辰西路1号院3号。
[0008]该菌株为专利技术人意外分离获得，经验证具有拮抗多种病原真菌的优点，例如，对禾谷镰刀菌、灰霉菌、炭疽病菌、灰霉菌、核盘菌等多种病原菌具有优异的抑制作用，具有良好的应用前景。
[0009]优选地，上述黑附球菌发酵产物不含有黑附球菌菌体(包括菌体产生的孢子)。本
专利技术首次提出该菌株发酵产物可作为制剂，用来防治镰刀菌引发的小麦赤霉病。与黑附球菌孢子菌剂相比，本专利技术利用黑附球菌发酵产物及其制剂受环境影响小，具有施用方法简单，成本低廉等优点。通过开发高效的黑附球菌发酵液及其制剂，能够有效防控农业生产病害，并且对环境友好，保障农民稳产增收。
[0010]目前还没有黑附球菌发酵产物防治小麦赤霉病的报道，本专利技术首次通过开发有价值的黑附球菌菌株资源，开发发酵产物制备方法，评价应用效果。
[0011]本专利技术对发酵产物的形态没有特殊要求，可以为液体也可以为固体。
[0012]本专利技术还提供一种黑附球菌发酵产物的制备方法，包括以下步骤：将上述黑附球菌发酵培养，除去菌体，获得黑附球菌发酵产物。
[0013]进一步，可以通过过滤和/或离心的方法除去菌体。
[0014]进一步，将上述黑附球菌经马铃薯葡萄糖液体培养基发酵培养。
[0015]例如，可以将黑附球菌菌株38L1在PDA培养基中活化培养10天，之后取菌块接种液体培养基。在25℃摇床以175rpm培养5天。可以采用过滤，离心等方法，得到不含孢子的发酵液。
[0016]本专利技术提供一种生物制剂，包括上述黑附球菌发酵产物和载料。本专利技术对生物制剂的剂型没有特殊要求，可以为液体制剂也可以为固体制剂，例如：颗粒制剂、粉剂(包括可湿性粉剂)、喷雾制剂以及其他剂型。优选的，可湿性粉剂更便于使用且效果更好。
[0017]采用上述生物制剂可以用于植物病虫害的防治，尤其是有效防控小麦赤霉病，具有防控效果好、受环境影响小、施用方法简单和成本低廉等优点。
[0018]进一步，所述载料可以选择一种或多种，例如：白炭黑、硅藻土、膨润土、十二烷基磺酸钠、润湿剂、可溶性淀粉、高岭土等等。用于进一步提高生物制剂的性能。
[0019]具体的，生物制剂可以包括以下重量份组分：上述黑附球菌发酵产物的粉剂10份、白炭黑40份、硅藻土30份、膨润土10份、十二烷基磺酸钠5份、润湿剂5份。
[0020]本专利技术提供上述生物制剂的制备方法，可以包括以下步骤：将生物制剂的各组分混合。
[0021]可湿性粉剂的制备方法也可以包括以下步骤：使用硅藻土对黑附球菌发酵液进行吸附、离心或板框过滤、干燥，形成可湿性粉剂。
[0022]也可以将所得到的黑附球菌发酵液进行喷雾干燥，通过加热喷嘴喷雾而雾化发酵液，在干燥室底部收集发酵液的内容物，具体如下：进口温度180℃，出口温度80℃，加入喷雾载体可溶性淀粉。将以下原料按照重量百分比混合均匀：发酵液粉剂10％、白炭黑40％、硅藻土30％、膨润土10％、十二烷基磺酸钠5％、润湿剂5％。控制水分含量≤5％，得到黑附球菌发酵液的可湿性粉剂。
[0023]本专利技术提供上述黑附球菌发酵产物或上述生物制剂在抑制禾谷镰刀菌的生长和/或繁殖中的应用。
[0024]本专利技术提供上述述黑附球菌发酵产物或上述生物制剂在防治植物病害中的应用。
[0025]进一步，上述黑附球菌发酵产物或上述生物制剂可以用于防治禾谷镰刀菌引发的小麦赤霉病。具有防治效果好等优点。
[0026]本专利技术提供一种防治小麦赤霉病的方法，包括以下步骤：将上述黑附球菌发酵产物或上述生物制剂使用在小麦。
[0027]进一步，在小麦扬花期前，将上述黑附球菌的发酵产物或上述生物制剂形成溶液后喷淋小麦。
[0028]专利技术人在研究中意外的发现，黑附球菌发酵产物或上述生物制剂可以用于植物病害防治，有效防控小麦赤霉病，可以作为田间防控小麦赤霉病的新制剂，利用黑附球菌发酵液及其制剂受环境影响小，施用方法简单，成本低廉。
附图说明
[0029]图1为本专利技术实施例1中，从玉米分离的内生菌菌株38L1的表型和遗传发育关系。图1A为38L1在PDA培养基培养5天后的正面和反面生长表型；图1B为菌株38L1的遗传发育树。
[0030]图2为本专利技术实施例3中，添加不同浓度的黑附球菌38L1发酵液制剂在PDA培养基中对禾谷镰刀菌的抑制作用的实验结果。
[0031]图3为本专利技术实施例4中，黑附球菌38L1发酵液制剂对禾谷镰刀菌孢子萌发的抑制作用的实验结果。
[0032]图4为本专利技术实施例5中，黑附球菌38L1发酵液制剂对禾谷镰刀菌引发的小麦赤霉本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种黑附球菌发酵产物，其特征在于，黑附球菌的拉丁文名称为Epicoccum nigrum，保藏编号为CGMCC No.40003。2.一种黑附球菌发酵产物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：权利要求1所述黑附球菌发酵培养，除去菌体，获得黑附球菌的发酵产物。3.根据权利要求2所述制备方法，其特征在于，发酵培养后，通过过滤和/或离心除去菌体。4.根据权利要求2或3所述制备方法，其特征在于，将权利要求1所述黑附球菌经马铃薯葡萄糖液体培养基发酵培养。5.一种生物制剂，其特征在于，包括权利要求1所述黑附球菌发酵产物和载料。6.根据权利要求5所述生物制剂，其...

【专利技术属性】
技术研发人员：王双超，郭立华，可莱，
申请(专利权)人：中国农业科学院植物保护研究所，
类型：发明
国别省市：