一种血型抗体检测方法及其应用技术

技术编号:32504655 阅读:25 留言:0更新日期:2022-03-02 10:14
本发明专利技术提供了一种血型抗体检测方法,一种血型抗体检测试剂盒、一种血型抗体结合蛋白、一种编码血型抗体结合蛋白的核酸及包含该核酸的载体。特别是,上述血型抗体结合蛋白包含与SEQ ID NO:2、4、6、8或10具有80%以上的同源性或者包含SEQ ID NO:2、4、6、8或10所示氨基酸序列,具备抗原特异性,可以用于血型抗体检测。可以用于血型抗体检测。可以用于血型抗体检测。

【技术实现步骤摘要】
一种血型抗体检测方法及其应用


[0001]此本专利技术涉及血型抗体和抗原
,具体涉及一种血型抗体检测方法和在生物医药领域的应用。

技术介绍

[0002]Duffy血型是发现比较早的一种血型系统,1950年,Cusbush等人在一名多次输血导致溶血反应的患者血清中发现了Fya抗体,由于该患者姓Duffy,把这个新发现的血型命名为Duffy血型。一年后,Ikin等人发现了与Fya抗体相对应的Fyb抗体。1995年,国际输血协会将Duffy血型系统编号为008。Fya抗原与Fyb抗原在胎儿出生时就发育完全,在怀孕初期6

7周就可以检测到该抗原的存在。Duffy血型因其在临床应用中的重要意义而备受关注,最新研究显示,Duffy血型不仅与输血安全及母婴血型不合引起的新生儿溶血病有关,而且Duffy抗原可作为趋化因子在人类疟原虫受体、炎症、自身免疫性疾病、肿瘤、移植排斥等方面发挥作用。
[0003]MNSs血型是继ABO血型后被检出的第二个血型,在稀有血型中MNs抗原的多态性数目仅次于Rh血型系统。1927年,生物学家卡尔
·
兰德斯坦纳和菲利普
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列文(Philip Levine)在将人类血液输入家兔体内以获得特异性抗体时,发现了M和N抗原。1947年,Walsh和Montgomery发现了另一种抗原,取名S,Sanger等证明此抗原与MN型连锁。1951年列文等又进一步发现了S的对偶抗原s。MNS血型系统包括超过40种抗原,其中四种最为重要,分别称为M、N、S、s抗原,它们对应的抗体都与输血反应有关。M、N、S、s抗原均为糖蛋白,与MN有关的糖蛋白称为血型糖蛋白A(glycophorins A,GPA),与Ss有关的称为血型糖蛋白B(glycophorins B,GPB)。
[0004]目前,血型抗体的检测技术主要是利用抗体鉴定谱细胞,该方法存在鉴定谱细胞保存期短,无法直接鉴定单一抗体等问题,因此重组蛋白的合成对抗体鉴定至关重要。但是,由于血型抗原存在多个跨膜区和疏水区,均无法全长表达,因此选择合适的序列进行表达是目前亟待解决的问题,若序列选择不合适则会出现无抗原性等问题。

技术实现思路

[0005]本专利技术的第一方面,提供了一种血型抗体检测方法,所述的血型抗体检测方法包括使待测物与血型抗体结合蛋白混合。
[0006]优选的,所述的血型为Duffy或MNS血型。
[0007]优选的,所述的血型抗体结合蛋白为可溶性蛋白,优选的,所述的血型抗体结合蛋白为Fya、Fyb、S、s或N血型抗体结合蛋白。
[0008]优选的,所述的血型抗体结合蛋白长度为50

150aa。
[0009]优选的,所述的Fya或Fyb血型抗体结合蛋白长度为55

70aa,进一步优选的,所述的Fya或Fyb血型抗体结合蛋白长度为66aa。
[0010]优选的,所述的S或s血型抗体结合蛋白长度为50

70aa,进一步优选的,所述的S或
s血型抗体结合蛋白长度为59aa。
[0011]优选的,所述的N血型抗体结合蛋白长度为80

150aa,进一步优选的,所述的N血型抗体结合蛋白长度为91aa。
[0012]优选的,所述的血型抗体结合蛋白包含与SEQ ID NO:2、4、6、8或10具有80%以上的同源性或者包含SEQ ID NO:2、4、6、8或10所示氨基酸序列。
[0013]优选的,所述的Fya血型抗体结合蛋白包含与SEQ ID NO:2具有80%以上的同源性或者包含SEQ ID NO:2所示氨基酸序列。
[0014]优选的,所述的Fyb血型抗体结合蛋白包含与SEQ ID NO:4具有80%以上的同源性或者包含SEQ ID NO:4所示氨基酸序列。
[0015]优选的,所述的S血型抗体结合蛋白包含与SEQ ID NO:6具有80%以上的同源性或者包含SEQ ID NO:6所示氨基酸序列。
[0016]优选的,所述的s血型抗体结合蛋白包含与SEQ ID NO:8具有80%以上的同源性或者包含SEQ ID NO:8所示氨基酸序列。
[0017]优选的,所述的N血型抗体结合蛋白包含与SEQ ID NO:10具有80%以上的同源性或者包含SEQ ID NO:10所示氨基酸序列。
[0018]优选的,所述的血型抗体为Fya、Fyb、S、s和/或N抗体。
[0019]优选的,所述的待测物为全血、血清、血浆或待测血型抗体。
[0020]优选的,所述的检测方法检测血型抗体的有无或含量。
[0021]优选的,所述的血型抗体检测方法选自微柱凝胶法、沉淀反应、凝集试验、补体结合试验、标记免疫测定、免疫印迹法、快速测定法。优选的,所述的标记免疫测定选自酶联免疫测定、放射免疫测定、荧光免疫测定、发光免疫测定,所述的快速测定法选自快速斑点免疫结合试验、液相芯片法。
[0022]优选的,所述的血型抗体检测方法可以获得血型检测结果。
[0023]本专利技术的第二方面,提供了一种血型抗体结合蛋白,所述的血型抗体结合蛋白为Duffy或MNS血型抗体结合蛋白。
[0024]优选的,所述的血型抗体结合蛋白为可溶性蛋白,进一步优选的,所述的血型抗体结合蛋白为Fya、Fyb、S、s或N血型抗体结合蛋白。
[0025]优选的,所述的血型抗体选自Fya、Fyb、S、s或N抗体。
[0026]优选的,所述的血型抗体结合蛋白包含与SEQ ID NO:2、4、6、8或10具有80%以上的同源性或者包含SEQ ID NO:2、4、6、8或10所示氨基酸序列。
[0027]优选的,所述的Fya血型抗体结合蛋白包含与SEQ ID NO:2具有80%以上的同源性或者包含SEQ ID NO:2所示氨基酸序列。
[0028]优选的,所述的Fyb血型抗体结合蛋白包含与SEQ ID NO:4具有80%以上的同源性或者包含SEQ ID NO:4所示氨基酸序列。
[0029]优选的,所述的S血型抗体结合蛋白包含与SEQ ID NO:6具有80%以上的同源性或者包含SEQ ID NO:6所示氨基酸序列。
[0030]优选的,所述的s血型抗体结合蛋白包含与SEQ ID NO:8具有80%以上的同源性或者包含SEQ ID NO:8所示氨基酸序列。
[0031]优选的,所述的N血型抗体结合蛋白包含与SEQ ID NO:10具有80%以上的同源性或
者包含SEQ ID NO:10所示氨基酸序列。
[0032]本专利技术的第三方面,提供了一种编码本专利技术所述的血型抗体结合蛋白的核酸。
[0033]本专利技术的第四方面,提供了一种包含上述核酸的载体。
[0034]具体地,上述载体可以采用任何适于表达本专利技术上述血型抗体结合蛋白的表达载体。
[0035]在本专利技术的一个实施方式中,上本文档来自技高网
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种血型抗体检测方法,其特征在于,所述的血型抗体检测方法包括使待测物与血型抗体结合蛋白混合,所述的血型抗体结合蛋白为Fya、Fyb、S、s或N血型抗体结合蛋白,所述的血型抗体结合蛋白包含与SEQ ID NO:2、4、6、8或10具有80%以上的同源性或者包含SEQ ID NO:2、4、6、8或10所示氨基酸序列。2.根据权利要求1所述的血型抗体检测方法,其特征在于,所述的血型抗体为Fya抗体、Fyb抗体、S抗体、s抗体和/或N抗体。3.根据权利要求1所述的血型抗体检测方法,其特征在于,所述的待测物为全血、血清、血浆或待测血型抗体。4.根据权利要求1所述的血型抗体检测方法,其特征在于,所述的检测方法检测血型抗体的有无或含量。5.根据权利要求1

4任一所述的血型抗体检测方法,其特征在于,所述的血型抗体检测方法选自微柱凝胶法、沉淀反应、凝集试...

【专利技术属性】
技术研发人员:朱思原
申请(专利权)人:北京大有天弘科技有限公司
类型:发明
国别省市:

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