【技术实现步骤摘要】
蛋白质O-岩藻糖基转移酶OsPOFUT1编码基因及其酶和制备与应用
[0001]本专利技术涉及一种蛋白质O-岩藻糖基转移酶OsPOFUT1的基因序列及其制备方法。本专利技术还提供了该蛋白质O-岩藻糖基转移酶的重组质粒和重组基因工程菌株,并且提供了检测蛋白质O-岩藻糖基转移酶活性的方法。
技术介绍
[0002]蛋白的O-岩藻糖基化是岩藻糖通过-O-糖苷键与蛋白的Ser或Thr残基相连所形成的一类糖基化修饰形式。动物方面的研究表明,能发生O-岩藻糖基化的蛋白质存在明显的序列特征,主要发生在含表皮生长因子样(EGF)重复序列和血小板反应蛋白1型重复序列(TSR)的蛋白上。这两种不同特征蛋白质底物的O-岩藻糖基化分别由蛋白O-岩藻糖基转移酶1(POFUT1)和POFUT2介导催化完成。O-岩藻糖可以继续被其他糖修饰,延长糖链,最终能够形成两种不同的糖型。而在复杂的生物体内,糖链在一定概率下不会完整地延伸,相对应地,不同糖链长度的O-岩藻糖基化也发挥着不同的功能。如NOTCH蛋白的配体结合域需要构成特定糖基化模式以完成与配体的结合。< ...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种蛋白质O-岩藻糖基转移酶OsPOFUT1的编码基因,其核苷酸序列具有如下特征中的一种或二种以上:1)具有序列表中SEQ ID NO.1的脱氧核糖核酸(DNA)序列;2)编码SEQ ID NO.2氨基酸序列的脱氧核糖核酸(DNA)序列;3)对序列表中SEQ ID NO.1的脱氧核糖核酸(DNA)序列进行一个或两个以上核苷酸取代、缺失或添加而得到的编码具有蛋白质O-岩藻糖基转移酶活性的核苷酸序列。2.一种权利要求1所述的蛋白质O-岩藻糖基转移酶OsPOFUT1的编码基因编码的蛋白质O-岩藻糖基转移酶,其特征在于:其氨基酸序列具有如下特征中的一种或二种:1)序列表中SEQ ID NO.2从氨基端开始的氨基酸残基序列;2)对序列表中SEQ ID NO.2所示的氨基酸序列进行一个或两个以上氨基酸取代、缺失或添加而形成的具有蛋白质O-岩藻糖基转移酶活性的氨基酸序列。3.按照权利要求2所述的蛋白质O-岩藻糖基转移酶,其特征在于:该酶具有将二磷酸鸟苷-岩藻糖(GDP-Fucose)以O-糖肽键形式转移到具有表皮生长因子样重复序列(Epidermal Growth Factor Repeat)蛋白质上的活性。4.一种权利要求2或3所述的蛋白质O-岩藻糖基转移酶的制备方法,其特征在于:是将蛋白质O-岩藻糖基转移酶OsPOFUT1的编码基因克隆入重组表达载体,导入宿主细胞,获得重组表达的蛋白质O-岩藻糖基转移酶;上述蛋白质O-岩藻糖基转移酶OsPOFUT1的编码基因,其核苷酸序列具有如下特征中的一种或二种以上:1)具有序列表中SEQ ID NO.1的脱氧核糖核酸(DNA)序列,2)编码SEQ ID NO.2氨基酸序列的脱氧核糖核酸(DNA)序列,3)对序列表中SEQ ID NO.1的脱氧核糖核酸(DNA)序列进行一个或两个以上核苷酸取代、缺失或添...
【专利技术属性】
技术研发人员:尹恒,贾晓晨,梁蓉,
申请(专利权)人:中国科学院大连化学物理研究所,
类型:发明
国别省市:
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