一种同时检测GPV、GoAstV和GPMV的Nano-PCR检测方法技术

本发明专利技术公开了一种同时检测GPV、GoAstV和GPMV的Nano

【技术实现步骤摘要】
一种同时检测GPV、GoAstV和GPMV的Nano
‑
PCR检测方法


[0001]本专利技术涉及分子生物学
，更具体的说是涉及一种同时检测GPV、GoAstV和GPMV的Nano
‑
PCR检测方法。

技术介绍

[0002]鹅细小病毒病又称小鹅瘟，是由鹅细小病毒(Goose parvovirus，GPV)引起的一种以渗出性肠炎为主要特征的鹅的急性、接触性传染病，主要侵害20日龄以下的雏鹅，传播速度快，发病率和致死率都较高。鹅星状病毒病又称雏鹅痛风，是一种由鹅星状病毒(Goose astrovirus，GoAstV)引起的以严重关节痛风、出血、肾肿胀为主要特征的新型鹅病，发病率达80％，死亡率高达50％；经病毒的分离培养、生物学特性和基因组分析，确定病原体为一种新型鹅星状病毒。鹅副黏病毒病又称鹅新城疫，是一种由I型鹅副黏病毒(goose paramyxovirus，GPMV)引起的以肠道糠麸样溃疡、胰腺和脾脏肿大并有大小不一的灰白色坏死灶为主要特征的鹅的急性、高度接触性传染病，各个日龄的鹅均易感，2周龄以本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种同时检测GPV、GoAstV和GPMV的Nano
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PCR检测方法，其特征在于，具体步骤如下：(1)样品预处理，获得cDNA；(2)以步骤(1)获得的cDNA为模板，利用引物GPV
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Nano
‑
F/R、GoAstV
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Nano
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F/R、GPMV
‑
Nano
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F/R进行Nano
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PCR检测；所述Nano
‑
PCR检测的反应体系为：5U/μL Taq enzyme Mix 0.4μL，2
×
Nano
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qPCRbuffer 12.5μL，模板3μL，三种病毒的上下游引物各1.25μL，ddH2O 1.6μL，共25μL；所述三种病毒的上下游引物终浓度均为0.5μM；反应条件为：94℃预变性3min；94℃变性30s，50℃退火30s，72℃延伸1min，循环35次；72℃延伸10min；(3)对反应产物进行琼脂糖凝胶电泳分析。2.根据权利要求1所述的一种同时检测GPV、GoAstV和GPMV的Nano
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PCR检测方法，其特征在于，步骤(2)所述引物GPV
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Nano
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F/R、GoAstV
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Nano
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F/R、GPMV
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Nano
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F/R的具体序列如下：GPV
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Nano
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F：5

【专利技术属性】
技术研发人员：苗艳，朱庆贺，陈亮，兰世捷，张蕾，沈思思，李丹，冯万宇，钟鹏，金振华，张红，田秋丰，刘秋瑾，张备，武晓东，姚橹，李白，
申请(专利权)人：黑龙江省农业科学院畜牧兽医分院，
类型：发明
国别省市：