长白山白眉蝮蛇蛇毒的反相HPLC指纹图谱检测方法技术

本发明专利技术属于医药技术领域，具体涉及长白山白眉蝮蛇蛇毒指纹图谱的检测方法，其步骤：(1)供试品和对照品溶液制备：分别取长白山白眉蝮蛇蛇毒供试品和长白山白眉蝮蛇蛇毒对照品，用溶剂溶解并稀释，离心，取上清液，过滤；(2)指纹图谱检测：分别取步骤(1)所得供试品和对照品溶液注入液相色谱仪，记录色谱图，采用中药色谱指纹图谱相似度评价系统计算相似度。本发明专利技术长白山白眉蝮蛇蛇毒指纹图谱的检测方法，具有操作性强、重现性好、专属性高，该方法可作为长白山白眉蝮蛇蛇毒的检测鉴别的标准方法，能提供更全面的长白山白眉蝮蛇蛇毒的质量信息。供更全面的长白山白眉蝮蛇蛇毒的质量信息。供更全面的长白山白眉蝮蛇蛇毒的质量信息。

【技术实现步骤摘要】
长白山白眉蝮蛇蛇毒的反相HPLC指纹图谱检测方法


[0001]本专利技术属于医药
，具体涉及一种长白山白眉蝮蛇蛇毒指纹图谱的检测方法。

技术介绍

[0002]长白山白眉蝮蛇蛇毒系自长白山白眉蝮蛇[Agkistrodon，halys(pallas)]腮腺中，以挤压刺激的方法采集蛇毒毒液，并经冷冻干燥制得，主要成份是蛋白、多肽及酶类等生物活性物质，其本质是由氨基酸所组成的蛋白质。蛇毒成分十分复杂，不同的蛇种、亚种、甚至同一种蛇因季节、产地、性别、蛇龄等不同所分泌的毒液，其毒性成分仍存在一定的差异。
[0003]指纹图谱源于指纹鉴定学，常用于中药研究，是一种综合的、宏观的和可量化的鉴别手段。它是建立在中药化学成分系统研究的基础上，主要用于评价中药材以及中药制剂半成品质量的真实性、优良性和稳定性，其基本属性是“整体性”和“模糊性”。“整体性”是指完整地比较色谱的特征“面貌”；“模糊性”强调的是对照品与待测样品指纹图谱的相似性。
[0004]目前蛇毒指纹图谱检测方法主要有RP
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HPLC法、凝胶色谱法、毛细管电泳法本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.长白山白眉蝮蛇蛇毒的指纹图谱检测方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤：(1)供试品和对照品溶液的制备：分别取长白山白眉蝮蛇蛇毒供试品和长白山白眉蝮蛇蛇毒对照品，用溶剂溶解并稀释，离心，取上清液，过滤，即得供试品和对照品溶液；(2)指纹图谱检测：取步骤(1)所得供试品和对照品溶液注入液相色谱仪，记录色谱图，采用中药色谱指纹图谱相似度评价系统计算相似度，其中所述色谱条件包括：色谱柱用辛烷基硅烷键合硅胶或十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；优选辛烷基硅烷键合硅胶色谱柱；流动相：A
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0.1％TFA水溶液、B
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0.1％TFA乙腈溶液，或A
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0.1％TFA水溶液、B
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乙腈；优选A
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0.1％TFA水溶液、B
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0.1％TFA乙腈溶液；进行梯度洗脱。2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤(1)进一步包括：所述溶剂为水或0.1％TFA溶液，优选水；溶解并稀释制成每1ml中含1～30mg、优选2～20mg、最佳为10mg的供试品或对照品的溶液。3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤(1)进一步包括：离心条件为3000～10000rpm、优选3000rpm；8～16℃、优选8℃；离心15～20min、优选15min。4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤(2)中洗脱梯度包括：10～90％B 60min、或10～70％B 60min、或10～70％B 45min、或10～60％B 45min、或10～70％B 30min、或10～70％B 43min、或10～70％B 47min、或9～69％45min、或11～71％45min；优选10～70％B 45min。5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤(2)色谱条件进一步包括：检测波长为214或280nm，优选280nm。6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤(2)色谱条件进一步包括：所述辛烷基硅烷键合硅胶色谱柱包括YMC
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C8柱、安捷伦C8柱、或K...

【专利技术属性】
技术研发人员：王艳秋，靳美霞，杜宏明，聂丽，
申请(专利权)人：锦州奥鸿药业有限责任公司，
类型：发明
国别省市：