结合β-淀粉样蛋白的抗体及其用途制造技术

本申请提供了抗β

【技术实现步骤摘要】
NO:1)。在第一方面的一些实施方案中，所述HCDR2序列包含氨基酸序列HIYWDDDKRYNPSLKR (SEQ ID NO:2)。在第一方面的一些实施方案中，所述HCDR3序列包含氨基酸序列SRGYVYYASGFAY (SEQ ID NO:3)。
[0010]在第一方面的一些实施方案中，特异性结合β
‑
淀粉样蛋白的抗体或其抗原结合部分还包含轻链可变区，其中所述轻链可变区包含LCDR1、LCDR2和/或LCDR3序列。
[0011]在第一方面的一些实施方案中，所述LCDR1序列包含氨基酸序列RSSQSLVHSNGNTYLE (SEQ ID NO:5)。在第一方面的一些实施方案中，所述LCDR2序列包含氨基酸序列KVSNRFS (SEQ ID NO:6)。在第一方面的一些实施方案中，所述LCDR3序列包含氨基酸序列FQGSFVPLT (SEQ ID NO:7)。
[0012]在第一方面的一些实施方案中，所述特异性结合β
‑
淀粉样蛋白的抗体或其抗原结合部分的重链可变区包含SEQ ID NO: 4所示的氨基酸序列或者与上述序列具有至少80%同源性的氨基酸序列。
[0013]在第一方面的一些具体实施方案中，所述重链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO: 4所示。
[0014]在第一方面的一些实施方案中，所述特异性结合β
‑
淀粉样蛋白的抗体或其抗原结合部分的轻链可变区包含SEQ ID NO: 8所示的氨基酸序列或者与上述序列具有至少80%同源性的氨基酸序列。
[0015]在第一方面的一些具体实施方案中，所述轻链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO: 8所示。
[0016]在第一方面的一些实施方案中，所述抗原结合部分选自：Fab片段、Fab
’
片段、F(ab
’
)2片段、Fv片段、scFv片段、Fd片段或单域抗体。
[0017]在第一方面的一些实施方案中，所述特异性结合β
‑
淀粉样蛋白的抗体或其抗原结合部分特异性结合于灵长类动物β
‑
淀粉样蛋白。在第一方面的一些具体实施方案中，所述特异性结合β
‑
淀粉样蛋白的抗体或其抗原结合部分特异性结合于人β
‑
淀粉样蛋白。
[0018]在第一方面的一些实施方案中，所述特异性结合β
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淀粉样蛋白的抗体为鼠源化抗体。
[0019]在第一方面的一些实施方案中，所述特异性结合β
‑
淀粉样蛋白的抗体为单克隆抗体。
[0020]在第一方面的一些具体实施方案中，所述特异性结合β
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淀粉样蛋白的抗体的重链可变区氨基酸序列如SEQ ID NO:4所示，以及所述特异性结合β
‑
淀粉样蛋白的抗体的轻链可变区氨基酸序列如SEQ ID NO: 8所示。
[0021]第二方面，本申请提供了核酸分子，其编码第一方面所述的特异性结合β
‑
淀粉样蛋白的抗体或其抗原结合部分。
[0022]第三方面，本申请提供了第一方面所述的特异性结合β
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淀粉样蛋白的抗体或其抗原结合部分、或第二方面所述的核酸分子在制备用于检测β
‑
淀粉样蛋白和/或用于诊断阿尔兹海默症的产品中的用途。
附图说明
[0023]图1显示了抗β
‑
淀粉样蛋白单克隆抗体6C8
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1B9的EC
50
值测定曲线。
具体实施方式
[0024]人体内Aβ最常见的亚型是Aβ1~40和Aβ1~42，在人脑脊液和血中，Aβ1~40分别比Aβ1~42的含量水平高10倍和1.5倍，Aβ1~42具有更强的毒性，且更容易聚集，从而形成Aβ沉淀的核心，引发神经毒性作用。在病理条件下，AD患者脑内Aβ的产生是正常情况下的4~10倍，大量的Aβ聚集形成的神经炎性斑(老年斑)，老年斑的形成导致海马内大量细胞的死亡，这说明延长的两个氨基酸不仅增加了Aβ的疏水性，使其更容易聚集，而且提高了聚集物的稳定性，早期即可选择性地在淀粉样斑块中沉积。
[0025]在AD患者中，在脑脊液(CSF)中会出现Aβ浓度的变化，其病理变化依次是脑Aβ积聚、CSF增加、海马和灰质体积减少、葡萄糖代谢减少、记忆障碍和痴呆。Aβ可由多种细胞产生，循环于血液、脑脊液和脑间质液中，大多与伴侣蛋白分子结合，少数以游离状态存在。Aβ不仅在脑细胞中表达，也能够在神经元、星形胶质细胞和小胶质细胞中表达，还会在外周器官和组织如肝、肾、胰腺、脾等脏器及各种血液和内皮细胞中表达。
[0026]Aβ抗体可使体外聚集状的Aβ解聚，从而降低其毒性作用，用Aβ抗体治疗转基因AD小鼠，不但能减少模型鼠脑内的老年斑的数量，也可以改善其学习记忆能力，因此制备和应用针对Aβ及其不同片段的抗体将会对于相关疾病的诊断、治疗以及研究都会有积极的影响。
[0027]本申请提供了特异性结合于β
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淀粉样蛋白的新型抗β
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淀粉样蛋白抗体或其抗原结合部分。在优选的实施方案中，本申请的抗体或其抗原结合部分具有pM级别的EC
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值。本申请还提供了编码该抗体或其抗原结合片段的核酸分子、制备和纯化该抗体的方法以及所述抗体或其抗原结合片段的医学和生物学应用，例如用于检测β
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淀粉样蛋白和/或用于诊断阿尔兹海默症。
[0028]为容易地理解本申请，首先定义本文中使用的某些术语。
[0029]如本文所用的，术语“抗体”是指包含四条多肽链，即通过双硫键互连的两条重链(H)及两条轻链(L)的免疫球蛋白分子，以及其多聚体(例如IgM)。各重链包含重链可变区(缩写为VH)及重链恒定区(缩写为CH)。重链恒定区包含三个结构域，即CH1、CH2及CH3。各轻链包含轻链可变区(缩写为VL)及轻链恒定区(缩写为CL)。轻链恒定区包含一个域(CL1)。VH及VL区可进一步细分成称为互补决定区(CDR)的高变区，其中穿插有称为构架区(FR)的保守区。在一些实施方案中，从N
‑
末端至C
‑
末端，轻链与重链可变结构域均包含FR1、CDR1、FR2、CDR2、FR3、CDR3与FR4。
[0030]如本文所用的，术语抗体的“抗原结合部分”是指负责结合抗原的完整抗体分子的一部分或区段。抗原结合域可以包含重链可变区(VH)、轻链可变区(VL)或上述两者。抗体的抗原结合片段可使用任何适合的标准技术从完整抗体分子制备，所述标准技术包括蛋白水解消化或重组遗传工程化技术等。抗原结合部分的非限制性实例包括：Fab片段、F(ab')2片段、Fd片段、Fv片段、单链Fv (scFv)分子、单域抗体、dAb片段及由模拟抗体高变区的氨基酸残基组成的最小识别单元(例如分离的CDR)。术语“抗原结合部分”也包括其它工程化的分子，如双抗体、三抗体、四抗体及微型抗体等。例如，本文中本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.特异性结合β
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淀粉样蛋白的抗体或其抗原结合部分，其包含重链可变区HCDR1、HCDR2和/或HCDR3，其中所述HCDR1序列包含氨基酸序列TSGMGVS (SEQ ID NO:1)；所述HCDR2序列包含氨基酸序列HIYWDDDKRYNPSLKR (SEQ ID NO:2)；和/或所述HCDR3序列包含氨基酸序列SRGYVYYASGFAY (SEQ ID NO:3)。2.如权利要求1所述的抗体或其抗原结合部分，其中所述重链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO: 4所示。3.如权利要求1所述的抗体或其抗原结合部分，其还包含轻链可变区，所述轻链可变区包含LCDR1、LCDR2和/或LCDR3序列，其中所述LCDR1序列包含氨基酸序列RSSQSLVHSNGNTYLE (SEQ ID NO:5)；所述LCDR2序列包含氨基酸序列KVSNRFS (SEQ ID NO:6)；和/或所述LCDR3序列包含氨基酸序列FQGSFVPLT (SEQ ID NO:7)。4.如权利要求3所述的抗体或其抗原结合部分，其中所述轻链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO: 8所示。5.如权利要求1所述的抗体或其抗原结合部分，其中所述抗原结合部分选自：Fab片段、Fab
’
...

【专利技术属性】
技术研发人员：张博文，康志云，王怡，郑新越，杨志云，李晓英，王月丹，王铁山，
申请(专利权)人：北京第一生物化学药业有限公司，
类型：发明
国别省市：