用于制备UDP-GlcNAc的酶方法技术

本发明专利技术涉及在单一反应混合物中用固定化的或优选共固定化的酶从低成本底物尿苷一磷酸和N

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】用于制备UDP
‑
GlcNAc的酶方法
专利

[0001]本专利技术涉及在单一反应混合物中用固定化的或优选共固定化的酶从低成本底物尿苷一磷酸和N
‑
乙酰基
‑
D
‑
葡糖胺产生UDP
‑
N
‑
乙酰基
‑
α
‑
D
‑
葡糖胺(UDP
‑
GlcNAc)的酶催化方法。此外，可以调节所述方法以产生GlcN酰化的分子和生物分子，包括糖，特别是人乳寡糖(HMO)，蛋白质，肽，糖蛋白，特别是抗体，或糖肽，以及生物缀合物，特别是碳水化合物缀合物疫苗和抗体
‑
药物缀合物。
[0002]专利技术背景
[0003]尿苷5
′‑
二磷酸基
‑
N
‑
乙酰基
‑
α
‑
D
‑
葡糖胺(UDP
‑
GlcNAc)是许多生物技术应用和食品技术的关键底物。为了制备碳水化合物本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.产生尿苷5
′‑
二磷酸基
‑
N
‑
乙酰基
‑
α
‑
D
‑
葡糖胺的方法，包括下述步骤：A)提供溶液，其包含(i)下式代表的尿苷一磷酸和N
‑
乙酰基
‑
D
‑
葡糖胺(ii)多磷酸盐和腺苷三磷酸；和提供包含葡萄糖
‑1‑
磷酸尿苷酰基转移酶、N
‑
乙酰基己糖胺激酶、多磷酸激酶和尿苷一磷酸激酶的一组酶；B)在所述一组酶、多磷酸盐和腺苷三磷酸存在下从尿苷一磷酸和N
‑
乙酰葡糖胺产生尿苷5
′‑
二磷酸基
‑
N
‑
乙酰基
‑
α
‑
D
‑
葡糖胺,其中所述一组酶共价地或吸附性地固定化在可重复使用的、机械稳定的固体载体上。2.根据权利要求1的方法，其中所述一组酶共固定化在固体载体上。3.根据权利要求1或2的方法，其中所述一组酶共价地固定化在可重复使用的、机械稳定的固体载体上。4.根据权利要求1
‑
3中任一项的方法，其中所述固体载体由包含聚合物的珠或树脂构成，所述聚合物具有环氧化物官能团、具有氨基环氧化物官能团、具有乙二胺官能团、具有氨基C2官能团、具有氨基C6官能团、具有阴离子/氨基C6间隔物官能团。5.根据权利要求1
‑
4中任一项的方法，其中所述固体载体是用环氧基团官能化的聚合物。6.根据权利要求1
‑
5中任一项的方法，其中所述固体载体由具有至孔径尺寸的多孔珠构成。7.根据权利要求1
‑
6中任一项的方法，其中所述一组酶还包含焦磷酸酶。8.根据权利要求1
‑
7中任一项的方法，其中所述一组酶从发酵肉汤、粗制细胞裂解液、纯化细胞裂解液或细胞匀化物直接共固定化在固体载体上。9.根据权利要求1
‑
8中任一项的方法，其中所述一组酶还包含一域多磷酸激酶2和/或其中所述一组酶还包含二域多磷酸激酶2。10.根据权利要求1
‑
9中任一项的方法，其中腺苷三磷酸在步骤A)中提供的溶液中的浓度范围是0.001摩尔至0.9摩尔每摩尔N
‑
乙酰基
‑
D
‑
葡糖胺。
11.根据权利要求1
‑

【专利技术属性】
技术研发人员：R，
申请(专利权)人：马克斯，
类型：发明
国别省市：