一种从火麻籽壳中制备大麻酰胺B的方法技术

本发明专利技术提供一种从火麻籽壳中制备大麻酰胺B的方法，所述方法包括：对火麻籽壳进行预处理得到粗粉，并制备成大孔树脂上样液；依次使用大孔吸附树脂柱以及聚酰胺等反向层析柱对大麻酰胺B进行层析分离，进行纯化处理得到所述大麻酰胺B产品。所述方法适用于大规模高效生产高质量的大麻酰胺B，具有良好的工业化生产及市场开发前景。产及市场开发前景。产及市场开发前景。

【技术实现步骤摘要】
一种从火麻籽壳中制备大麻酰胺B的方法


[0001]本专利技术属于生化分离
，涉及一种从火麻籽壳中制备大麻酰胺B的方法。

技术介绍

[0002]火麻籽是大麻科植物大麻的干燥成熟种子，药食同源，其药用始见于《神农本草经》，具有滑肠、涧燥、活血、通淋之功效。近年来，火麻仁在我国广泛用作养生食材、临床用药材等。
[0003]已报道的火麻籽大麻酰胺类化合物包括大麻酰胺B、B、C、D、E、F、G、M、N、O等10种。据报道，火麻籽大麻酰胺类化合物具有较强的清除自由基、抗氧化、抗衰老、抗AD、保肝护肝、神经保护等活性。大麻酰胺B为火麻籽大麻酰胺类物质中的一种，结构与大麻酰胺B很相似，只少一个双键，其分子式：C
34
H
32
N2O8，分子量596.1929，结构式如下图。
[0004][0005]目前，关于火麻籽大麻酰胺B的制备方法，仅有周悦芳等人的一篇基础研究文献，报道了从10.7Kg原料制备52mg大麻酰胺B的流程(周悦芳，火麻籽化学成分定性定量及其抗AD活性研究，山东大学硕士论文，2018)，具体为：原料打粉、脱脂、95％乙醇热回流提取、乙醇
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石油醚萃取、大孔树脂分离，得到12个组分，其中的组分7用聚酰胺树脂经30％、50％、70％、90％、100％的乙醇依次洗脱，其中50％醇洗部位再用RP
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MPLC柱层析分离，得到了了6个组分，其中第4个组分再用HPLC经37.5％的甲醇洗脱得到了大麻酰胺B。此文献是同时分离制备少量的多种单体化合物的目的，按照规模化制备单一的大麻酰胺B的思路，考虑制备成本、得率和耗时等因素，无需采用萃取、RP
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MPLC和HPLC等工艺步骤，纯化工艺可以进一步精简。

技术实现思路

[0006]针对现有技术中存在的问题，本专利技术提供一种从火麻籽壳中大量制备大麻酰胺B的方法，为达此目的，本专利技术采用以下技术方案：
[0007]本专利技术提供一种从火麻籽壳中制备大麻酰胺B的方法，所述方法包括以下步骤：
[0008](1)对火麻籽壳进行预处理得到粗粉，并使用有机溶剂对所述粗粉进行提取，得到提取液；
[0009](2)对步骤(1)所述提取液进行固液分离，合并分离液浓缩后，再次固液分离，得到浓缩液和底渣，将所述底渣转溶后与浓缩液合并得到大孔树脂上样液；
[0010](3)将步骤(2)得到的所述大孔树脂上样液加入到大孔吸附树脂柱中，吸附后进行清洗除杂以及洗脱得到第一大麻酰胺B溶液；
[0011](4)将步骤(3)得到的所述第一大麻酰胺B溶液浓缩后加入到反向层析柱中，吸附后进行清洗除杂以及洗脱，合并收集大麻酰胺B特征峰洗脱液，得到第二大麻酰胺B溶液；
[0012](5)将步骤(4)所述第二大麻酰胺B溶液进行浓缩、放置结晶后固液分离，将得到的固体干燥后溶解于有机溶剂后进行重结晶，所述重结晶结束后进行固液分离得到所述大麻酰胺B产品；
[0013]其中，所述重结晶的方法包括所述放置结晶得到的固体完全溶解后以10～30rpm的转速慢速搅拌，以5～15℃/h的降温速率降温至0～5℃，待有结晶析出时，静置养晶12～72h。
[0014]其中，搅拌的转速可以是12rpm、15rpm、18rpm、20rpm、22rpm、25rpm或28rpm等，降温速率可以是6℃/h、7℃/h、8℃/h、9℃/h、10℃/h、11℃/h、12℃/h、13℃/h或14℃/h等，静置养晶的时间可以是24h、36h、48h、或60h等，静置养晶的温度可以是1℃、2℃、3℃或4℃等，但并不仅限于所列举的数值，上述各数值范围内其他未列举的数值同样适用。
[0015]本专利技术中，采用的重结晶方法可使目标产物和杂质有效分离，去除杂质后得到纯度较高的目标产物。
[0016]作为本专利技术优选的技术方案，步骤(1)所述预处理的方法包括：对所述火麻籽壳依次进行粉碎、脱脂以及固液分离，得到的固体干燥后得到所述粗粉；
[0017]优选地，所述粉碎至火麻籽壳的粒度为20～40目，如25目、30目或35目等，但并不仅限于所列举的数值，该数值范围内其他未列举的数值同样适用。
[0018]作为本专利技术优选的技术方案，步骤(1)所述有机溶剂包括乙醇溶液。
[0019]优选地，所述乙醇溶液的体积分数为30～90％，如35％、40％、45％、50％、55％、60％、65％、70％、75％、80％或85％等，但并不仅限于所列举的数值，该数值范围内其他未列举的数值同样适用，优选为50～85％，进一步优选为65％。
[0020]优选地，所述乙醇溶液与所述粗粉的液固比为10～30:1，如15:1、20:1或25:1等，但并不仅限于所列举的数值，该数值范围内其他未列举的数值同样适用，优选为15～25:1，进一步优选为20:1，单位为ml/g。
[0021]优选地，所述提取的方法包括加热搅拌提取、回流提取或循环超声提取中的任意一种或至少两种的组合，所述组合典型但非限制性实例有：加热搅拌提取和回流提取的组合、回流提取和循环超声提取的组合或循环超声提取和加热搅拌提取的组合。
[0022]优选地，所述提取的次数为1～2次。
[0023]作为本专利技术优选的技术方案，所述加热搅拌和回流提取的温度为70～90℃，如70℃、75℃、80℃、85℃或90℃等，但并不仅限于所列举的数值，该数值范围内其他未列举的数值同样适用。
[0024]优选地，所述加热搅拌提取和回流提取的时间为60～150min，如75min、90min、105min、120min或135min等，但并不仅限于所列举的数值，该数值范围内其他未列举的数值同样适用。
[0025]优选地，所述循环超声提取的提取功率为100～1000W，如200W、300W、400W、500W、600W、700W、800W或900W等，但并不仅限于所列举的数值，该数值范围内其他未列举的数值
同样适用。
[0026]优选地，所述循环超声提取的温度为20～60℃，如25℃、30℃、35℃、40℃、45℃、50℃或55℃等，但并不仅限于所列举的数值，该数值范围内其他未列举的数值同样适用。
[0027]作为本专利技术优选的技术方案，步骤(2)所述浓缩为减压浓缩到浓缩液醇含量为10～20％，如11％、12％、13％、14％、15％、16％、17％、18％或19％等，并不仅限于所列举的数值，该数值范围内其他未列举的数值同样适用。
[0028]优选地，所述减压浓缩的温度为40～80℃，如45℃、50℃、55℃、60℃、65℃、70℃或75℃等，但并不仅限于所列举的数值，该数值范围内其他未列举的数值同样适用。
[0029]优选地，所述减压浓缩的真空度为0.06～0.1Mpa，如0.065Mpa、0.07Mpa、0.075Mpa、0.08Mpa、0.085Mpa、0.09Mpa或0.095Mpa等，但并不仅限于所列举的数值，该数值范本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种从火麻籽壳中制备大麻酰胺B的方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：(1)对火麻籽壳进行预处理得到粗粉，并使用有机溶剂对所述粗粉进行提取，得到提取液；(2)对步骤(1)所述提取液进行固液分离，合并分离液浓缩后，再次固液分离，得到浓缩液和底渣，将所述底渣转溶后与浓缩液合并得到大孔树脂上样液；(3)将步骤(2)得到的所述大孔树脂上样液加入到大孔吸附树脂柱中，吸附后进行清洗除杂以及洗脱得到第一大麻酰胺B溶液；(4)将步骤(3)得到的所述第一大麻酰胺B溶液浓缩后加入到反向层析柱中，吸附后进行清洗除杂以及洗脱，合并收集大麻酰胺B特征峰洗脱液，即得到第二大麻酰胺B溶液；(5)将步骤(4)所述第二大麻酰胺B溶液进行浓缩、放置结晶后固液分离，将得到的固体干燥后溶解于有机溶剂后进行重结晶，所述重结晶结束后进行固液分离得到所述大麻酰胺B产品；其中，所述重结晶的方法包括所述放置结晶得到的固体完全溶解后以10～30rpm的转速慢速搅拌，以5～15℃/h的降温速率降温至0～5℃，待有结晶析出时，静置养晶12～72h。2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(1)所述预处理的方法包括：对所述火麻籽壳依次进行粉碎、脱脂以及固液分离，得到的固体干燥后得到所述粗粉；优选地，所述粉碎至火麻籽壳的粒度为20～40目。3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(1)所述有机溶剂包括乙醇溶液；优选地，所述乙醇溶液的体积分数为30～90％，优选为50～85％，进一步优选为65％；优选地，所述乙醇溶液与所述粗粉的液固比为10～30:1，优选为15～25:1，进一步优选为20:1，单位为ml/g；优选地，所述提取的方法包括加热搅拌提取、回流提取或循环超声提取中的任意一种或至少两种的组合；优选地，所述提取的次数为1～2次。4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述加热搅拌和回流提取的温度为70～90℃；优选地，所述加热搅拌和回流提取的时间为60～150min；优选地，所述循环超声提取的提取功率为100～1000W；优选地，所述循环超声提取的温度为20～60℃。5.根据权利要求1
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4任一项所述的方法，其特征在于，步骤(2)所述浓缩为减压浓缩到浓缩液醇含量为10～20％。优选地，所述减压浓缩的温度为40～80℃；优选地，所述减压浓缩的真空度为0.06～0.1MPa；优选地，步骤(2)使用体积分数为50～90％的乙醇溶液对底渣进行转溶。6.根据权利要求1
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5任一项所述的方法，其特征在于，步骤(3)所述大孔吸附树脂包括AB
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8、D101、DA
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201、HPD
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700、HP
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20、HPD
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722、HPD
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300、HPD
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200A、HPD
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200B、HPD
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100、NKA
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9、NKA
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2、HPD400、X
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5、ADS
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21、或HPD
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850中的任意一种，优选为AB
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8或D101；优选地，步骤(3)所述大孔吸附树脂柱的高径比为5～10:1；优选地，所述大孔树脂上样液的体积为所述大孔吸附树脂柱体积的1～5倍；
优选地，步骤(3)所述清洗除杂使用的清洗液是体积分数为10～30％的乙醇溶液；优选地，所述清洗液的流速为0.2～1.5BV/h；优选地，所述清洗液的用量为2～4BV；优选地，步骤(3)所述洗脱使用的洗脱液为体积分数为40～70％的乙醇溶液；优选地，所述洗脱液的流速为0.2～1.5BV/h；优选地，所述洗脱液的用量为2～5BV。7.根据权利要求1
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6任一项所述的方法，其特征在于，步骤(4)所述反向层析柱的高径比为5～8:1；优选地，所述反向层析柱填料为聚酰胺、MCI树脂或ODS；优选地，所述使用的聚酰胺树脂的目数规格为60～100目；优选地，使用的MCI树脂的粒径规格为75...

【专利技术属性】
技术研发人员：赵兵，袁晓凡，柳旭，常坦然，徐鹏伟，赵庆生，常森林，王晓东，王丽卫，李如彦，李庆中，
申请(专利权)人：云南汉盟制药有限公司，
类型：发明
国别省市：