用于检测牛羊肉中氯霉素的检测卡以及检测氯霉素的方法技术

本发明专利技术提供了一种用于检测牛羊肉中氯霉素的检测卡以及检测氯霉素的方法。所提供的检测卡包括样品垫、结合垫、反应膜、吸水垫和底板，所述底板上依次粘贴有样品垫、结合垫、反应膜和吸水垫，所述结合垫上含有胶体金标记的抗体，所述胶体金标记的抗体具有SEQ ID NO:1、2和3所示的HCDR序列，以及SEQ ID NO:4、5和6所示的LCDR序列；所述反应膜为硝酸纤维素膜，所述硝酸纤维素膜上具有检测线(T)和质控线(C)，所述检测线包被有氯霉素

【技术实现步骤摘要】
用于检测牛羊肉中氯霉素的检测卡以及检测氯霉素的方法


[0001]本专利技术属于生物技术检测领域，具体而言，本专利技术涉及一种用于检测牛羊肉中氯霉素的检测卡以及检测氯霉素的方法。

技术介绍

[0002]随着氯霉素药物在食品动物中的广泛应用，其残留问题已引起广泛关注。氯霉素药物残留能引起人的再生障碍性贫血，粒细胞缺乏症等疾病，除了其毒副作用及对人体的直接危害外，动物性食品中残留的氯霉素还容易诱导人类致病菌产生耐药性，从而不利于该类药物对人类疾病的治疗，欧美等发达国家已相继禁止或严格禁止使用。随着氯霉素药物在食品动物中的广泛应用，其残留问题已引起广泛关注。氯霉素药物残留能引起人的再生障碍性贫血，粒细胞缺乏症等疾病，除了其毒副作用及对人体的直接危害外，动物性食品中残留的氯霉素还容易诱导人类致病菌产生耐药性，从而不利于该类药物对人类疾病的治疗，欧美等发达国家已相继禁止或严格禁止使用。
[0003]目前，关于畜禽中氯霉素的检测标准NY/T 3409
‑
2018畜禽肉中氯霉素的测定和ELISA检测方法，其中，标准的检测操作方法比较复杂，检测时间长，不适用于工厂化大批量生产检测。
[0004]针对牛羊肉中氯霉素的检测还需要进一步改进。

技术实现思路

[0005]本专利技术的目的是提供了一种快速检测牛羊肉中氯霉素的检测卡以及检测牛羊肉中氯霉素的方法，所提供的检测卡简化了操作流程，缩短检测时间，提高了检测速度和准确率。
[0006]具体而言，本专利技术提供了如下技术方案：
>[0007]本专利技术的第一方面提供了一种用于检测牛羊肉中氯霉素的检测卡，包括：
[0008]样品垫、结合垫、反应膜、吸水垫和底板，所述底板上依次粘贴有样品垫、结合垫、反应膜和吸水垫，
[0009]所述结合垫上含有胶体金标记的抗体，所述胶体金标记的抗体具有SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2和SEQ ID NO:3所示的HCDR序列，以及SEQ ID NO:4、SEQ ID NO:5和SEQ ID NO:6所示的LCDR序列；
[0010]所述反应膜为硝酸纤维素膜，所述硝酸纤维素膜上具有检测线(T)和质控线(C)，所述检测线包被有氯霉素
‑
载体蛋白偶联物，所述质控线包被有羊抗鼠抗抗体。
[0011]根据本专利技术的实施例，以上提供的用于检测牛羊肉中氯霉素的检测卡可以进一步包括如下技术特征：
[0012]进一步地，所述氯霉素
‑
载体蛋白偶联物通过氯霉素与载体蛋白偶联获得。
[0013]进一步地，所述载体蛋白选自牛血清白蛋白、卵清蛋白、人血清白蛋白中的至少一种。
[0014]本专利技术的第二方面提供了一种利用上述所述的检测卡检测氯霉素的方法，包括：
[0015]将待测样本加入到上述所述的检测卡的样品垫上进行检测的步骤。
[0016]根据本专利技术的实施例，以上所述的检测卡检测氯霉素的方法还可以进一步包括如下技术特征：
[0017]进一步地，所述待测样本选自猪肉、鸡肉、牛肉、羊肉、鱼肉中的至少一种。
[0018]进一步地，所述方法包括：预先对待测样本进行前处理，所述前处理包括：
[0019]将所述待测样本和样本提取液混合，提取所述待测样本中的氯霉素物质；
[0020]对所述氯霉素物质进行浓缩，复溶后的液体加入到检测卡的样本垫上进行检测。
[0021]进一步地，所述方法进一步包括：当检测线(T)显色亮度大于质控线(C)，即仪器读值R＞1.1时，表明待测样本中氯霉素的含量低于检出限，结果判定为阴性；
[0022]当检测线(T)显色亮度小于质控线(C)，即仪器读值R＜0.9时，表明待测样本中氯霉素的含量高于检出限，结果判定为阳性；
[0023]当检测线(T)显色亮度等于质控线(C)，即仪器读值0.9≤R≤1.1时，表明待测样本中氯霉素的含量等于检出限，结果判定为弱阳性；
[0024]若未出现质控线(C)，表明不正确的操作过程或检测条已变质失效，结果判定为无效。
[0025]进一步地，所述方法对于氯霉素的检出限为0.1ppb。
[0026]本专利技术所取得的有益效果为：
[0027]本专利技术简化了操作流程，缩短检测时间，提高了检测速度和准确率。该检测卡检测下限(0.1ppb)，样品可以直接检测，比传统的标准和ELISA方法更快速、高效、简便易操作。
附图说明
[0028]图1是根据本专利技术的实施例提供的用于检测牛羊肉中氯霉素的检测卡的结构示意图。
具体实施方式
[0029]下面详细描述本专利技术的实施例，需要说明的是，这些实施例是示例性的，旨在用于解释本专利技术，而不能理解为对本专利技术的限制。同时对本文中的一些术语进行解释和说明，这些解释和说明也用于帮助本领域技术人员理解。
[0030]本专利技术提供了一种用于检测牛羊肉中氯霉素的检测卡，如图1所示，样品垫1、结合垫2、反应膜3、吸水垫4和底板5，所述底板上依次粘贴有样品垫、结合垫、反应膜和吸水垫，
[0031]所述结合垫上含有胶体金标记的抗体，所述胶体金标记的抗体具有SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2和SEQ ID NO:3所示的HCDR序列，以及SEQ ID NO:4、SEQ ID NO:5和SEQ ID NO:6所示的LCDR序列；
[0032]所述反应膜为硝酸纤维素膜，所述硝酸纤维素膜上具有检测线(T，图1中6所示)和质控线(C，图1中7所示)，所述检测线包被有氯霉素
‑
载体蛋白偶联物，所述质控线包被有羊抗鼠抗抗体。
[0033]用来检测牛羊肉中氯霉素的检测卡主要成分包括吸水垫、反应膜、质控线、检测线、结合垫、样品垫和底板。其中底板可以为PVC材质。所提供的检测卡可以用来实现氯霉素
的检测，其检测应用了竞争抑制免疫层析的原理。样本液中的氯霉素在流动过程中与胶体金标记的特异性单克隆抗体相结合，抑制了抗体和硝酸纤维素膜检测线(T)上氯霉素
·
蛋白偶联物的结合。如果样本液中氯霉素含量大于检出限时，检测线(T)比质控线(C)显色浅或不显色，结果为阳性；一样深为弱阳性；反之，检测线(T)比质控线(C)显色深，结果为阴性。
[0034]应用该检测卡进行检测的过程一般为：按照说明书提供的样本前处理方法，对猪肉、鸡肉、牛肉、羊肉、鱼肉等组织样本进行前处理，处理后的样本上清液点卡进行测试。正常阴性样本的T线颜色明显深于C线。用仪器测试T/C信号值要大于3.0。为了验证试纸条的检出性能，我们对阴性的组织样本进行加标处理(空白组织样本加入一定量的氯霉素标准品)，然后根据说明书的前处理方法进行处理，处理后的上清液进行点卡测试。测试的结果为：随着氯霉素标准品加标量的增加，T线颜色越来越浅，T/C信号值也越来越低。例如加标浓度分别为0ppb、0.05ppb、0.1ppb、0.15ppb、0.2ppb、0.4ppb(ppb＝ng/g)，试纸条T线本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种用于检测牛羊肉中氯霉素的检测卡，其特征在于，包括：样品垫、结合垫、反应膜、吸水垫和底板，所述底板上依次粘贴有样品垫、结合垫、反应膜和吸水垫，所述结合垫上含有胶体金标记的抗体，所述胶体金标记的抗体具有SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2和SEQ ID NO:3所示的HCDR序列，以及SEQ ID NO:4、SEQ ID NO:5和SEQ ID NO:6所示的LCDR序列；所述反应膜为硝酸纤维素膜，所述硝酸纤维素膜上具有检测线(T)和质控线(C)，所述检测线包被有氯霉素
‑
载体蛋白偶联物，所述质控线包被有羊抗鼠抗抗体。2.根据权利要求1所述的检测卡，其特征在于，所述氯霉素
‑
载体蛋白偶联物通过氯霉素与载体蛋白偶联获得。3.根据权利要求1所述的检测卡，其特征在于，所述载体蛋白选自牛血清白蛋白、卵清蛋白、人血清白蛋白中的至少一种。4.一种试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括权利要求1～3中任一项所述的检测卡。5.一种利用权利要求1～3中任一项所述的检测卡或者利用权利要求4所述的试剂盒检测...

【专利技术属性】
技术研发人员：闫立婷，常宏志，王芳，
申请(专利权)人：北京雁栖月盛斋清真食品有限公司，
类型：发明
国别省市：