【技术实现步骤摘要】
一种从胎盘中提取自然杀伤性细胞的方法
[0001]本专利技术涉及生物
,具体而言,涉及一种从胎盘中提取自然杀伤性细胞的方法。
技术介绍
[0002]胎盘是怀孕期间连接胎儿和母体最重要的器官之一,在哺乳动物胚胎发育过程中扮演很重要的角色,离开胎盘胚胎将无法存活。胎盘主要由3部分组成,即羊膜、叶状绒毛膜和底蜕膜,是胚胎与母体组织的结合体,在怀孕期间主要介导胎儿与母体之间的物质交换,除此之外,还有分泌、免疫调节等相关功能。
[0003]通常情况下,胎盘属于分娩后的废弃物。随着科技的进步,因为胎盘含有滋养层干细胞、造血干细胞、上皮干细胞和间充质干细胞多种干细胞群组,因而可作为这些干细胞的来源在临床上拥有巨大的应用潜力。
[0004]胎盘中含有丰富的细胞群,尤其是作为脐带血造血干细胞的补充,胎盘造血干细胞的提取受到越来越多学者的关注,已成为临床造血干细胞移植治疗血液病及其他恶性疾病的来源。
[0005]胎盘作为一种重要的间充质干细胞来源,已被众多科学家、临床干细胞研究者、细胞企业的作为研究对象,取得一定可 ...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种胎盘中自然杀伤性细胞的提取方法,其特征在于,包括以下步骤:(a)获取胎盘小叶:胎盘经清洗消毒后,从子面剪取胎盘小叶组织,机械法破碎成组织碎块;(b)提取淋巴细胞:生理盐水冲洗(a)中组织碎块获得胎盘血,经淋巴分离液收取获得单个核细胞;(c)培养自然杀伤性细胞:(b)中得到的单个核细胞经培养定向分化得到自然杀伤性细胞。2.根据权利要求1所述的提取方法,其特征在于,(c)中培养的培养液包括含有200
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270U/ml IL
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2的GT
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T551 H3、体积百分比为1%
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6%同源血清和滋养细胞;优选地,(c)中单核细胞与滋养细胞的数量比为1:(0.5
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2),优选为1:1。3.根据权利要求1所述的提取方法,其特征在于,所述培养自然杀伤性细胞的步骤包括:将所述单个核细胞接种至培养液中静置培养,第4天收集细胞进行换液培养,然后维持细胞浓度在5
×
105/ml
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1.0
×
106/ml的条件下培养,第14
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15天收获得到自然杀伤性细胞;优选地,所述单个核细胞接种的密度为5
×
105/ml...
【专利技术属性】
技术研发人员:朱学义,张云国,薛晓锋,王迎耀,王春强,徐丹,
申请(专利权)人:河南省组织细胞库有限公司,
类型:发明
国别省市:
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