荷叶清轻茶指纹图谱的检测方法技术

本发明专利技术公开了荷叶清轻茶指纹图谱的检测方法，它包括步骤1、荷叶清轻茶供试品溶液的制备；步骤2、混合对照品溶液的制备：步骤3、分别精密吸取混合对照品溶液和供试品溶液注入液相色谱仪，记录色谱图；步骤4，荷叶清轻茶指纹图谱仪器导出，导入中药色谱指纹图谱相似度评价系统，选择不同批次荷叶清轻茶的色谱图中均存在的色谱峰作为共有峰；用平均值计算法生成荷叶清轻茶的对照指纹图谱；计算各共有峰的相对保留时间、相对峰面积；将荷叶清轻茶指纹图谱和混合标准品图谱进行比对，指认主要成分峰。本发明专利技术所提供的荷叶清轻茶指纹图谱，能全面，客观地表征荷叶清轻茶的质量。且检测方法具有方法简便、稳定、精密度高、重现性好等优点。点。点。

【技术实现步骤摘要】
荷叶清轻茶指纹图谱的检测方法


[0001]本专利技术涉及一种中药代用茶的检测方法，具体涉及荷叶清轻茶指纹图谱的检测方法。

技术介绍

[0002]随着人们生活水平的提高，生活方式的改变，肥胖人群明显增加。肥胖是以体内脂肪积聚过多为主要特征的一种全球广泛流行的独立性慢性疾病。它不仅影响人的外在形象美，而且肥胖与许多慢性疾病如：糖尿病、高血压、心脑血管等密切相关。荷叶清轻茶将药食同源药材的独特口感和食疗功能浓缩于茶包之中，让饮食作息不规律的人，也能够通过给自己泡上一杯功能代用茶，润肠清脂，生活健康。
[0003]从中医的角度，荷叶清轻茶以清热和清脂为目的，采取的方法则为去水和发汗，以清热泻火药材为主，辅以化湿、行气消积药物配伍来润肠清脂。荷叶具有清热解暑、升发清阳、凉血止血之功效，具有调脂减肥、抗氧化抗衰老、抑菌作用；决明子清肝明目，润肠通便；山楂能健脾、化湿、消暑，有温中行气，消食之功；桑叶疏散风热，清肺润燥，平肝明目，凉血止血；莱菔子消食除胀，降气化痰；火麻仁用于血虚津亏，肠燥便秘，有润肠通便之效；日常饮用具有清热泻火，润肠通便，降火气，补肝益肾，消肿利尿，养肝明目等功效。
[0004]目前，关于荷叶清轻茶的质量检测方法较少。本专利技术采用高效液相色谱法建立荷叶清轻茶的指纹图谱检测方法，为荷叶清轻茶的成分鉴别、质量评价以及质量标准的制定具有重要的意义。

技术实现思路

[0005]专利技术目的：本专利技术的目的是解决现有技术的不足，提供一种荷叶清轻茶的指纹图谱检测方法，该检测方法可以客观、全面、准确的评价荷叶清轻茶的质量，对控制荷叶清轻茶的质量和保证临床疗效具有重要意义。
[0006]技术方案：为了实现上述目的，本专利技术采取的技术方案为：
[0007]一种荷叶清轻茶指纹图谱的检测方法，其包括以下步骤：
[0008]步骤1，荷叶清轻茶供试品溶液的制备：
[0009]分别精密称取不同批次的荷叶清轻茶样品，打粉，置于圆底瓶中，加甲醇溶液，回流提取，过滤，滤液置于容量瓶中，加甲醇定容，过0.45μm微孔滤膜，得供试品溶液；
[0010]步骤2，混合对照品溶液的制备：
[0011]精密称定绿原酸、大黄酚对照品，置于容量瓶中，用甲醇定容至刻度，摇匀，制成混合对照品溶液；
[0012]步骤3，分别精密吸取步骤1供试品溶液和步骤2对照品溶液，注入高效液相色谱仪，记录色谱图；
[0013]步骤4，将步骤3中获得的荷叶清轻茶供试品溶液的指纹图谱导出，并导入中药色谱指纹图谱相似度评价系统2012A；选择不同批次荷叶清轻茶的色谱图中均存在的色谱峰
作为共有峰；用平均值计算法生成荷叶清轻茶的对照指纹图谱，计算各共有峰的相对保留时间和相对峰面积；并根据混合对照品溶液色谱图的保留时间标注对照指纹图谱中峰的化学成分；
[0014]步骤5，将步骤3中获得的荷叶清轻茶指纹图谱和混合标准品图谱进行比对，指认出荷叶清轻茶中1号峰为绿原酸、13号峰为大黄酚。
[0015]作为优选方案，以上所述的荷叶清轻茶指纹图谱的检测方法，步骤1荷叶清轻茶供试品溶液制备方法为：取8批次的荷叶清轻茶样品粉末5～50g置100～1000mL圆底瓶中，加甲醇溶液50～500mL，超声提取30～60min，过滤，滤液置于100～500mL容量瓶中，加甲醇定容，过0.45μm微孔滤膜，得供试品溶液。
[0016]作为优选方案，以上所述的荷叶清轻茶指纹图谱的检测方法，步骤2混合对照品溶液的制备：取精密称定绿原酸、大黄酚对照品，置于容量瓶中，用甲醇定容至刻度，摇匀，制成含0.1019mg/mL绿原酸、0.1048mg/mL大黄酚组成的混合对照品溶液。
[0017]作为优选方案，以上所述的荷叶清轻茶指纹图谱的检测方法，步骤3中，液相色谱条件为：色谱柱：Purospher STAR LP RP
‑
18endcapped，流动相：乙腈和0.1％磷酸水，梯度洗脱，二极管阵列检测器，检测波长：245nm，柱温30℃，流速1.0mL/min，进样体积：10μL，梯度洗脱程序如下表：
[0018]程序时间(min)乙腈体积(％)1052105318134118235125356190100
[0019]作为优选方案，以上所述的荷叶清轻茶指纹图谱的检测方法，指纹谱图中共有峰13个。
[0020]所述的荷叶清轻茶指纹图谱的检测方法，荷叶清轻茶的药味组成和配比为：荷叶8～16份、决明子7～14份、山楂7～14份、桑叶4～87份、莱菔子5～10份火麻仁4～8份、桑椹5～10份。
[0021]作为优选方案，以上所述的荷叶清轻茶指纹图谱的检测方法，荷叶清轻茶的药味组成和配比为：荷叶8份、决明子7份、山楂7份、桑叶4份、莱菔子5份、火麻仁4份、桑椹5份。
[0022]指纹图谱检测条件的优化：
[0023]1、在样品溶液的制备优化方面
[0024]本专利技术通过对不同提取方法(超声、回流、渗漉等)及不同提取溶剂(甲醇、水、50％乙醇水溶液、95％乙醇、无水乙醇)进行实验比较，结果发现超声提取所得的谱图差成分比较全面，提取效率高，分离度良好，故采用超声提取的方法；对提取溶剂的考察中发现甲醇提取物色谱图信息量最多，成分含量最高，所以选用甲醇进行提取。
[0025]2、在色谱条件进行优化方面
[0026]本专利技术采用二极管阵列检测器对检测波长进行考察，提取205nm、225nm、245nm、280nm处的色谱图，发现检测波长为245nm时，色谱图所包含的信息量最全面且基线平稳，故
选245nm为检测波长。
[0027]本专利技术对流速(1mL/min、0.9mL/min、0.8mL/min、0.6mL/min)进行筛选，因荷叶清轻茶中的成分在1mL/min的流速下峰形较好且分离效果较好，最终选择在流速为1.0mL/min梯度条件。
[0028]本专利技术比较了甲醇
‑
水，乙腈
‑
水，乙腈
‑
0.1％甲酸，乙腈和0.05％磷酸水，乙腈
‑
0.1％磷酸水5个不同洗脱系统在不同梯度下的洗脱效果。结果发现以乙腈和0.1％磷酸水为流动相时，荷叶清轻茶中各成分分离效果较好，故最终选定以乙腈和0.1％磷酸水为流动相。
[0029]在确定最佳流动性组成后，本专利技术通过大量实验筛选最佳的梯度洗脱程序，实验发现，当采用0～10min乙腈体积5％～5％；10～18min乙腈体积5％～13％；18～118min乙腈体积13％～23％；118～125min乙腈体积23％～35％；125～190min乙腈体积35％～100％时可实现指纹图谱中各色谱峰的良好分离度。
[0030]有益效果：
[0031]1、本专利技术根据荷叶清轻茶中所含的活性成分的结构性质特点，通过大量实验筛选出最佳的流动相组成，梯度洗脱程序、流速，检测波长、色谱柱，柱温等分析条件，经多次实验验证表明。
[00本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种荷叶清轻茶指纹图谱的检测方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤1，荷叶清轻茶供试品溶液的制备：分别称取不同批次的荷叶清轻茶样品，打粉后置于圆底瓶中，加甲醇溶液，超声提取，过滤，滤液置于容量瓶中，加甲醇定容，过0.45μm微孔滤膜，得供试品溶液；步骤2，混合对照品溶液的制备：精密称定绿原酸、大黄酚对照品，置于容量瓶中，用甲醇定容至刻度，摇匀，制成混合对照品溶液；步骤3，分别精密吸取步骤1供试品溶液和步骤2对照品溶液，注入高效液相色谱仪，记录色谱图；步骤4，将步骤3中获得的荷叶清轻茶供试品溶液的指纹图谱导出，并导入中药色谱指纹图谱相似度评价系统2012A；选择不同批次荷叶清轻茶的色谱图中均存在的色谱峰作为共有峰；用平均值计算法生成荷叶清轻茶的对照指纹图谱，计算各共有峰的相对保留时间和相对峰面积；并根据混合对照品溶液色谱图的保留时间标注对照指纹图谱中峰的化学成分；步骤5，将步骤3中获得的荷叶清轻茶指纹图谱和混合标准品图谱进行比对，指认出荷叶清轻茶中1号峰为绿原酸、13号峰为大黄酚。2.根据权利要求1所述的荷叶清轻茶指纹图谱的检测方法，其特征在于，步骤1荷叶清轻茶供试品溶液制备方法为：取8批次的荷叶清轻茶样品5～50g，打粉，置圆底烧瓶中，超声提取，过滤，滤液置于100～1000mL容量瓶中，加甲醇定容，过0.45μm微孔滤膜，得供试品溶液。3.根据权利要求1所述的荷叶清轻茶指纹图谱的检测方法，其特征在于，步骤2混合对照品溶液的制备：取精密称定绿原酸、大黄酚对照品，置于容量瓶中，用甲醇定容至刻度，摇匀，制成含0.1019mg/mL绿原酸、0.1048mg/mL大黄酚...

【专利技术属性】
技术研发人员：金俊杰，李国维，刘爱国，
申请(专利权)人：江苏海昇药业有限公司，
类型：发明
国别省市：