一种红细胞膜碎片与载体的偶联复合物、其偶联方法和应用技术

本发明专利技术属于血型抗体检测领域，具体地说，涉及一种红细胞膜碎片与载体的偶联复合物、其偶联方法和应用。所述的偶联复合物由红细胞膜碎片与载体偶联而成，所述的载体为乳胶微球。其制备方法为：超声破碎、载体活化、偶联、透析封闭、离心收集和储存。本发明专利技术通过对偶联物膜碎片进行超声破碎处理，使其成为表结构均匀的小片段，经过透析处理，除去超声破碎产生的杂质，及去除静电吸引力，使膜碎片尽量处于舒展状态。保障膜碎片的各个部位都可以充分的与载体微球接触连接，能够显著的提高偶联效率。偶联后封闭的过程为封闭液体系透析，可以使封闭液等充分的与偶联复合物接触，达到更好的液态封闭效果。封闭效果。封闭效果。

【技术实现步骤摘要】
一种红细胞膜碎片与载体的偶联复合物、其偶联方法和应用


[0001]本专利技术属于血型抗体检测领域，具体地说，涉及一种红细胞膜碎片与载体的偶联复合物、其偶联方法和应用。

技术介绍

[0002]对人体细胞膜抗原及其特异性抗体的研究和检测是生物科学、免疫学实验研究和临床检测的最基本内容之一。人A、B、O和Rh血型抗原/抗体检测是临床常规检测项目。血型鉴定是基于抗原
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抗体反应导致的细胞凝集反应。使用红细胞表面抗原检测血清中的血型抗体称之为反定型。在临床输血中，必须保证正、反定型法鉴定结果一致，才能确保输血的安全性。
[0003]对血型抗体检测，传统技术为试管法、纸片法或柱凝集法，这些方法都需要新鲜的红细胞指示剂，这种红细胞指示剂为红细胞悬液，因红细胞存活周期只可以做到保存3
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6个月，且需要冷链运输。红细胞为血液制品在使用上存在一定风险。
[0004]红细胞膜能够更好地保护被运载物质的活性，具有更长和更可控的生命期。这些性能使“载体红细胞”成为极具价值的一种运输载体。
[0005]CN101本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种红细胞膜碎片与载体的偶联方法，其特征在于，所述的偶联方法包括如下步骤：S1、超声破碎：冰浴条件下，将红细胞膜碎片进行超声破碎，重悬，透析，得到超声破碎后的红细胞膜碎片；S2、载体活化：将乳胶微球超声活化，活化缓冲液离心清洗，加入EDC的MES溶液，立即混匀，离心，得到活化后的乳胶微球，常温避光，备用；S3、偶联：将超声破碎后的红细胞膜碎片与备用的活化后的乳胶微球混匀，离心，得到偶联复合物，常温避光，备用；S4、透析封闭：将备用的偶联复合物用封闭液复溶，混匀，透析，得到透析后的偶联复合物；S5、离心收集：将透析后的偶联复合物离心，弃上清；S6、储存：加入储存缓冲液，重悬偶联复合物，冷藏保存。2.根据权利要求1所述的偶联方法，其特征在于，步骤S2中，所述的超声活化为在频率40kHz下超声活化30min。3.根据权利要求1所述的偶联方法，其特征在于，步骤S1中，所述的超声破碎在功率200W下进行，每超声5S停5S，超声破碎总时间为30min。4.根据权利要求1所述的偶联方法，其特征在于，步骤S3中，红细胞膜碎片与乳胶微球的浓度比为35
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45：1。5.根据权利要求4所述的偶联方法，其特征在于，红细胞膜碎片与乳胶微球的浓度比为40：1。6.根据权利要求1所述的偶联方法，其特征在于，步骤S1中，所述的重悬为采用0.1M、pH=...

【专利技术属性】
技术研发人员：庞伟，黄志刚，王秀柱，郝进学，王伟权，王丽，薄金华，
申请(专利权)人：天津德祥生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：