一种新型无血清细胞冻存液配方组成比例

本发明专利技术公开了一种新型无血清细胞冻存液配方，其组成包括以人血清白蛋白为主体，添加10％的DMSO、13.3％的复方电解质注射液和16.70％的右旋糖苷。本发明专利技术通过优化冻存液配方，显著提高了细胞的存活率，降低了污染源，提供了新型无血清细胞冻存液,易制备、易保存、复苏后的细胞活性极高且避免了血清存在的潜在危险。危险。危险。

【技术实现步骤摘要】
一种新型无血清细胞冻存液配方


[0001]本专利技术涉及细胞及生物工程学领域，特别涉及一种新型无血清细胞冻存液配方。

技术介绍

[0002]细胞冻存是将细胞放在低温环境，减少细胞代谢，以便长期储存的一种技术。细胞冻存是细胞保存的主要方法之一，起到了细胞保种的作用。利用冻存技术将细胞置于
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196℃液氮中低温保存，可以使细胞暂时脱离生长状态而将其细胞特性保存起来，这样在需要的时候再复苏细胞用于实验。而且适度地保存一定量的细胞，可以防止因正在培养的细胞被污染或其他意外事件而使细胞丢种，起到了细胞保种的作用。除此之外，还可以利用细胞冻存的形式来购买、寄赠、交换和运送某些细胞。
[0003]目前市面上的冻存液有很多种，其主要保存手段通常含有血清，血清作为一种细胞的营养物质，为细胞提供基本营养物质、提供激素和各种生长因子、提供结合蛋白、提供促接触和生长因子使细胞贴壁免受机械损伤、并且对培养中的细胞起到某些保护作用。因此，血清作为细胞冻存液的一种成分，广泛受到大家的喜爱。但是由于血清的使用是存在一定的批次性，并且，血清的使用并不能满足如胚胎干细胞，间充质干细胞等细胞的冻存。其存在会对细胞具有一定的诱导性。因此，进一步研究一种无血清、耗时短、易制备的细胞冻存液十分必要。

技术实现思路

[0004]本专利技术要解决的技术问题是克服现有技术的缺陷，提供一种新型无血清细胞冻存液配方。
[0005]为了解决上述技术问题，本专利技术提供了如下的技术方案：
[0006]本专利技术一种新型无血清细胞冻存液配方，其组成包括以人血清白蛋白为主体，添加10％的DMSO、13.3％的复方电解质注射液和16.70％的右旋糖苷。
[0007]作为本专利技术的一种优选技术方案，所述DMSO、复方电解质注射液、右旋糖苷这三种物质作为添加剂。
[0008]作为本专利技术的一种优选技术方案，所述DMSO的浓度范围在8％
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10％，复方电解质注射液的度范围在13
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50％，右旋糖苷的度范围在10
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60％。
[0009]作为本专利技术的一种优选技术方案，所述DMSO、复方电解质注射液和右旋糖苷的浓度比为(0.8
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1)：(1.3
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5)∶(1
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6)。
[0010]作为本专利技术的一种优选技术方案，所述DMSO、复方电解质注射液、右旋糖苷的浓度比为1：1.33：1.67。
[0011]作为本专利技术的一种优选技术方案，所述DMSO的为浓度10％为最优选择；复方电解质注射液的浓度13.3％的为最优选择，右旋糖苷的浓度16.7％为最优选择。
[0012]与现有技术相比，本专利技术的有益效果如下：
[0013]本专利技术通过优化冻存液配方，显著提高了细胞的存活率，降低了污染源，提供了新
型无血清细胞冻存液,易制备、易保存、复苏后的细胞活性极高且避免了血清存在的潜在危险。
附图说明
[0014]图1为实施例1、对比例1
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3的细胞复苏活率数据结果图；
[0015]图2为实施例、对比例1
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3的细胞复苏活率细胞结果图及培养三天后的细胞数；
[0016]图3为实施例、对比例1
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3细胞的增殖状态变化。
具体实施方式
[0017]以下本专利技术的优选实施例进行说明，应当理解，此处所描述的优选实施例仅用于说明和解释本专利技术，并不用于限定本专利技术。
[0018]实施例1
[0019]本专利技术提供一种新型无血清细胞冻存液配方，其组成包括以人血清白蛋白为主体，添加10％的DMSO、13.3％的复方电解质注射液和16.70％的右旋糖苷。
[0020]具体的，以10mL为例：人血清白蛋白6mL，添加1mL的DMSO，1.33mL的复方电解质注射液，1.67mL的右旋糖苷。将上述物质混合形成无血清细胞冻存液。
[0021]对比例1
[0022]具体配方为：人血清白蛋白6.25mL，添加0.75mL的DMSO，1.33mL的复方电解质注射液，1.67mL的右旋糖苷，其中对比例1与实施例1的区别在于冻存液配方中的DMSO含量从原先的1％变为0.75％，将上述物质混合形成无血清细胞冻存液。
[0023]对比例2
[0024]具体配方为：人血清白蛋白6mL，添加0.5mL的DMSO，1.33mL的复方电解质注射液，2.17mL的右旋糖苷，对比例2与实施例1的区别在于冻存液配方中的DMSO含量从原先的1％变为0.5％mL，将上述物质混合形成无血清细胞冻存液。
[0025]对比例3
[0026]具体配方为：人血清白蛋白3.5mL，添加1mL的DMSO，3.83mL的复方电解质注射液，1.67mL的右旋糖苷，对比例3与实施例1的区别在于冻存液配方中的复方电解质注射液含量从原先的1.33％变为3.83％，将上述物质混合形成无血清细胞冻存液。
[0027]表1：实施例1、对比例1
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3的细胞复苏活率数据结果
[0028] 实施例1对比例1对比例2对比例3室温放置1h复苏93.86％91.22％68.99％85.95％直接复苏96.21％94.61％67.49％83.75％
[0029]表2：实施例、对比例1
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3细胞的增殖状态变化数据
[0030][0031]本专利技术通过优化冻存液配方，显著提高了细胞的存活率，降低了污染源，提供了新型无血清细胞冻存液,易制备、易保存、复苏后的细胞活性极高且避免了血清存在的潜在危险。
[0032]最后应说明的是：以上所述仅为本专利技术的优选实施例而已，并不用于限制本专利技术，尽管参照前述实施例对本专利技术进行了详细的说明，对于本领域的技术人员来说，其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分技术特征进行等同替换。凡在本专利技术的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本专利技术的保护范围之内。
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种新型无血清细胞冻存液配方，其组成包括以人血清白蛋白为主体，添加10％的DMSO、13.3％的复方电解质注射液和16.70％的右旋糖苷。2.根据权利要求1所述的一种新型无血清细胞冻存液配方，其特征在于，所述DMSO、复方电解质注射液、右旋糖苷这三种物质作为添加剂。3.根据权利要求1所述的一种新型无血清细胞冻存液配方，其特征在于，所述DMSO的浓度范围在8％
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10％，复方电解质注射液的度范围在13
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50％，右旋糖苷的度范围在10
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60％。4.根据权利要求1所述的一...

【专利技术属性】
技术研发人员：曹哲厚，韦俊，吴立前，马悦悦，
申请(专利权)人：杭州原生生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：