铜团簇、胸腺嘧啶修饰的透明质酸和多聚铜团簇、其制备方法和应用技术

铜团簇、胸腺嘧啶修饰的透明质酸和多聚铜团簇、其制备方法和应用。本发明专利技术提供了铜团簇(CuNCs)、胸腺嘧啶修饰的透明质酸(TMHA)和多聚铜团簇(PCuNCs)、以及制备方法及其在检测、诊断和治疗中的应用；例如帕金森氏病。TMHA由式I表示：其中，HA中胸腺嘧啶的取代度在1

【技术实现步骤摘要】
铜团簇、胸腺嘧啶修饰的透明质酸和多聚铜团簇、其制备方法和应用
[0001]本专利技术专利申请是基于2019年1月16日提交的专利技术名称为“铜团簇、胸腺嘧啶修饰的透明质酸和多聚铜团簇、其制备方法和应用”的中国专利申请号 2019100391135的分案申请。


[0002]本专利技术一般涉及纳米药物
，并且更具体地涉及尤其涉及铜团簇 (CuNCs)、胸腺嘧啶修饰的透明质酸(TMHA)和多聚铜团簇(PCuNCs)、以及制备方法及其在检测、诊断和治疗中的应用；例如帕金森氏病。

技术介绍

[0003]神经退行性疾病是人类健康的主要威胁之一。其共同的病理特征是神经细胞中蛋白质的异常缠结和淀粉样变性，以及相关神经元凋亡和神经损伤。帕金森病(PD)是第二常见的神经退行性疾病，特征是震颤、肌肉僵硬、运动迟缓、姿势不稳定和运动障碍。PD主要发生在老年人中，发病率随年龄增长而增加。据保守估计，世界上PD患者的数量已经超过1000万。然而，PD的病因尚不清楚。就临床治疗而言，尽管美国FDA批准了几种药物用于治疗轻度和中度帕金森病，但这些药物是神经递质调节药物，只能暂时改善患者的认知或运动功能。停药后症状就会反弹。目前尚无药物能终止或逆转PD的病理过程。因此，开发新的药物治疗帕金森病具有极其重要的意义。
[0004]PD的主要病理特征是脑干、脊髓和皮层中多巴胺能神经元的缺失和细胞内蛋白样包涵体的存在，称为Lewy小体。Lewy小体主要由变性α
‑
synuclein(α
‑
syn) 聚集形成的淀粉样纤维组成。α
‑
syn位于神经元的突触前膜末端，细胞内的自然状态为可溶性和开放状态。在病理条件下发生的α
‑
syn错误折叠，产生β片状结构，这些结构又聚集和纤毛化形成Lewy小体病变。
[0005]铜是人体许多生物功能所必需的稀有元素。α
‑
syn对金属离子具有很强的亲和力，如Cu
2+
。Cu
2+
‑
α
‑
syn相互作用与氧化应激的增加和有毒低聚物的产生有关，这些低聚物在体外在膜双层中形成孔状结构，改变电导活性，在体内破坏膜导致细胞死亡。此外，铜离子可以与多巴胺(DA)协同结合到α
‑
syn，在很大程度上增强α
‑
syn的纤毛化。在PD患者中发现铜稳态失调。最近的研究显示黑质(SN) 中的总组织铜减少；但在脑脊液中发现高水平的非结合铜，可能导致运动障碍。高水平的Cu
2+
与PD相关。在此基础上，旨在调节PD患者铜稳态失调的治疗已被广泛评估。PD动物模型的临床前研究调查了先前描述的铜螯合剂氯喹在治疗中的潜在应用，并显示SN神经元存活。此外，对铜离子络合物Cu
2+
双乙酰双(4
‑
甲基硫代氨基脲)(Cu
2+
(atsm))在四种不同的PD动物模型中的体内评估显示神经保护、认知功能的改善和运动功能的恢复(Giampietro R,2018；Kozlowski H,2012； Tristan
‑
Lopez L,2014)。体外研究表明形成Cu
2+
‑
α
‑
SYN复合体(DuZik CG,2011) 和铜离子依赖的α
‑
Syn胞内聚集物(McRayalFA,2018)。
[0006]铜团簇(CuNCs)是一种介于铜原子和铜纳米颗粒之间的物质，通常由几个到几十个铜原子组成，并在外面包裹着配体以保护其稳定存在(Yao Q,2018)。铜团簇由于具有独特的尺寸依赖的光电性质，常被用于纳米催化剂、生物传感、细胞标记以及光电相关的纳米器件研究(Jin R,2016；Liu X,2018)。利用铜团簇(CuNCs)来治疗PD尚未见报道，利用某种化合物在体内直接将Cu
2+
直接转变为铜团簇(CuNCs)或多聚铜团簇(PCuNCs)则更未见报道。
[0007]Manna等公开了一种用于药物递送的稳定多层膜，是基于在壳聚糖和透明质酸(HA)骨架上所替代的DNA碱基(腺嘌呤和胸腺嘧啶)对之间的氢键而构建的。 Chitosan用腺嘌呤修饰，而HA用胸腺嘧啶修饰。随后，利用DNA碱基对通过氢键的相互作用，将这两种聚合物依次吸附在平坦的基底上。在此文中，以胸腺嘧啶修饰的HA和腺嘌呤修饰的壳聚糖配对使用，用于药物递送的被动载体。为了达到胸腺嘧啶修饰的HA和腺嘌呤修饰的壳聚糖之间的相互作用所需强度，选用了高取代度的胸腺嘧啶修饰的HA，例如超过75％(Manna U,2009)。
[0008]杨等公开了一种基于聚(胸腺嘧啶)模板选择性形成铜纳米粒子(CuNPs)和炔
ꢀ‑
叠氮环加成“点击”反应的碱性磷酸酶荧光检测方法，其中Cu
+
被用作Cu资源，用于在维生素C和DNA模板存在的条件下的CuNPs的合成(Yang D；2018)。然而，杨等没有提示利用胸腺嘧啶作为配体来形成铜团簇。

技术实现思路

[0009]本专利技术提供一个或多个配体修饰的铜团簇(CuNCs)。在一些实施例中，所述配体修饰的铜团簇的直径在0.5
‑
5nm的范围内。
[0010]在所述铜团簇的一些实施例中，所述配体修饰的铜团簇的直径在0.5
‑
3nm的范围内。
[0011]在所述铜团簇的一些实施例中，所述配体修饰的铜团簇的直径在0.5
‑
2.5nm 的范围内。
[0012]在所述铜团簇的一些实施例中，所述配体包括胸腺嘧啶，L(D)
‑
半胱氨酸及其他半胱氨酸衍生物，如N
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异丁酰基
‑
L
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半胱氨酸(L
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NIBC)、N
‑
异丁酰基
‑
D
‑ꢀ
半胱氨酸(D
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NIBC)、N
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乙酰基
‑
L
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半胱氨酸、N
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乙酰基
‑
D
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半胱氨酸等；含半胱氨酸的寡肽及其衍生物,包括但不局限于含半胱氨酸的二肽、三肽、四肽及其它肽，如：L
‑
半胱氨酸
‑
L
‑
精氨酸二肽(CR)、L
‑
精氨酸
‑
L
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半胱氨酸二肽(RC)、 L
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半胱氨酸L
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组氨酸(CH)、甘氨酸
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L
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半胱氨酸
‑
L
‑
精氨酸三肽(GCR)、L
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脯氨酸
‑
L
‑
半胱氨酸
‑
L
‑
精氨酸三肽(PCR)、L
‑<本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一个或多个配体修饰的铜团簇(CuNCs)，其特征在于，所述配体修饰的铜团簇的直径在0.5
‑
5nm的范围内。2.根据权利要求1所述铜团簇，其特征在于，所述配体修饰的铜团簇的直径在0.5
‑
3nm的范围内。3.根据权利要求1所述铜团簇，其特征在于，所述配体修饰的铜团簇的直径在0.5
‑
2.5nm的范围内。4.根据权利要求1所述铜团簇，其特征在于，所述配体包括胸腺嘧啶，L(D)
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半胱氨酸及其他半胱氨酸衍生物，如N
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异丁酰基
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L
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半胱氨酸(L
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NIBC)、N
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异丁酰基
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D
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半胱氨酸(D
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NIBC)、N
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乙酰基
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L
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半胱氨酸、N
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乙酰基
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D
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半胱氨酸等；含半胱氨酸的寡肽及其衍生物,包括但不局限于含半胱氨酸的二肽、三肽、四肽及其它肽，如：L
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半胱氨酸
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L
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精氨酸二肽(CR)、L
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精氨酸
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L
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半胱氨酸二肽(RC)、L
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半胱氨酸L
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组氨酸(CH)、甘氨酸
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L
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半胱氨酸
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L
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精氨酸三肽(GCR)、L
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脯氨酸
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L
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半胱氨酸
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L
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精氨酸三肽(PCR)、L
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谷胱甘肽(GSH)、甘氨酸
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L
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丝氨酸
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L
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半胱氨酸
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L
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精氨酸...

【专利技术属性】
技术研发人员：孙涛垒，常柏松，
申请(专利权)人：武汉广行科学研究有限公司，
类型：发明
国别省市：