猪流行性腹泻病毒毒株、灭活疫苗及其应用制造技术

本发明专利技术提出了猪流行性腹泻病毒毒株、灭活疫苗及其应用，该毒株命名为猪流行性腹泻病毒PEDV

【技术实现步骤摘要】
猪流行性腹泻病毒毒株、灭活疫苗及其应用


[0001]本专利技术属于病毒疫苗
，具体涉及猪流行性腹泻病毒毒株、灭活疫苗及其应用。

技术介绍

[0002]猪流行性腹泻病毒（Porcine epidemic diarrhea virus，PEDV）是目前在全球范围内广泛流行的冠状病毒。PEDV主要侵害各日龄猪，尤其可感染仔猪小肠，并迅速导致仔猪产生水样腹泻，伴随呕吐、脱水等临床症状，致其死亡率可达100%。成年猪不发生腹泻，但常伴有精神萎靡不振，食欲下降等症状。PEDV于1971年首次在英国发现。在我国，PEDV于1984年首次在猪小肠原代细胞中分离。在2010年以前，PEDV在我国猪场的感染情况具有散发和区域性特征，并未爆发大规模流行。2010年10月，在南方诸省开始出现PEDV的急性爆发并迅速蔓延至全国，即使接种了疫苗的哺乳仔猪也未能幸免。仔猪症状主要表现为黄色水样腹泻，体重下降，最后死于严重的脱水。经确认此次流行的毒株为变异毒株，应用荧光定量PCR检测各省平均的感染率为58.32% 。进一步实验表明，该毒株感染仔猪后具有PEDV的典型症状本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一株猪流行性腹泻病毒毒株，其特征在于，命名为猪流行性腹泻病毒PEDV
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CH/GM2018，该毒株于2021年10月20日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏号为CCTCC NO: V202174。2.根据权利要求1所述的猪流行性腹泻病毒毒株，其特征在于，所述猪流行性腹泻病毒PEDV
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CH/GM2018于2018年从山东省高密市PEDV阳性猪场病猪肠道采集分离所得。3.根据权利要求1所述的猪流行性腹泻病毒毒株，其特征在于，其S基因全长4158bp，属于GII
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b基因亚型，相对于经典疫苗株CV777，氨基酸序列在58
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59位有4个aa插入，135
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136位有1个aa；在158位有2个aa缺失，1194位有1个缺失，所述猪流行性腹泻病毒PEDV
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CH/GM2018与GI型CV777毒株同源性为92.8%，与GII型HM2017同源性最高为98.3%。4.根据权利要求1所述的猪流行性腹泻病毒毒株，其特征在于，其分离鉴定方法，包括以下步骤：病料处理：将经RT
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PCR检测为PEDV阳性的具有腹泻症状的病仔猪的肠道内容物用DMEM制成悬液，涡旋震荡混匀，冻融一次后高速离心，取上清液过滤后得病毒悬液，冷冻备用；分离筛选：将所得的病毒悬液接种到形成单层的Vero细胞培养层中，在培养箱中感作后弃去接种物，加入含有胰蛋白示磷酸肉汤及胰酶的DMEM培养基培养，每日观察细胞是否产生病变CPE，若无病变则于第5天收集培养液冻融一次后继续盲传；所得的病毒中命名为猪流行性腹泻病毒PEDV
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CH/GM2018的毒株传至第五代可见细胞产生明显...

【专利技术属性】
技术研发人员：秦立廷，王潇博，吕闯，陈婷，
申请(专利权)人：山东新希望六和集团有限公司新希望六和股份有限公司，
类型：发明
国别省市：