一种凝结芽孢杆菌H-1的表达载体及其构建方法与应用技术

本发明专利技术公开了一种凝结芽孢杆菌H

【技术实现步骤摘要】
一种凝结芽孢杆菌H
‑
1的表达载体及其构建方法与应用


[0001]本专利技术涉及基因工程领域，尤其涉及一种基于接合转移方法转化凝结芽孢杆菌H
‑
1的表达载体及其应用。

技术介绍

[0002]嗜热凝结芽孢杆菌(Bacillus coagulans)是芽孢杆菌属的重要成员，是一种革兰氏阳性，兼性厌氧，非致病性，产孢子、产乳酸菌。最佳生长温度为45～60℃，最佳生长pH值6.5～7.0。嗜热凝结芽孢杆菌具有耐热、适合开放式发酵、兼性厌氧、低能耗、高碳代谢速率、高转化率等优势，不仅是重要的益生菌，在工业上也具有重要地位。
[0003]异源表达系统是改造微生物，拓展微生物菌株应用范围的有力工具，已经在生物催化中被广泛的应用，例如精细化工生产、生物先修复和生物脱硫。合适的异源表达系统不仅可以使微生物的菌株改造或者构建变得容易，可以赋予基因工程菌优良的特性，使得利用生物催化剂进行大规模生产更经济可行。目前，只有很少的基因操作工具可以在凝结芽孢杆菌中工作，而且转化效率极低，很难进行操作。这限制了嗜热凝结芽孢杆菌的优良本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种凝结芽孢杆菌H
‑
1的表达载体，其特征在于，包括来源于载体pNW33N的复制子ori、复制子repB，来源于载体pKVM1的DNA转移起始位点oriT，抗性基因。2.如权利要求1所述的表达载体，其特征在于，所述抗性基因为四环素抗性基因Tet
r
，载体命名为pNWMT，所述载体pNWMT的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。3.如权利要求1所述的表达载体，其特征在于，所述抗性基因为卡那霉素抗性基因Kan
r
，载体命名为pNWMK，所述载体pNWMK的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。4.如权利要求2所述的表达载体，其特征在于，所述载体还包括反义RNA表达模块。5.如权利要求4所述的表达载体，其特征在于，所述反义RNA表达模块包括启动子P
ldh1
、限制酶识别位点、反义RNA序列、终止子TB5和终止子rrnB T1。6.如权利要求5所述的表达载体，其特征在于，所述反义RNA序列以甲基转移酶hsdM846为目标基因，载体命名为pNWMTAS，所述载体pNWMTAS的核苷酸序列如SE...

【专利技术属性】
技术研发人员：陶飞，直家辉，孙舒扬，许平，
申请(专利权)人：上海交通大学，
类型：发明
国别省市：