【技术实现步骤摘要】
一种具有神经保护作用的脂质体及其制备方法与应用
[0001]本专利技术涉及功能性脂质体制备
，具体涉及一种具有神经保护作用的脂质体及其制备方法与应用。
技术介绍
[0002]脂质体是一种由磷脂分子构成的人工囊泡，具有良好的生物相容性，可用作多种药物及生理活性物质的载体。构成脂质体的主要成分是磷脂和其他脂类化合物，脂质体的性质与其制备方法、壁材组成密切相关。
[0003]糖脂是一类含有糖基的脂类物质的总称，不仅是重要的脂肪酸来源，而且具备抗氧化、抗炎等多种生理活性。糖脂分子中含有疏水性的脂肪酸链和亲水性的糖基，与磷脂结构类似，是脂质体壁材的理想制备材料。
[0004]我国是鱼类养殖大国，其中鱼身具有较高的经济价值，但鱼头鱼骨在加工往往被废弃或得不到很好地利用。鱼头中富含各种脂质，包括DHA和EPA在内的多不饱和脂肪酸以及磷脂、糖脂等功能性脂类。鱼头为原料制备脂质体可以将其附加工产物进行高值化转化。但是，目前本领域尚未查到有使用鱼头脂质进行脂质体制备。
[0005]因此，需要开发一种从鱼头中提取脂质...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种具有神经保护作用脂质体，其特征在于，以鱼头为原料提取脂质体制得。2.根据权利要求1所述的具有神经保护作用脂质体的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)鱼头预处理：取新鲜鱼头去鳃、脸肉后清洗、去杂；将鱼头打碎，离心后，收集下层鱼头浆并称重；在鱼头浆加入无水乙醇，进行超声处理，抽滤，收集乙醇提取液；将乙醇提取液减压蒸发浓缩后获得乙醇粗提物；(2)鱼头总脂的粗提取：取步骤(1)获得的乙醇粗提物，加入氯仿、甲醇和蒸馏水，充分混匀后，离心，收集下层有机相，将下层有机相与0.5
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1.5％(w/v)NaCl溶液混合，震荡混匀后于再次离心，弃去上层获得下层有机相；将有机相减压浓缩至浸膏状，获得鱼头总脂；(3)鱼头磷脂和糖脂的分离：将步骤(2)获得的鱼头总脂用氯仿溶解，经中压纯化与制备硅胶色谱柱分离；洗脱条件如下：梯度洗脱流动相A依次分别为氯仿、丙酮和甲醇，流动相B为乙醇，洗脱流速为70
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80mL/min，进样量15
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20mL，进样浓度20
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30mg/mL，收集甲醇和乙醇洗脱液旋转蒸发浓缩至浸膏状，然后用氮气吹干分别得到鱼头中性脂、磷脂和糖脂；(4)乙醇注入法制备鱼头磷/糖脂复合脂质体：按重量份计，取步骤(3)获得的鱼头磷脂1份，加入鱼头糖脂0
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1份，混合后，即得混合脂质，向混合脂质中加入胆固醇0.08
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0.12份，无水乙醇3
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5份，在45
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55℃下水浴加热并搅拌溶解；另取质量为混合脂质重量8
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12倍的磷酸盐缓冲液，加入吐温
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80至浓度为0.1
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0.5g/L，混合均匀，得到混合脂质溶液；将混合脂质溶液用微量注入器缓慢注入缓冲液中，搅拌10
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30min，混合均匀；在40℃下减压旋蒸，除去残留乙醇，得到脂质体溶液；(5)膜挤出法调节脂质体粒径大小：取步骤(4)获得的脂质体溶液，依次通过聚碳酸酯膜的脂质体挤出器，获得目标粒径的脂质体。3.根据权利要求2所述的具有神经保护作用脂质体的制备方法，其特征在于，步骤(1)中，所述超声处理具体操作为：在鱼头浆中以固液比kg/L1：3
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5加入无水乙醇，20
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30℃、35
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45kHz、60
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80W超声功率下进行超声处理，抽滤得到鱼头渣和乙醇提取液，向鱼头渣中继续加入无水乙醇超声处理，超声处理共重复三次，每次1
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2h，合并乙醇提取液。4.根据权利要求2所述的具有神经保护作用脂质体的制备方法，其特征在于，步骤(1)中，所述离心具体操作为：在3
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5℃下4000
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5000r/min离心15
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20min。5.根据权利要求2所述的具有神经保护作用脂质体的制备方法，其特征在于，步骤(2)中，按重量份计，乙醇粗提物1份，加入2
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3份氯仿、1
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2份甲醇和0.8
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1.2份蒸馏水。6.根据权利要求2所述的具有神经保护作用脂质体的制备方法，其特征在于，步骤(2)中，所述离心具体操作为：在20
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30℃下4000
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6000r/min离心10
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20min；所述震荡的...
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