本发明专利技术涉及功能微生物筛选与应用技术领域，具体提供了一株新的枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis），并提供了其在水质净化中的应用。所述枯草芽孢杆菌筛选自广东江门对虾养殖池塘废水中，其保藏编号为CCCTCC NO：M2020356。该菌株能高效去除养殖水体中的氨态氮和亚硝态氮，实现水质净化，且其安全性高，可广泛应用于淡水和海水养殖领域。广泛应用于淡水和海水养殖领域。
【技术实现步骤摘要】
一株枯草芽孢杆菌及其在水质净化中的应用
[0001]本专利技术涉及功能微生物筛选
，具体涉及一株枯草芽孢杆菌及其在水质净化中的应用。
技术介绍
[0002]我国水产养殖业取得了蓬勃发展，已成为农业经济的一个支柱。然而，在水产业迅猛发展的同时，养殖品种的老化和退化、池塘的高密度养殖、未经处理的废水任意排放、池塘老化，尤其现在以投饵为主的养殖模式，残饵、粪便、氮、磷等富营养因子排入水体，这导致水域环境恶化，鱼虾病害频频发生，已成为影响我国水产养殖的瓶颈。
[0003]微生态制剂是将从天然环境中提取分离出来的微生物经过培养扩增后形成的含有大量有益菌的制剂，严格定义的微生态制剂可分为益生素(Probiotics)、化学益生素(Prebiotics)、合生素(Synbiotics)3类。目前研究中最重要的两种为益生素(probiotics)和化学益生素(Prebiotics)。益生素(Probiotics)又称益生菌、利生菌、活菌制剂。
[0004]农业农村部饲料添加剂品种目录2013年第2045号公告批准可以在水产养殖动物上使用的微生物菌种包括光合细菌、芽孢杆菌、乳酸杆菌、双歧杆菌和酵母菌在内的30种。目前，在水产养殖业中的应用主要有饲料添加剂和水质改良剂等。
[0005]光合细菌所含营养丰富，蛋白质含量达60％以上，同时还含有辅酶Q、维生素B、叶酸等营养物质，不仅能够促进水生动物的生长，还能够提高水生动物的免疫能力。姜松等在糙海参幼苗培育水体中添加光合细菌，不仅显著提高了苗体质量、幼苗成活率和消化酶活性，还对育苗水体水质具有改善作用。
[0006]芽孢杆菌对营养要求简单，代谢速度快，易于分离、培养和保存，对工业化生产技术条件要求不苛刻。沈斌乾等在饲料中添加枯草芽孢杆菌，研究其对青鱼生长、消化酶活性和鱼体组成的影响，结果表明青鱼饲料中添加枯草芽孢杆菌能显著提高青鱼的增重比和肠蛋白酶活性，显著降低了饵料系数。曾地刚等通过对比泼洒枯草芽孢杆菌与未泼洒枯草芽孢杆菌的虾池发现，泼洒枯草芽孢杆菌可以显著降低虾池的COD、亚硝态氮和硫化氢浓度，提高总碱度，这表明枯草芽孢杆菌具有净化水质的作用。
[0007]乳酸杆菌是一类重要的抗菌化合物，可以产生乳酸、H2O2。乳酸杆菌作用于肠道，可以调节微生物分布平衡，增强机体的免疫力和抵抗力，促进肠道的生长和发育。刘文舒在乳酸杆菌抗感染风险机制研究中发现，饲料粘附乳酸杆菌可以改变罗非鱼肠道的粘附菌群结构，高剂量水平对嗜水气单胞菌NJ
‑
1的毒性具有显著的保护作用。
[0008]双歧杆菌是人类和动物肠道中的关键微生物，也是众所周知的肠道益生菌，具有调节肠道菌群、降低胆固醇、预防肠道病变、延缓衰老等作用。桂远明等在有关于鲤暴发性肝炎治疗效果的初步研究报告中表明，双歧杆菌制剂不仅在治疗鲤暴发性肝炎以及调整肠道菌群方面具有良好效果，同时在促进生长方面也有积极意义。
[0009]酵母菌在净化水质、抑制水华、促进机体生长和提高机体免疫力等方面均有良好的作用。叶秋雯等在不同添加物对水华藻的抑制作用的研究中发现，有效微生物群(EM群)
可以通过胞外分泌物破坏藻类细胞的叶绿素结构，实现对藻类的抑制，防止水华的发生。
[0010]微生态制剂无毒副作用、无污染、可改善水质、可提高水生动物免疫能力并促进水生动物生长，在倡导绿色、科学养殖理念的今天，发挥着越来越重要的作用，但仍需继续开发专一性、高效性的微生态制剂，增强作用效果。
技术实现思路
[0011]本专利技术的目的是提供一株新的枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)，并提供了其在水质净化中的应用。所述枯草芽孢杆菌能高效去除养殖水体中的氨态氮和亚硝态氮，实现水体净化，应用前景广泛。
[0012]本专利技术一方面提供了一种枯草芽孢杆菌，命名为枯草芽孢杆菌VSB091(Bacillus subtilis VSB091)，已于2020年7月27日保藏于中国武汉武汉大学的中国典型培养物保藏中心，其保藏号为CCTCC NO：M2020355。
[0013]本专利技术一方面提供了所述枯草芽孢杆菌在水质净化中的应用。
[0014]本专利技术还提供了一种微生物制剂，包含上述枯草芽孢杆菌VSB091。
[0015]所述微生物制剂还包含芽孢杆菌、乳酸菌、光合细菌、丁酸梭菌、盐单胞菌、海杆菌、假交替单胞菌中的任意一种或两种或多种的组合。
[0016]所述的芽孢杆菌优选地衣芽孢杆菌、短小芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌、凝结芽孢杆菌、侧孢芽孢杆菌、甲基营养型芽孢杆菌或暹罗芽孢杆菌。
[0017]所述的乳酸菌优选屎肠球菌、植物乳杆菌、罗伊氏乳杆菌或戊糖片球菌。
[0018]所述微生物制剂中枯草芽孢杆菌VSB091的活菌量至少为108CFU/g。
[0019]本专利技术还提供了所述微生物制剂在水质净化中的应用。
[0020]本专利技术筛选获得的枯草芽孢杆菌VSB091在不同盐度下均表现出良好的脱氮性能，尤其在30
‰
盐度条件下，氨态氮和亚硝态氮的去除率达到100％和99.87％，取得了意料不到的效果。该菌株还具有较高的产蛋白酶和纤维素酶能力，其水解圈直径分别为150mm和192mm；其发酵上清液中蛋白酶酶活高达120U/ml，纤维素酶酶活高达58.5U/ml，从而有利于该菌株对养殖水体中的残饵、植物蛋白源及植物纤维的有效分解利用。
[0021]此外，枯草芽孢杆菌VSB091具有广谱的抑菌能力，对哈维氏弧菌、副溶血弧菌、溶藻弧菌、嗜水气单胞菌、柱状黄杆菌均具有一定抑制性；对低温具有一定的耐受性，在15℃条件下可以正常生长，符合水产主要冷水性养殖经济物种如海参、虹鳟等的适宜生长温度范围；而且安全性好，不具备溶血性，对水产养殖常用抗生素均敏感，不存在耐药性，因此可广泛应用于淡水和海水养殖领域。
附图说明
[0022]图1为VSB091菌株菌落图；
[0023]图2为VSB091菌株蛋白质谱峰图；
[0024]图3为VSB091菌株基因指纹图谱；
[0025]图4为VSB091菌株产胞外酶平板筛选图。
具体实施方式
[0026]下面结合具体实施例进一步阐述本专利技术。对于实施例中所用到的具体方法或材料，本领域技术人员可以在本专利技术技术思路的基础上，根据已有的技术进行常规的替换选择，而不仅限于本专利技术实施例的具体记载。
[0027]本专利技术所选用的设备和试剂可以选自市售任意一种。对于本专利技术所涉及的培养基配方如下：
[0028]①
NH3富集培养基：葡萄糖0.5g，CH3COONa 0.5g，(NH4)2SO
4 0.1g，K2HPO4.
·
H2O 1.2g,MgSO4·
7H2O 0.5g经过0.45um微孔滤膜过滤除菌的海水定容至1L，pH7.5，121℃下高压蒸汽灭菌20min。其中灭菌前不加入(NH4)2SO4，将(NH4)2SO4溶液通过0.22u本文档来自技高网...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种枯草芽孢杆菌，其特征在于，所述的枯草芽孢杆菌的保藏号为CCTCC NO：M2020355。2.权利要求1所述的枯草芽孢杆菌在水质净化中的应用。3.一种微生物制剂，其特征在于，所述的微生物制剂包含权利要求1所述的枯草芽孢杆菌。4.如权利要求3所述的微生物制剂，其特征在于，所述的微生物制剂还包含芽孢杆菌、乳酸菌、光合细菌、丁酸梭菌、盐单胞菌、海杆菌、假交替单胞菌中的任意一种或两种或多种的组合。5.如权利要求4所述的微生物制剂，其特征在于，所述的的芽孢杆菌为地衣芽孢杆菌、短小芽孢杆菌、...
【专利技术属性】
技术研发人员：凌红丽，高烁，周英俊，梁莉，
申请(专利权)人：山东蔚蓝生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。