一种血型不规则抗体的检测试剂盒及其应用制造技术

本发明专利技术提供了一种血型不规则抗体的检测方法，所述的检测方法包括将待测物与血型抗体结合蛋白混合。本发明专利技术所述的血型抗体结合蛋白具有很好的抗原活性，可以用于血型不规则抗体的检测。的检测。的检测。

【技术实现步骤摘要】
一种血型不规则抗体的检测试剂盒及其应用


[0001]本专利技术涉及不规则抗体检测
，具体涉及一种血型不规则抗体的检测试剂盒及其应用。

技术介绍

[0002]红细胞血型是经典的人类遗传标记，在输血、亲子鉴定、人类学研究、法医物证检验等领域均占据重要地位。目前已知红细胞有43个血型系统，Lutheran、Kell血型是典型的血型系统。输血过程中，抗K、抗small k或抗Lu
a
都会引起溶血性输血反应。因此，对Lutheran、Kell血型进行检测十分重要。

技术实现思路

[0003]本申请专利技术人经过长期对Kell抗原和Lutheran抗原具体序列进行钻研，从全长序列中选取特定片段，且该片段具有很强的抗原性，可以用于不规则抗体的检测，解决了红细胞保存时间短，结果不易判读等缺陷。同时，本申请提供的使用血型抗体结合蛋白进行Kell血型和Lutheran血型不规则抗体的检测操作简便、成本低且结果精确。
[0004]本专利技术的第一方面，提供了一种血型抗体结合蛋白，所述的血型抗体结合蛋白为K血型抗体结合蛋白、small k血型抗体结合蛋白和/或Lu
a
血型抗体结合蛋白。
[0005]所述的K血型抗体结合蛋白为全长K抗原氨基酸序列中的一部分。优选的，其长度至少665aa。优选的，其长度小于732aa。
[0006]所述的K血型抗体结合蛋白包含与SEQ ID NO：2具有80%以上的同源性或者包含SEQ ID NO：2所示的氨基酸序列。
[0007]在本专利技术的一个具体实施方式中，所述的K血型抗体结合蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO：2所示。
[0008]所述的small k血型抗体结合蛋白为全长small k抗原氨基酸序列中的一部分。优选的，其长度至少665aa。优选的，其长度小于732aa。
[0009]所述的small k血型抗体结合蛋白包含与SEQ ID NO：4具有80%以上的同源性或者包含SEQ ID NO：4所示的氨基酸序列。
[0010]在本专利技术的一个具体实施方式中，所述的small k血型抗体结合蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO：4所示。
[0011]所述的Lu
a
血型抗体结合蛋白为全长Lu
a
抗原氨基酸序列中的一部分。优选的，其长度至少547aa。优选的，其长度小于628aa。
[0012]所述的Lu
a
血型抗体结合蛋白包含与SEQ ID NO：6具有80%以上的同源性或者包含SEQ ID NO：6所示的氨基酸序列。
[0013]在本专利技术的一个具体实施方式中，所述的Lu
a
血型抗体结合蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO：6所示。
[0014]本专利技术的第二方面，提供了一种血型抗体结合蛋白的制备方法。
[0015]优选的，所述的制备方法包括将包含编码血型抗体结合蛋白的核酸的载体导入细胞，诱导其表达。
[0016]优选的，所述的血型抗体结合蛋白为上述的K血型抗体结合蛋白、small k血型抗体结合蛋白和/或Lu
a
血型抗体结合蛋白。
[0017]本专利技术的第三方面，提供了一种编码上述血型抗体结合蛋白的核酸。
[0018]本专利技术的第四方面，提供了一种包含上述核酸的载体。
[0019]本专利技术的第五方面，提供了一种包含上述的血型抗体结合蛋白、上述的核酸或上述的载体的细胞。
[0020]本专利技术的第六方面，提供了一种上述的血型抗体结合蛋白、上述的核酸、上述的载体或上述的细胞在血型不规则抗体的检测中的应用。
[0021]本专利技术的第七方面，提供了一种血型不规则抗体的检测试剂盒，所述的检测试剂盒包含上述的血型抗体结合蛋白、上述的核酸、上述的载体或上述的细胞。
[0022]优选的，所述的检测试剂盒还包含偶联血型抗体结合蛋白的微球、探针分子、报告分子、固相载体、补体、酶标记的抗体或抗补体、显色液、磁珠和/或荧光物质。
[0023]所述的检测试剂盒选自免疫磁珠检测试剂盒、凝集检测试剂盒、液相芯片检测试剂盒、酶联免疫试剂盒或荧光免疫检测试剂盒，所述的试剂盒优选为液相芯片检测试剂盒。
[0024]所述的检测试剂盒还包含偶联血型抗体结合蛋白的微球、探针分子和/或报告分子，其中，所述的微球为聚苯乙烯微球或磁性微球，所述的探针分子是可以和微球表面的羧基等基团偶联并能与被检测物特异性结合的生物分子，所述的报告分子可以是一种能与被检测物特异性结合的荧光染料，也可以是标记有荧光的、能与被检测物结合的其他物质(如抗体、抗原、核酸等)。
[0025]所述的检测试剂盒还可以包含固相载体、补体、酶标记的抗体或抗补体和/或显色液，固相载体材质可以为聚苯乙烯、聚氯乙烯，优选为聚苯乙烯，进一步优选的，本专利技术所述的固相载体为微量滴定板或微孔板，包括8孔板、48孔板或96孔板；优选的，所述的补体能够与抗原抗体复合物反应，并且不与单独的抗原和抗体反应，所述的抗体可以与待测抗体结合。
[0026]所述的检测试剂盒还可以包含磁珠。
[0027]所述的检测试剂盒还可以包含荧光物质，进一步所述的荧光物质包括酶、接受体或抗体。
[0028]所述的检测试剂盒还包括稀释液、清洗溶液、缓冲液、底物和/或终止溶液。
[0029]所述的检测试剂盒还包括阴性对照和/或阳性对照。
[0030]本专利技术的第八方面，提供了一种血型不规则抗体的检测方法，所述的检测方法包括将待测物与上述的血型抗体结合蛋白混合。
[0031]优选的，所述的血型不规则抗体为K抗体、small k抗体和/或Lu
a
抗体。
[0032]优选的，所述的待测物为全血、血清、血浆或待测血型不规则抗体。
[0033]优选的，所述的血型抗体结合蛋白通过将包含编码血型抗体结合蛋白的核酸的载体导入细胞，诱导其表达获得。
[0034]优选的，所述的检测方法检测血型不规则抗体的有无或含量。
[0035]优选的，所述的检测方法包括但不限于微柱凝胶法、沉淀反应、凝集试验、补体结
合试验、标记免疫测定、免疫印迹法或快速测定法，优选的，所述的标记免疫测定选自酶联免疫测定、放射免疫测定、荧光免疫测定、发光免疫测定，所述的快速测定法选自快速斑点免疫结合试验、液相芯片法。
[0036]本专利技术的第九方面，提供了一种上述的血型抗体结合蛋白、核酸、载体、细胞或检测试剂盒在诊断和/或治疗寄生虫病、免疫性疾病、肿瘤或炎性疾病中的应用。
[0037]本专利技术中的血型抗体结合蛋白，无论后续采用何种免疫学方法进行抗体鉴定均需使用。其中，所述的免疫学方法包括但不限于微柱凝胶法、沉淀反应、凝集试验、补体结合试验、标记免疫测定(如酶联免疫测定、放射免疫测定、荧光免疫测定、发光免疫测定等)、免疫印迹法、快速测定法(如快速斑点免疫结合试验、液相芯片法等)。
[0038]本专利技术所述本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种血型不规则抗体的检测方法，其特征在于，所述的检测方法包括将待测物与血型抗体结合蛋白混合，所述的血型抗体结合蛋白为K血型抗体结合蛋白、small k血型抗体结合蛋白和/或Lu
a
血型抗体结合蛋白，所述的K血型抗体结合蛋白如SEQ ID NO：2所示，所述的small k血型抗体结合蛋白如SEQ ID NO：4所示，所述的Lu
a
血型抗体结合蛋白如SEQ ID NO：6所示。2.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述的血型不规则抗体为K抗体、small k抗体和/或Lu
a
抗体。3.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述的待测物为全血、血清、血浆或待测血型不规则抗体。4.根据权利要求1
‑
3任一所述的...

【专利技术属性】
技术研发人员：朱思原，
申请(专利权)人：北京大有天弘科技有限公司，
类型：发明
国别省市：