一种用于等温核酸检测的反应体系、试剂盒制造技术

本发明专利技术提供一种用于等温核酸检测的反应体系，包括UvsX蛋白、UvsY蛋白、单链结合蛋白GP32、DNA聚合酶和Cas12a蛋白；实现对目的片段的一步法扩增及检测。本发明专利技术提供的等温核酸检测方法，不需要大型仪器设备，可在短时间内，实现目的片段的检测，适用于现场检测及适用于大规模的筛选。该方法可将等温扩增和CRISPR

【技术实现步骤摘要】
一种用于等温核酸检测的反应体系、试剂盒


[0001]本专利技术涉及生物
，具体涉及一种等温核酸检测方法及试剂盒。

技术介绍

[0002]CRISPR(Clustered regularly interspaced short palindromic repeats)是细菌和古细菌种抵御病毒入侵的一种获得性免疫的方式。当病毒入侵时，细菌或古细菌生成对应的能识别病毒基因组的crRNA，可以引导具有核酸内切酶活性的Cas蛋白对病毒靶序列进行识别和切割。
[0003]在2015年，一种全新的第二类CRISPR
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Cas系统
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V型系统被发现，该系统中的效应蛋白被命名为Cas12a蛋白，又叫Cpf1。Cas12a是CRISPR
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Cas系统第2家族成员，其效应器是Cas12a
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crRNA二聚体复合体，Cas12a的crRNA识别靶序列5'端富含T的PAM位点，即5'
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TTTV
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3'。Cas12a在切割靶双链DNA(double 本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种用于等温核酸检测的反应体系，其特征在于，包括UvsX蛋白、UvsY蛋白、单链结合蛋白GP32、DNA聚合酶和Cas12a蛋白；所述UvsX蛋白为如下任意一种：A1)氨基酸序列如SEQ ID NO:8所示；A2)SEQ ID NO:8所示的氨基酸序列的任意一个或几个氨基酸残基经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加得到的与A1)所示的蛋白具有90％以上的同一性的蛋白；所述UvsY蛋白为如下任意一种：B1)氨基酸序列如SEQ ID NO:9所示；B2)SEQ ID NO:9所示的氨基酸序列的任意一个或几个氨基酸残基经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加得到的与B1)所示的蛋白具有90％以上的同一性的蛋白；单链结合蛋白GP32为如下任意一种：C1)氨基酸序列如SEQ ID NO:10所示；C2)SEQ ID NO:10所示的氨基酸序列的任意一个或几个氨基酸残基经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加得到的与C1)所示的蛋白具有90％以上的同一性的蛋白；所述Cas12a蛋白为如下任意一种：D1)氨基酸序列如SEQ ID NO:11所示；D2)SEQ ID NO:11所示的氨基酸序列的任意一个或几个氨基酸残基经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加得到的与D1)所示的蛋白具有90％以上的同一性的蛋白。2.根据权利要求1所述的反应体系，其特征在于，所述UvsX蛋白、UvsY蛋白、单链结合蛋白GP32、DNA聚合酶、Cas12a蛋白的质量比为1：(0.2
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4.6)：(0.77
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2.3)：(0.2
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0.8)：(0.1
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1.2)；可选的，所述UvsX蛋白、U...

【专利技术属性】
技术研发人员：ꢀ七四专利代理机构，
申请(专利权)人：北京盛因生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：