龙桂参杞酒指纹图谱的检测方法技术

本发明专利技术公开了龙桂参杞酒指纹图谱的检测方法，它包括步骤1、龙桂参杞酒供试品溶液的制备；步骤2、混合对照品溶液的制备：步骤3、分别精密吸取混合对照品溶液和供试品溶液注入液相色谱仪，记录色谱图；步骤4，龙桂参杞酒指纹图谱仪器导出，导入中药色谱指纹图谱相似度评价系统，选择不同批次龙桂参杞酒的色谱图中均存在的色谱峰作为共有峰；用平均值计算法生成龙桂参杞酒的对照指纹图谱；计算各共有峰的相对保留时间、相对峰面积；将龙桂参杞酒指纹图谱和混合标准品图谱进行比对，指认主要成分峰。本发明专利技术所提供的龙桂参杞酒指纹图谱，能全面，客观地表征龙桂参杞酒的质量。且检测方法具有方法简便、稳定、精密度高、重现性好等优点。点。

【技术实现步骤摘要】
龙桂参杞酒指纹图谱的检测方法
[0001]

[0002]本专利技术涉及一种中药配制酒的检测方法，具体涉及龙桂参杞酒指纹图谱的检测方法。

技术介绍

[0003]酒为百草之最，配以活血化瘀祛风散寒的食药材，酒助药性，药借酒力，扶正固本，人参甘温益气补中，增强整体免疫力，散寒理气；桂圆和枸杞补益心肝脾肾，使身体营养充分饱满，改善代谢障碍，散寒利湿，活血通络；薏苡仁、茯苓和橘皮散燥祛湿健脾；肉桂和干姜温中散寒补火助阳，温经通脉；甘草清热解毒促进血管末梢血液循环，青果抗炎止痛，山楂行气散瘀，合用后全面调理祛除体内风、寒、湿、热、毒，散寒逐湿，通经止痛，舒筋除痹，促进血液循环，除祛风寒和风湿。
[0004]龙桂参杞酒气血双补，散寒祛风，补火回阳，舒筋活血，温中止痛。适用于手臂麻木不仁，腰膝酸痛，行步脚弱，屈伸挛急，四肢不温，肌肉关节酸痛。能改善患者的免疫状态，长期服用，能增加脾胃运作机能，促进全身血液循环，具有祛风湿、清湿热、通经络、消肿止痛的作用。
[0005]目前关于龙桂参杞酒的质量检测方法较少。本专利技术采用高效液相色谱法建立龙桂参杞酒的指纹图谱检测方法，为龙桂参杞酒的成分鉴别、质量评价以及质量标准的制定具有重要的意义。

技术实现思路

[0006]专利技术目的：本专利技术的目的是解决现有技术的不足，提供一种龙桂参杞酒的指纹图谱检测方法，该检测方法可以客观、全面、准确的评价龙桂参杞酒的质量，对控制龙桂参杞酒的质量和保证临床疗效具有重要意义。
[0007]技术方案：为了实现上述目的，本专利技术采取的技术方案为：一种龙桂参杞酒指纹图谱的检测方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤1，龙桂参杞酒供试品溶液的制备：分别精密称取不同批次的龙桂参杞酒样品各10ml，过0.22μm微孔滤膜，得供试品溶液；步骤2，混合对照品溶液的制备：精密称定甘草苷、甘草酸铵对照品，置于容量瓶中，用甲醇定容至刻度，摇匀，制成混合对照品溶液；步骤3，分别精密吸取步骤1供试品溶液和步骤2对照品溶液，注入高效液相色谱仪，记录色谱图；步骤4，将步骤3中获得的龙桂参杞酒供试品溶液的指纹图谱导出，并导入中药色
谱指纹图谱相似度评价系统2004A；选择不同批次龙桂参杞酒的色谱图中均存在的色谱峰作为共有峰；用平均值计算法生成龙桂参杞酒的对照指纹图谱，计算各共有峰的相对保留时间和相对峰面积；并根据混合对照品溶液色谱图的保留时间标注对照指纹图谱中峰的化学成分；步骤5，将步骤3中获得的龙桂参杞酒指纹图谱和混合标准品图谱进行比对，指认出龙桂参杞酒中6号峰为甘草苷、11号峰为甘草酸铵。
[0008]作为优选方案，以上所述的龙桂参杞酒指纹图谱的检测方法，步骤1龙桂参杞酒供试品溶液制备方法为：取8批次的龙桂参杞酒样品各10ml，过0.22μm微孔滤膜，即得供试品溶液。
[0009]作为优选方案，以上所述的龙桂参杞酒指纹图谱的检测方法，步骤2混合对照品溶液的制备：取精密称定甘草苷、甘草酸铵对照品，置于容量瓶中，用甲醇定容至刻度，摇匀，制成含0.1167mg/mL甘草苷、0.1002mg/mL甘草酸铵组成的混合对照品溶液。作为优选方案，以上所述的龙桂参杞酒指纹图谱的检测方法，步骤3中，液相色谱条件为：色谱柱：YMC
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Pack ODS
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A，流动相：乙腈和0.1%磷酸水，梯度洗脱，二极管阵列检测器，检测波长：230nm，柱温40℃，流速0.8mL/min，进样体积：10μL，梯度洗脱程序如下表：程序时间（min）乙腈体积（%）105255325154351657536695100
[0010]作为优选方案，以上所述的龙桂参杞酒指纹图谱的检测方法，指纹谱图中共有峰14个，其保留时间分别为1号峰17.011min、2号峰21.538min、3号峰31.126min、4号峰34.785min、5号峰43.175min、6号峰46.623min、7号峰47.881min、8号峰50.433min、9号峰52.047min、10号峰55.397min、11号峰76.625min、12号峰83.208min、13号峰86.266min、14号峰91.777min，其中6号峰为甘草苷、11号峰为甘草酸铵。
[0011]作为优选方案，以上所述的龙桂参杞酒指纹图谱的检测方法，龙桂参杞酒的药味组成和配比为：肉桂、人参、薏苡仁、茯苓、大枣、青果、干姜、桂圆、枸杞、橘皮、甘草、山楂。
[0012] 作为优选方案，以上所述的龙桂参杞酒指纹图谱的检测方法，龙桂参杞酒的药味组成和配比为：肉桂4份、 人参2份 薏苡仁7份、茯苓6份、大枣2 份、青果2份、 干姜2 份、桂圆8份、 枸杞8 份、橘皮3 份、甘草2 份、山楂4份。
[0013]作为优选方案，以上所述的龙桂参杞酒指纹图谱的检测方法，龙桂参杞酒的制备方法为：取肉桂、人参、薏苡仁、茯苓、大枣、青果、干姜、桂圆、枸杞、橘皮、甘草和山楂，加入总药材10~100倍体积量的食用乙醇或蒸馏酒（40
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65%），浸泡15
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20天、多层纱布和脱脂棉粗滤，压榨合并滤液（滤渣用纯水清洗），沉淀后过滤、用食用酒精（或纯水）和糖粉调配（35度）、沉淀澄清、上清液离心后膜过滤、灌装既得。
[0014]指纹图谱检测条件的优化：
1、在样品溶液的制备优化方面本专利技术通过对不同制备方法（0.22μm微孔滤膜过滤、甲醇萃取、正丁醇萃取）进行实验比较，结果发现0.22μm微孔滤膜过滤所得的谱图差成分比较全面，方法简便，分离度良好，故采用滤膜过滤的方法。
[0015]2、在色谱条件进行优化方面本专利技术采用二极管阵列检测器对检测波长进行考察，提取205nm、230nm、254nm、280nm处的色谱图，发现检测波长为230nm时，色谱图所包含的信息量最全面且基线平稳，故选230nm为检测波长；本专利技术对流速（1mL/min、0.9mL/min、0.8mL/min、0.6mL/min）进行筛选，因龙桂参杞酒中的成分中多存在同分异构体及其它极性极为相似的成分，高流速下无法将其分开，在低流速下分离效果较好，最终选择在流速为0.8mL/min梯度条件下将极性相似的物质分开。
[0016]本专利技术对柱温（30
°
C、34
°
C、38
°
C、40
°
C、42
°
C）进行筛选。结果发现40
°
C柱温下色谱图响应强度较高，故最终选择柱温40
°
C。
[0017]本专利技术比较了甲醇
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水，乙腈
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水，乙腈
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0.1%甲酸，乙腈和0.05%磷酸水，乙腈
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0.1%磷酸水5个不同洗脱系统在不同梯度下的洗脱效果。结果发现以乙腈和0.1%磷酸水为流动相时，龙桂参杞酒中各成分分离效果较好，故最终选定以乙腈和0.1%磷酸水为流动相。
[0018]在确定最佳流动性组成后，本专利技术通过大量实验筛选本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种龙桂参杞酒指纹图谱的检测方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤1，龙桂参杞酒供试品溶液的制备：分别精密称取不同批次的龙桂参杞酒样品，过0.22μm微孔滤膜，得供试品溶液；步骤2，混合对照品溶液的制备：精密称定甘草苷、甘草酸铵对照品，置于容量瓶中，用甲醇定容至刻度，摇匀，制成混合对照品溶液；步骤3，分别精密吸取步骤1供试品溶液和步骤2对照品溶液，注入高效液相色谱仪，记录色谱图；步骤4，将步骤3中获得的龙桂参杞酒供试品溶液的指纹图谱导出，并导入中药色谱指纹图谱相似度评价系统2004A；选择不同批次龙桂参杞酒的色谱图中均存在的色谱峰作为共有峰；用平均值计算法生成龙桂参杞酒的对照指纹图谱，计算各共有峰的相对保留时间和相对峰面积；并根据混合对照品溶液色谱图的保留时间标注对照指纹图谱中峰的化学成分；步骤5，将步骤3中获得的龙桂参杞酒指纹图谱和混合标准品图谱进行比对，指认出龙桂参杞酒中6号峰为甘草苷、11号峰为甘草酸铵。2.根据权利要求1所述的龙桂参杞酒指纹图谱的检测方法，其特征在于，步骤1龙桂参杞酒供试品溶液制备方法为：取8批次的龙桂参杞酒样品10ml，过0.22μm微孔滤膜，得供试品溶液。3.根据权利要求1所述的龙桂参杞酒指纹图谱的检测方法，其特征在于，步骤2混合对照品溶液的制备：取精密称定甘草苷、甘草酸铵对照品，置于容量瓶中，用甲醇定容至刻度，摇匀，制成含0.1167mg/mL甘草苷、0.1002mg/mL甘草酸铵组成的混合对照品溶液。4.根据权利要求1所述的龙桂参杞酒指纹图谱的检测方法，其特征在于，步骤3中，液相色谱条件为：色谱柱：YMC
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Pack ODS
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A，流动相：乙腈和0.1%磷酸水，梯度洗脱，二极管阵列检测器，检测波长：230nm，柱温40℃，流速0...

【专利技术属性】
技术研发人员：金俊杰，李国维，刘爱国，胡玉凯，段莉娟，
申请(专利权)人：江苏海昇药业有限公司，
类型：发明
国别省市：