唐菖蒲伯克霍尔德氏菌的LAMP检测引物组、试剂盒以及冻干微球的制备方法技术

本发明专利技术公开了一种唐菖蒲伯克霍尔德氏菌的LAMP检测引物组、试剂盒以及冻干微球的制备方法，属于核酸检测领域。该检测引物组针对唐菖蒲伯克霍尔德氏菌的16S～23S rRNA保守序列设计，检测引物组包括外引物F3、外引物B3、内引物FIP、内引物BIP、环引物LF和环引物LB。包含这种检测引物组的冻干微球的制备方法包括：将上述检测引物组与LAMP反应基液混合，得到扩增反应体系；将扩增反应体系与冻干保护剂混合，逐滴滴入液氮中速冻成球后，冷冻干燥。这种检测方法，利用上述冻干微球，能够简单、高效的检测出唐菖蒲伯克霍尔德氏菌存在与否，进而判断出检测样本中是否含有米酵菌酸毒素，特异性强，不易出现假阳性。不易出现假阳性。不易出现假阳性。

【技术实现步骤摘要】
唐菖蒲伯克霍尔德氏菌的LAMP检测引物组、试剂盒以及冻干微球的制备方法


[0001]本专利技术属于基因检测
，具体涉及一种唐菖蒲伯克霍尔德氏菌的LAMP检测引物组、试剂盒以及冻干微球的制备方法。

技术介绍

[0002]唐菖蒲伯克霍尔德氏菌为革兰氏阴性短杆菌、两端钝圆，无牙孢，有鞭毛，在自然界分布广泛。唐菖蒲伯克霍尔德氏菌为兼性厌氧，易在食品表面生长。唐菖蒲伯克霍尔德氏菌可以产生米酵菌酸引起食物中毒，唐菖蒲伯克霍尔德氏菌不耐高温，很容易被高温杀死，但是它所产生的“米酵菌酸”毒素耐热，一般烹调方法不能破坏其毒性。由于唐菖蒲伯克霍尔德氏菌食物中毒流行规模较大、发病率和病死率极高，而且目前缺乏特效的解毒措施。因此唐菖蒲伯克霍尔德氏菌的检测方法是否灵敏、快速至关重要。
[0003]目前米酵菌酸的检测方法的依据是GB 5009.189
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2016《食品安全国家标准食品中米酵菌酸的测定》，用的是高相液相色谱法检测，检测的仪器及试剂成本非常相对较高，除此以外也有用薄层层析、紫外分光光度、ELISA、胶体金试纸条等方法检测唐菖蒲伯本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种唐菖蒲伯克霍尔德氏菌的LAMP检测引物组，其特征在于，所述检测引物组针对唐菖蒲伯克霍尔德氏菌的16S～23S rRNA保守序列设计，所述检测引物组包括外引物F3、外引物B3、内引物FIP、内引物BIP、环引物LF和环引物LB；所述外引物F3的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示；所述外引物B3的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示；所述内引物FIP的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示；所述内引物BIP的核苷酸序列如SEQ ID NO.4所示；所述环引物LF的核苷酸序列如SEQ ID NO.5所示；所述环引物LB的核苷酸序列如SEQ ID NO.6所示。2.根据权利要求1所述的唐菖蒲伯克霍尔德氏菌的LAMP检测引物组，其特征在于，所述外引物F3和所述外引物B3的浓度均为0.15～0.25μM，所述内引物FIP与所述内引物BIP的浓度均为1.5～1.7μM，所述环引物LF和环引物LB的浓度为0.4～0.8μM。3.一种用于检测唐菖蒲伯克霍尔德氏菌的冻干微球的制备方法，其特征在于，其包括：将如权利要求1或2所述的检测引物组与LAMP反应基液混合，得到扩增反应体系；将所述扩增反应体系与冻干保护剂混合，逐滴滴入液氮中，控制每个液滴的体积为23～28μL，速冻成球后，冷冻干燥。4.根据权利要求3所述的冻干微球的制备方法，其特征在于，所述冷冻干燥的步骤包括...

【专利技术属性】
技术研发人员：许世伟，许远，邵俊影，吴镇宇，王欣，林圣博，
申请(专利权)人：河南中检食安生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：