多能干细胞定向诱导分化为肝细胞的培养基及培养方法和用途技术

本发明专利技术涉及细胞工程技术领域，具体涉及多能干细胞定向诱导分化为肝细胞的培养基及培养方法和用途。本发明专利技术提供一种培养基组合物，该培养基组合物中含有腺苷酸环化酶激活剂、ALK5抑制剂、生长因子、OSM等因子，利用该培养基能够大大提升由iPSC诱导分化获得的肝细胞的成熟度。表现为ASGR1

【技术实现步骤摘要】
多能干细胞定向诱导分化为肝细胞的培养基及培养方法和用途


[0001]本专利技术涉及细胞工程
，具体涉及多能干细胞定向诱导分化为肝细胞的培养基及培养方法和用途。

技术介绍

[0002]多能干细胞包括胚胎干细胞和诱导的多能干细胞(iPSC)。2006年，山中伸弥在京都大学通过给小鼠成纤维细胞转染四个转录因子OCT3/4、SOX2、MYC和KLF4使之转化为与小鼠胚胎干细胞在形态、基因表达、扩增能力、类胚体和畸胎瘤生成能力、分化潜能等方面极其相似的细胞类型。人诱导的多能干细胞在次年被诱导成功。人多能干细胞具有自我更新和多方向分化潜能，是再生医学中重要的种子细胞。
[0003]在特定的条件下，人iPSC可以诱导成类肝细胞(iHeps)。因为人iPSC的无限扩增能力，理论上可以生产无限量的iHeps。但实际上由于人iPSC等多能干细胞通过无血清培养基分化来的iHeps成熟性仍较低，其在小鼠肝脏移植中细胞整合效率仍不理想。
[0004]因此，亟需开发一种能够提升由多能干细胞诱导分化获得的iHeps(类肝细胞)的成熟度的培养基组成，以及本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种培养基组合物，其特征在于，包括：腺苷酸环化酶激活剂、ALK5抑制剂、生长因子、OSM。2.根据权利要求1所述的培养基组合物，其特征在于，所述腺苷酸环化酶激活剂选自Forskolin、NKH 477、PACAP 1
‑
27、PACAP 1
‑
38、dbcAMP中的至少之一；任选地，所述腺苷酸环化酶激活剂选自Forskolin、NKH 477、dbcAMP中的至少之一；任选地，所述腺苷酸环化酶激活剂为Forskolin。3.根据权利要求2所述的培养基组合物，其特征在于，所述ALK5抑制剂选自SB431542、LY2157299、LY2109761、SB525334、SB505124、GW788388、LY364947、RIPK2、CK1δ、MLK
‑
7K、RepSox、BIBF
‑
0775、TP0427736HCl、A
‑
83
‑
01、SD
‑
208、TEW
‑
7197、LDN
‑
212854、LY 3200882中的至少之一；任选地，所述ALK5抑制剂选自SB431542、GW788388、BIBF
‑
0775、A
‑
83
‑
01、SD
‑
208中的至少之一；任选地，所述ALK5抑制剂为SB431542。4.根据权利要求1所述的培养基组合物，其特征在于，所述腺苷酸环化酶激活剂的浓度为10
‑
80μM，优选20
‑
60μM；任选地，所述ALK5抑制剂的浓度为5
‑
50μM，优选5
‑
25μM。5.根据权利要求1所述的培养基组合物，其特征在于，所述生长因子选自HGF、KGF、IGF、EGF、FGF4中的至少之一；任选地，所述生长因子为HGF；任选地，所述生长因子浓度为5
‑
20ng/mL；任选地，所述OSM的浓度为10
‑
50ng/mL。6.根据权利要求...

【专利技术属性】
技术研发人员：付建，江利香，杨佳银，刘雨晴，
申请(专利权)人：深圳市三启生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：