神经元抗原谱抗体检测试剂盒及其检测方法技术

本发明专利技术公开了一种神经元抗原谱抗体检测试剂盒及其检测方法，包括抗原包被的检测膜条、酶结合物、样本缓冲液、清洗缓冲液及底物液。检测膜条上平行包被有抗原Amphiphysin、CV2、PNMA2(Ma2/Ta)、Ri、Yo及Hu。酶结合物为碱性磷酸酶标记的抗人免疫球蛋白G(IgG)、IgA和IgM中的一种或几种。检测方法为免疫印迹法。本发明专利技术提供的检测试剂盒能够方便快速地进行体外疾病诊断，操作简单，灵敏度高；对神经系统病变的医学研究领域提供更多的诊断手段。变的医学研究领域提供更多的诊断手段。变的医学研究领域提供更多的诊断手段。

【技术实现步骤摘要】
神经元抗原谱抗体检测试剂盒及其检测方法


[0001]本专利技术涉及试剂盒领域，尤其涉及一种神经元抗原谱抗体检测试剂盒及其检测方法。

技术介绍

[0002]Amphiphysin、CV2、PNMA2(Ma2/Ta)、Ri、Yo或Hu是神经元相关的抗原、在一系列的神经系统疾病中、机体能产生针对这些抗原的自身抗体、导致一系列神经系统疾病或病变、如敏感性神经炎、脑干脑炎、小脑脑炎和边缘叶脑炎及PNS。
[0003]抗Amphiphysin(128kDa)抗体是以Amphiphysin为靶抗原、Amphiphysin参与囊泡内吞过程。因此检测抗Amphiphysin抗体对Eaton
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Lambert肌无力综合征、自主、易感、感觉性运动多神经病、强直性脑脊髓炎、小脑综合症、感觉性神经病、眼肌阵挛性运动失调症、僵人综合征等神经系统综合征的诊断非常重要。
[0004]抗CV2抗体的检测对边缘叶脑炎、局限型癫痫、眼肌阵挛性运动失调症、菱脑炎、锥体外系运动综合征、小脑变性、自主、易感、感觉性神经病的诊断十分重要。
[0005]抗PNMA2(Ma2/Ta)抗体的检测与边缘叶脑炎、局限型癫痫、眼肌阵挛性运动失调症、菱脑炎、锥体外系运动综合征、小脑变性的诊断相关。
[0006]抗Ri抗体的检测与眼肌阵挛性运动失调症、菱脑炎的诊断相关。
[0007]抗Yo抗体的检测对伴普肯耶细胞抗体阳性患者出现的眼肌阵挛性运动失调症、小脑变性的诊断具有重要意义。
[0008]抗Hu抗体的检测与视网膜病、集中在脑干、小脑以及大脑边缘系统的脑炎、局限型癫痫、眼肌阵挛性运动失调症、菱脑炎、锥体外系运动综合征、小脑变性、脊髓炎、自主、易感、感觉性神经病、单发性神经病变、运动神经综合征、 Eaton
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Lambert肌无力综合征等神经系统综合征的诊断相关。
[0009]上述抗原的抗体阳性结果可能会在肿瘤确诊之前出现。对这类抗体阳性的患者，必须立刻进行肿瘤检查。

技术实现思路

[0010]专利技术目的：本专利技术提供了一种神经元抗原谱抗体检测试剂盒及其检测方法，该试剂盒能够通过免疫印迹法进行体外诊断人体中抗体阴性或阳性，有效快速解决了人体在神经系统疾病中的健康检查问题。
[0011]技术方案：本专利技术的神经元抗原谱抗体检测试剂盒，包括抗原包被的检测膜条、酶结合物、样本缓冲液及底物液，且所述检测膜条上包被的抗原包括 Amphiphysin、PNMA2(Ma2/Ta)、Ri、Yo及Hu。
[0012]所述检测膜条上包被的抗原还包括CV2。
[0013]所述酶结合物包括AP酶羊抗人，即碱性磷酸酶标记的抗人免疫球蛋白G (IgG)、IgA和IgM中的一种或几种。
[0014]其中，酶结合物的pH值为7
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7.1，还包括三(羟甲基)氨基甲烷(Tris)、氯化钠、BSA(牛血清白蛋白)、蔗糖、防腐剂(Proclin 300)、Brij 35(月桂醇聚氧乙烯醚)、对乙酰氨基酚、硫酸庆大霉素、吐温20。
[0015]每升酶结合物中各成分的含量为：三(羟甲基)氨基甲烷(Tris)5.451
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6.663g、氯化钠8.1
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9.9g、BSA(牛血清白蛋白)22.5
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27.5g、蔗糖13.5
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16.5g、防腐剂(Proclin300)0.9
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1.1ml、Brij 35(月桂醇聚氧乙烯醚)0.9
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1.1g、对乙酰氨基酚0.45
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0.55g、硫酸庆大霉素0.036
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0.044g、吐温20 0.45
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0.55ml、AP酶羊抗人0.72
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0.88mg/L。
[0016]酶结合物的pH值优选7.05，每升酶结合物中各成分含量优选：三(羟甲基) 氨基甲烷(Tris)6.057g、氯化钠9g、BSA(牛血清白蛋白)25g、蔗糖15g、防腐剂(Proclin 300)1ml、Brij 35(月桂醇聚氧乙烯醚)1g、对乙酰氨基酚0.5g、硫酸庆大霉素0.04g、吐温20 0.5ml、AP酶羊抗人0.8mg/L。
[0017]所述酶结合物进行了10倍浓缩，使用时需用样本缓冲液稀释，且稀释后需在一日内使用。
[0018]所述底物液包括四唑硝基苯胺兰/5
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溴
‑4‑
氯啶
‑3‑
吲哚
‑
磷酸盐(NBT/BCIP)。其中，底物液pH值为9
‑
10，还包括Tris、NaCl、Proclin 300、N，N
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二甲基甲酰胺、MgCl2。
[0019]每升底物液中各成分的含量为：Tris 10.903
‑
13.325g、NaCl 5.256
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6.424g、 Proclin 300 0.45
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0.55ml、NBT 0.149
‑
0.182g、BCIP 0.0747
‑
0.0913g、N，N
‑
二甲基甲酰胺4.95
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6.05ml、MgCl
2 0.086
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0.105g。
[0020]底物液pH值优选9.6，每升底物液中各成分的含量优选为Tris 12.114g、NaCl5.84g、Proclin 300 0.5ml、NBT 0.165g、BCIP 0.083g、N，N
‑
二甲基甲酰胺5.5ml、 MgCl
2 0.095g。
[0021]底物液可直接使用，但由于其对光敏感、使用后应立即盖紧瓶盖。
[0022]所述样本缓冲液包括TBST缓冲液/脱脂奶粉(Tris
‑
氯化钠
‑
吐温20/脱脂奶粉)，可直接使用。其中，样本缓冲液的pH值为7
‑
8，还包括EDTA、Proclin 300。
[0023]每升样本缓冲液中各成分的含量为：Tris 5.451
‑
6.663g、氯化钠7.893
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9.647g、 EDTA 0.9
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1.1g、Proclin 300 0.9
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1.1ml、吐温20 4.5
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5.5ml、脱脂奶粉9
‑
11g。
[0024]样本缓冲液的pH值优选7.4，每升样本缓冲液中各成分的含量优选为：Tris6.057g、氯化钠8.77g、EDTA 1g、Proclin 300 1ml、吐温20 5ml、脱脂奶粉10g。
[0025]检测试剂盒还包括清洗缓冲液，所述清洗缓冲液包括TBST缓冲液(Tris
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氯化钠
‑
吐温20)。其中，清洗缓冲液的pH值本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种神经元抗原谱抗体检测试剂盒，其特征在于：包括抗原包被的检测膜条、酶结合物、样本缓冲液及底物液，且所述检测膜条上包被的抗原包括Amphiphysin、PNMA2(Ma2/Ta)、Ri、Yo及Hu。2.根据权利要求1所述的神经元抗原谱抗体检测试剂盒，其特征在于：所述检测膜条上包被的抗原还包括CV2。3.根据权利要求1所述的神经元抗原谱抗体检测试剂盒，其特征在于：所述酶结合物包括碱性磷酸酶标记的抗人免疫球蛋白G、IgA和IgM中的一种或几种。4.根据权利要求1或3所述的神经元抗原谱抗体检测试剂盒，其特征在于：所述酶结合物进行了10倍浓缩，且使用时需用样本缓冲液稀释。5.根据权利要求1所述的神经元抗原谱抗体检测试剂盒，其特征在于：所述底物液包括四唑硝基苯胺兰/5
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溴
‑4‑
氯啶
‑3‑
吲哚
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磷酸盐。6.根据权利要求1所述的神经元抗原谱抗体检测试剂盒，其特征在于：所述样本缓冲液包括TBST缓冲液/脱脂奶...

【专利技术属性】
技术研发人员：陶瑞，谢红梅，陈吉帅，
申请(专利权)人：苏州邦器生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：