猪骨髓细胞的制备方法及猪骨松质粉碎装置制造方法及图纸

本发明专利技术公开一种猪骨髓细胞的制备方法及猪骨松质粉碎装置，所述猪骨髓细胞的制备方法包括以下步骤：获得猪骨组织样品；在2～8℃的环境下，将所述猪骨组织样品中的骨松质粉碎，流入细胞洗涤液中，得到富含骨松质与细胞的混合液；将所述混合液过滤，获得细胞洗涤液；将所述细胞洗涤液离心、固液分离，获得PBM沉淀物；将所述PBM沉淀物重悬，加入红细胞裂解液，离心处理，获得不含红细胞的PBM沉淀物；将所述不含红细胞的PBM沉淀物离心洗涤，再进行细胞培养，获得猪骨髓细胞。本发明专利技术旨在提供一种制备方法，以制备出低污染、质量好，制备量高的猪骨髓细胞。细胞。细胞。

【技术实现步骤摘要】
猪骨髓细胞的制备方法及猪骨松质粉碎装置


[0001]本专利技术涉及细胞制备
，具体涉及一种猪骨髓细胞的制备方法及猪骨松质粉碎装置。

技术介绍

[0002]骨髓(Bone Marrow)是机体内具有造血、免疫和防御机能，柔软且富有血液的组织。它存在于骨松质腔隙和长骨骨髓腔内，由多种类型的细胞和网状结缔组织构成，可分为红骨髓(Red Bone Marrow)和黄骨髓(Yellow Bone Marrow)。红骨髓是人体的造血器官，分布于骨髓腔内，哈佛氏管内也含有少量，它主要是由血窦和造血组织构成。初生时期，骨内充满的全部是红骨髓，具有活跃的造血功能。成年后，红骨髓主要存在于一些扁骨、不规则骨和长骨的骨骺内，以椎骨、胸骨和髂骨处最为丰富，造血功能也最为活跃。除造血功能之外，红骨髓还有防御、免疫和创伤修复等多种功能。幼龄动物的骨髓腔内全部为红骨髓，随着日龄增长，长骨内的红骨髓，逐渐被脂肪组织所代替，成为黄骨髓。正常成年动物的红骨髓与黄骨髓各占一半。黄骨髓主要由脂肪组织构成，即骨髓的基质细胞大量变为脂肪细胞，仅有少量幼稚细胞团，其造血功能微弱。...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种猪骨髓细胞的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：获得猪骨组织样品；在2～8℃的环境下，将所述猪骨组织样品中的骨松质粉碎，流入细胞洗涤液中，得到富含骨松质与细胞的混合液；将所述混合液过滤，获得细胞洗涤液；将所述细胞洗涤液离心、固液分离，获得PBM沉淀物；将所述PBM沉淀物重悬，加入红细胞裂解液，离心处理，获得不含红细胞的PBM沉淀物；将所述不含红细胞的PBM沉淀物离心洗涤，进行细胞培养，获得猪骨髓细胞。2.如权利要求1所述的猪骨髓细胞的制备方法，其特征在于，在2～8℃的环境下，将所述猪骨组织样品中的骨松质粉碎，流入细胞洗涤液中，得到富含骨松质与细胞的混合液的步骤包括：在2～8℃的环境下，将所述猪骨组织样品浸泡在所述洗涤液中，且距离液面不低于5mm，在所述洗涤液中，将所述猪骨组织样品中的骨松质粉碎，使其与所述洗涤液混合，得到富含骨松质和细胞的混合液。3.如权利要求1所述的猪骨髓细胞的制备方法，其特征在于，所述洗涤液包括含80～150IU/ml肝素、100～200U/ml青霉素和0.1～0.2mg/ml链霉素的无菌磷酸盐缓冲液。4.如权利要求1所述的猪骨髓细胞的制备方法，其特征在于，将所述富含骨松质和细胞的混合液过滤，获得细胞洗涤液的步骤包括：采用100目铜纱网配合纱布过滤所述混合液，获得第一细胞洗涤液和骨松质沉淀，取所述骨松质沉淀，再次加入2～8℃的洗涤液，搅拌均匀后再次过滤，获得第二细胞洗涤液，将所述第一细胞洗涤液和所述第二细胞洗涤液混合获得细胞洗涤液。5.如权利要求1所述的猪骨髓细胞的制备方法，其特征在于，所述红细胞裂解液包括1.2～1.5mol/L NH4Cl、90～110mmol/L KHCO3和8～15mmol/LNa4EDTA，所...

【专利技术属性】
技术研发人员：秦涛，秦伟，张飞雁，胡杨，张栋梁，秦红刚，韩燕，郑良益，郑江涛，何珊，徐松，朱薇，谢红玲，石宝兰，漆世华，
申请(专利权)人：国药集团动物保健股份有限公司，
类型：发明
国别省市：