用于检测β-淀粉样蛋白的产品和方法技术

本申请提供了用于检测生物样品中β

【技术实现步骤摘要】
用于检测
β
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淀粉样蛋白的产品和方法


[0001]本申请涉及生物化学及抗体领域，更具体地，本申请涉及用于检测生物样品中β
‑
淀粉样蛋白和/或用于诊断阿尔兹海默症的产品。

技术介绍

[0002]阿尔茨海默症(Alzheimer
’
s Disease，AD)是一种渐进性神经系统疾病，会损害思维、记忆和独立性，导致早逝，该病目前无法被阻止、延缓或预防，造成了日益严重的全球健康危机。临床前阶段包括大脑中所有看不见的变化(如斑块的积聚)在症状出现前数年发生，随着疾病的发展，患者日常活动的护理需求越来越高，轻度AD患者虽然开始忘记熟悉的单词或物体的位置，但生活仍然可以自理；发展到中度，患者变得更健忘，更难以完成日常任务，并经历性格和行为的变化；重度AD患者则不能再对他们的环境做出反应，不能进行交谈，也不能控制运动或控制大便。
[0003]AD的病因仍不明确，β淀粉样蛋白(Amyloid beta peptide，Aβ)级联假说认为Aβ蛋白代谢失衡、聚集和形成的低聚物和纤维体会沉积于脑中，沉积物形成老年斑，引起神经炎症增加，以及神经元凋亡等脑部病变，是诱发阿尔兹海默症的重要因素。Aβ分子量约为4kDa，是由跨膜淀粉样前体蛋白(Amyloid precursor protein，APP)经过β和γ分泌酶两次裂解后产生的神经毒性蛋白，是蛋白质错误折叠形成的，其能够以单体、寡聚体、原纤维和不溶性纤维的形式存在，在脑内沉积并伴随突触的损伤和神经元的死亡。
[0004]尽管没有治愈AD的方法，但一些FDA批准的药物可以延缓疾病进展，如胆碱酯酶抑制剂(增加脑内神经递质乙酰胆碱的量，促进细胞间信号传导)、NMDA受体拮抗剂(改变脑细胞信号传导)，但是这些药物的疗效依然不够好，特别对中重度AD患者，依然未能满足患者的临床需求。此外，一些药物尽管有时能延缓一些患者的智力衰退，但可引起严重副作用。因此，病人需要更有效的药物。
[0005]近年来以Aβ为药物靶点治疗AD的研究取得了较大进展，2021年6月7日，美国食品药品监督管理局(FDA)宣布批准渤健(Biogen)公司研发的阿尔茨海默症新药阿杜那单抗(Aducanumab，商品名Aduhelm)上市。阿杜那单抗代表了首个被批准用于阿尔茨海默病的治疗方法，其最常见的不良反应(至少比安慰剂发生率高10%)：ARIA水肿、头痛、ARIA
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H微出血、ARIA
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H表面铁沉积症和跌倒。
[0006]有研究表明，从脑中除去Aβ而设计的免疫治疗已在AD的动物模型中产生了阳性结果，因此针对Aβ蛋白的检测对于AD的诊断、干预及治疗有重要意义。
[0007]因此，开发Aβ(特别是Aβ1~42肽和/或Aβ1~40肽)靶向抗体对于AD的实验室研究和临床诊断都具有一定的意义。

技术实现思路

[0008]第一方面，本申请提供了用于检测生物样品中β
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淀粉样蛋白和/或用于诊断阿尔兹海默症的产品，其包含用于确定所述生物样品中β
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淀粉样蛋白水平的试剂。
[0009]在第一方面的一些实施方案中，所述产品为试剂盒、试纸条、检测卡或微流控装置。
[0010]在第一方面的一些实施方案中，所述试剂包含特异性结合β
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淀粉样蛋白的抗体或其抗原结合部分，所述抗体或其抗原结合部分包含重链可变区，所述重链可变区HCDR1、HCDR2和/或HCDR3。在第一方面的一些实施方案中，所述HCDR1序列包含氨基酸序列TSGMGVS (SEQ ID NO:1)。在第一方面的一些实施方案中，所述HCDR2序列包含氨基酸序列HIYWDDDKRYNPSLKR (SEQ ID NO:2)。在第一方面的一些实施方案中，所述HCDR3序列包含氨基酸序列SRGYVYYASGFAY (SEQ ID NO:3)。
[0011]在第一方面的一些实施方案中，特异性结合β
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淀粉样蛋白的抗体或其抗原结合部分还包含轻链可变区，其中所述轻链可变区包含LCDR1、LCDR2和/或LCDR3序列。
[0012]在第一方面的一些实施方案中，所述LCDR1序列包含氨基酸序列RSSQSLVHSNGNTYLE (SEQ ID NO:5)。在第一方面的一些实施方案中，所述LCDR2序列包含氨基酸序列KVSNRFS (SEQ ID NO:6)。在第一方面的一些实施方案中，所述LCDR3序列包含氨基酸序列FQGSFVPLT (SEQ ID NO:7)。
[0013]在第一方面的一些实施方案中，所述特异性结合β
‑
淀粉样蛋白的抗体或其抗原结合部分的重链可变区包含SEQ ID NO: 4所示的氨基酸序列或者与上述序列具有至少80%同源性的氨基酸序列。
[0014]在第一方面的一些具体实施方案中，所述重链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO: 4所示。
[0015]在第一方面的一些实施方案中，所述特异性结合β
‑
淀粉样蛋白的抗体或其抗原结合部分的轻链可变区包含SEQ ID NO: 8所示的氨基酸序列或者与上述序列具有至少80%同源性的氨基酸序列。
[0016]在第一方面的一些具体实施方案中，所述轻链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO: 8所示。
[0017]在第一方面的一些具体实施方案中，所述特异性结合β
‑
淀粉样蛋白的抗体的重链可变区氨基酸序列如SEQ ID NO:4所示，以及所述特异性结合β
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淀粉样蛋白的抗体的轻链可变区氨基酸序列如SEQ ID NO: 8所示。
[0018]在第一方面的一些实施方案中，所述抗原结合部分选自：Fab片段、Fab
’
片段、F(ab
’
)2片段、Fv片段、scFv片段、Fd片段或单域抗体。
[0019]在第一方面的一些实施方案中，所述特异性结合β
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淀粉样蛋白的抗体为鼠源化抗体。
[0020]在第一方面的一些实施方案中，所述特异性结合β
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淀粉样蛋白的抗体为单克隆抗体。
[0021]在第一方面的一些实施方案中，所述特异性结合β
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淀粉样蛋白的抗体或其抗原结合部分特异性结合于灵长类动物β
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淀粉样蛋白。在第一方面的一些具体实施方案中，所述特异性结合β
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淀粉样蛋白的抗体或其抗原结合部分特异性结合于人β
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淀粉样蛋白。在第一方面的一些实施方案中，所述特异性结合β
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淀粉样蛋白的抗体或其抗原结合部分特异性结合于人β
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淀粉样蛋白的Aβ1~40亚型或Aβ1~42亚型。在第一方面的一些具体实施方案中，所述特异性结合β
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淀粉样蛋白的抗体或其抗原结合部分特异性结合于人β
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淀粉样蛋白的Aβ1
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.用于检测生物样品中β
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淀粉样蛋白和/或用于诊断阿尔兹海默症的产品，其包含用于确定所述生物样品中β
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淀粉样蛋白水平的试剂。2.如权利要求1所述的产品，其中所述产品为试剂盒、试纸条、检测卡或微流控装置。3.如权利要求1所述的产品，其中所述试剂包含特异性结合β
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淀粉样蛋白的抗体或其抗原结合部分；优选地，所述抗体或其抗原结合部分包含重链可变区HCDR1、HCDR2和/或HCDR3，其中所述HCDR1序列包含氨基酸序列TSGMGVS (SEQ ID NO:1)；所述HCDR2序列包含氨基酸序列HIYWDDDKRYNPSLKR (SEQ ID NO:2)；和/或所述HCDR3序列包含氨基酸序列SRGYVYYASGFAY (SEQ ID NO:3)；更优选地，所述重链可变区包含SEQ ID NO: 4所示的氨基酸序列或者与上述序列具有至少80%同源性的氨基酸序列；最优选地，所述重链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO: 4所示。4.如权利要求3所述的产品，其中所述抗体或其抗原结合部分还包含轻链可变区，所述轻链可变区包含LCDR1、LCDR2和/或LCDR3序列，其中所述LCDR1序列包含氨基酸序列RSSQSLVHSNGNTYLE (SEQ ID NO:5)；所述LCDR2序列包含氨基酸序列KVSNRFS (SEQ ID NO:6)；和/或所述LCDR3序列包含氨基酸序列FQGSFVPLT (SEQ ID ...

【专利技术属性】
技术研发人员：张博文，康志云，王怡，郑新越，杨志云，李晓英，王月丹，王铁山，
申请(专利权)人：北京第一生物化学药业有限公司，
类型：发明
国别省市：