一种包被液及含有该包被液的红细胞膜包被液及其应用制造技术

本发明专利技术属于免疫检测技术领域，具体地说，涉及一种包被液及含有该包被液的红细胞膜包被液及其应用。本发明专利技术所述的包被液包括如下组分：0.001M的PB、0.005%

【技术实现步骤摘要】
一种包被液及含有该包被液的红细胞膜包被液及其应用


[0001]本专利技术属于免疫检测
，具体地说，涉及一种包被液及含有该包被液的红细胞膜包被液及其应用。

技术介绍

[0002]血型是指血液成分（包括红细胞、白细胞、血小板及血浆蛋白）表面的抗原类型，通常所说的血型是指红细胞膜上特异性抗原类型，而与临床关系最密切的是红细胞ABO血型系统及Rh血型系统，血凝试验、微柱凝胶试验已广泛应用于临床血型鉴定及输血科交叉配血等。近年主要有流式细胞技术、酶联免疫吸附试验、胶体金凝集技术，其中血凝试验是指抗体和红细胞在液体介质中发生肉眼可见的凝集反应，主要分为玻片法、试管法、全自动微板法。但目前的几种技术均属于反定性产品，检测结果需要进行反向推断才能判定结果，且操作较为繁琐，检测过程干扰因素较多。流式细胞术、酶联免疫检测需要有专业人员进行操作，且需要特殊设备进行判读。此外，传统的检测方法使用对血液样品要求较高，样本不能出现溶血，因溶血样本会干扰检测结果，导致错误判读。
[0003]传统的血型检测试剂盒都包括绘有T线（检测线）和C线（质控线）的硝酸纤维素膜（NC膜），由于红细胞溶血或保存不当会引起红细胞血型抗原性降低、导致新鲜红细胞保存期短，因此NC膜一般采用红细胞膜包被液进行包被、固定。红细胞膜包被液通常由红细胞膜和包被液组成，常规的包被液组分为：0.01M的PB、质量体积百分浓度为0.01%
‑
0.05%的蔗糖以及质量体积百分浓度为0.01%
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0.015%的PC300，pH值为7.5。
[0004]然而，在使用中发现，采用上述常规包被液制得的红细胞膜包被液包被、固定的NC膜稳定性不好，检测灵敏度不高。因此，开发一种能使包被、固定的NC膜具有更好稳定性和检测灵敏度的包被液具有重要的临床意义。
[0005]有鉴于此，特提出本专利技术。

技术实现思路

[0006]本专利技术的目的是为了解决上述问题，提供一种能使包被、固定的血型检测试剂盒上的NC膜具有更好稳定性和检测灵敏度的包被液。
[0007]为实现本专利技术的目的，本专利技术采用如下技术方案：一种包被液，其中，所述的包被液包括如下组分：0.001M的PB、0.005%
‑
0.01%的海藻糖、0.09%
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0.15%的SDS、0.01%
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0.05%的甲醇、0.03%
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0.09%的蔗糖和0.01%
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0.015%的PC300。
[0008]本专利技术所提供的包被液对红细胞膜具有较好的溶解性，且与红细胞膜制得的红细胞膜包被液对NC膜的固化效果好，同时，固化的NC膜具有较好的稳定性，在37℃条件下加速3个月仍表现出较好的稳定性，检测灵敏度高。
[0009]本专利技术中，百分比为质量体积百分浓度，如0.005%
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0.01%的海藻糖是指100ml包被液中含有0.005
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0.01g海藻糖。
[0010]进一步地，所述的包被液的pH值为7.0
‑
7.5。
[0011]本专利技术还提供上述包被液的制备方法，其中，所述的制备方法为：先按所述组分进行配制，再调节pH值至7.0
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7.5，即得所述的包被液。
[0012]本专利技术的包被液制备过程简单，只需按所述组分进行配制再调节pH值即可得到。
[0013]调节pH值时用本领域常用的pH调节剂即可，如可用6M的NaOH溶液和盐酸进行调节。
[0014]本专利技术还提供一种红细胞膜包被液，其中，所述的红细胞膜包被液包括上述的包被液。
[0015]进一步地，所述的红细胞膜包被液还包括红细胞膜，所述的红细胞膜为红细胞膜碎片。
[0016]本专利技术提供的包被液可进一步与红细胞膜得到红细胞膜包被液。所述的红细胞膜可为本领域常用的红细胞膜，如A型血的红细胞膜、B型血的红细胞膜。作为一种优选方式，本专利技术所述的红细胞膜为红细胞膜碎片，如A型血的红细胞膜碎片、B型血的红细胞膜碎片。采用红细胞膜碎片与本专利技术的包被液得到的红细胞膜包被液对NC膜的固化效果好，同时，固化的NC膜具有较好的稳定性，在37℃条件下加速3个月仍表现出较好的稳定性，检测灵敏度高。
[0017]本专利技术中，所述的红细胞膜碎片采用本领域已知的方法制备得到，如可按照CN113016775A中实施例1的方法制备得到。
[0018]进一步地，所述的红细胞膜碎片与包被液的质量体积比为10：1mg/ml。
[0019]本专利技术还提供一种所述的红细胞膜包被液的制备方法，其中，所述的制备方法包括如下步骤：S1、复融：将红细胞膜碎片加至包被液中，复融，得到复融的红细胞膜包被液；S2、超声破碎处理：将复融的红细胞膜包被液进行超声破碎处理，得到超声破碎处理后的红细胞膜包被液；S3、定容：将超声破碎处理后的红细胞膜包被液定容，即得所述的红细胞膜包被液。
[0020]进一步地，步骤S2中，超声破碎处理时，超声功率为200W，每超声5S停5S，超声破碎总时间为30min。
[0021]进一步地，步骤S1中，加入的红细胞膜碎片的质量与包被液的体积比为10：1mg/ml。
[0022]进一步地，步骤S3中，所述的定容为定容至2mg/ml。
[0023]本专利技术还提供一种血型检测试剂盒，包括绘有T线和C线的NC膜，其中，T线位置包被了本专利技术所述的红细胞膜包被液。
[0024]本专利技术所提供的血型检测试剂盒中，其NC膜的T线位置包被了本专利技术的红细胞膜包被液，该红细胞膜包被液对NC膜的固化效果好，同时，固化的NC膜具有较好的稳定性，在37℃条件下加速3个月仍表现出较好的稳定性，检测灵敏度高。
[0025]进一步地，C线位置包被了0.5
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1mg/ml的羊抗鼠IgM。
[0026]本专利技术中，T线与C线的距离为5mm。
[0027]本专利技术所提供的血型检测试剂盒可参照本领域常规的方法制备得到。
[0028]与现有技术相比，本专利技术具有如下优点：（1）本专利技术的包被液对红细胞膜碎片具有较好的溶解性，且固化效果好；（2）采用本专利技术得到的红细胞膜包被液固化的NC膜具有较好的稳定性，在37℃条件下加速3个月仍表现出较好的稳定性，解决了由于红细胞溶血或保存不当引起的红细胞血型抗原性降低，导致新鲜红细胞保存期短的问题，试剂盒更易保存，使用方便；（3）采用本专利技术制备得到的红细胞膜包被液固化的红细胞膜，检测灵敏度高，采用胶体金标记，检测准确度高、速度快。
附图说明
[0029]图1为抗体A检测包被液1A膜组、包被液2A膜组、包被液1B膜组和包被液2B膜组血型检测试剂盒的结果图；图2为抗体B检测包被液1B膜组、包被液2B膜组、包被液1A膜组和包被液2A膜组血型检测试剂盒的结果图；图3为抗体A检测37℃下加速1个月、2个月、3个月的包被液2A膜组和包被液1A膜组的结果图；图4为抗体B检测37℃下加速1个本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种包被液，其特征在于，所述的包被液包括如下组分：0.001M的PB、0.005%
‑
0.01%的海藻糖、0.09%
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0.15%的SDS、0.01%
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0.05%的甲醇、0.03%
‑
0.09%的蔗糖和0.01%
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0.015%的PC300。2.根据权利要求1所述的包被液，其特征在于，所述的包被液的pH值为7
‑
7.5。3.一种权利要求1或2所述的包被液的制备方法，其特征在于，所述的制备方法为：先按所述组分进行配制，再调节pH值至7
‑
7.5，即得所述的包被液。4.一种红细胞膜包被液，其特征在于，所述的红细胞膜包被液包括权利要求1或2所述的包被液。5.根据权利要求4所述的红细胞膜包被液，其特征在于，所述的红细胞膜包被液还包括红细胞膜，所述的红细胞膜为红细胞膜碎片。6.根据...

【专利技术属性】
技术研发人员：庞伟，王伟权，黄志刚，王秀柱，王丽，郝进学，杨延瑞，魏立巧，薄金华，
申请(专利权)人：天津德祥生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：