一种新冠病毒核酸检测阳性质控品及其制备方法和用途技术

本发明专利技术属于病毒检测技术领域，涉及一种新冠病毒核酸检测阳性质控品及其制备方法和用途，所述阳性质控品由假病毒培养物，与扩增标签基因的引物、探针和RT

【技术实现步骤摘要】
一种新冠病毒核酸检测阳性质控品及其制备方法和用途


[0001]本专利技术属于病毒检测
，涉及一种新冠病毒核酸检测阳性质控品及其制备方法和用途。

技术介绍

[0002]冠状病毒是一个大型病毒家族，已知可引起感冒及中东呼吸综合征(MERS) 和严重急性呼吸综合征(SARS)等较严重疾病。新型冠状病毒(简称新冠病毒) 是以前从未在人体中发现的冠状病毒新毒株。
[0003]人感染了冠状病毒后常见体征有呼吸道症状、发热、咳嗽、气促和呼吸困难等。在较严重病例中，感染可导致肺炎、严重急性呼吸综合征、肾衰竭，甚至死亡。新冠肺炎病例具有很强的传染性，病例感染病毒后，首先累及到肺，表现在肺脏里面有实变，有大量的渗出，有炎症细胞因子的侵润，和炎症细胞大量的浸润等。同时，在小的支气管里看到很多分泌物，堵塞了小气道，影响了气体的交换。电镜下肺里还能够看到病毒颗粒。同时用核酸检测方法，发现病毒核酸。
[0004]在新冠病毒实验室检测中，实验过程的质量控制尤为重要，必须使用质控品和阴阳性对照，才能保证结果的可靠性。每批次检测时，应当随机放入至少1份弱阳本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种新冠病毒核酸检测阳性质控品，其特征在于，所述阳性质控品由假病毒培养物，与扩增标签基因的引物、探针和RT
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PCR反应液共同组成；所述假病毒培养物由ORF1ab基因、N基因、E基因和标签基因构建重组质粒，转座，DNA的分离提取，转染，分离获得；所述标签基因的核苷酸序列如SEQ ID No.4所示；检测所述标签基因的上游引物如SEQ ID No.5所示，下游引物如SEQ ID No.6所示；检测所述标签基因的探针的序列如SEQ ID No.7所示。2.一种权利要求1所述的新冠病毒核酸检测阳性质控品的制备方法，其特征在于，具体包括如下步骤：S1，目的基因的获得：分别扩增获得ORF1ab基因，N基因，E基因，合成标签基因；所述ORF1ab基因的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示，所述N基因的核苷酸序列如SEQ ID No.2所示，所述E基因的核苷酸序列如SEQ ID No.3所示；S2，构建重组质粒：将ORF1ab基因、N基因、E基因和标签基因酶切并连接至pFastBac载体构建重组质粒pFastBac
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X，转化至感受态细胞，挑选阳性单克隆进行扩大培养并提取质粒；S3，重组质粒pFastBac
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X的转座：将重组质粒pFastBac
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X转化至DH10BacTM感受态细胞，蓝白斑筛选，挑选白色克隆；S4，重组Bacmid
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X DNA的分离提取：挑选的白色克隆菌，培养后提取DNA获得重组Bacmid
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X DNA；S5，重组Bacmid
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X转染sf9细胞；S6，病毒原种的分离与贮存：当细胞出现感染迹象时，离心获得含病毒的上清液，即为假病毒培养物，与检测所述标签基因的引物、探针和RT
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PCR反应液共同组成新冠病毒核酸检测阳性质控品。3.根据权利要求2所述的新冠病毒核酸检测...

【专利技术属性】
技术研发人员：马江涛，蒯文和，张银豪，赵建华，马学平，高建炜，刘翔，袁芳，曹慜，魏开心，石安琪，
申请(专利权)人：宁夏回族自治区疾病预防控制中心宁夏回族自治区性病艾滋病防治中心，
类型：发明
国别省市：