一种马大杂种相思的芽诱导培养基及其应用制造技术

本发明专利技术涉及植物组培技术领域，特别是涉及一种马大杂种相思的芽诱导培养基及其应用。本发明专利技术为解决硝酸钾和硝酸铵难以购买对组培生产造成的影响，通过在缺氮培养基(不含硝酸钾和硝酸铵等氮元素的1/2MS培养基)的基础上添加适宜的百菌清、6

【技术实现步骤摘要】
一种马大杂种相思的芽诱导培养基及其应用


[0001]本专利技术涉及植物组培
，特别是涉及一种马大杂种相思的芽诱导培养基及其应用。

技术介绍

[0002]马大杂种相思(A.mangium
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A.auriculiformis)为马占相思(Acacia mangium)和大叶相思(Acacia auriculiformis)的杂交种，具有固氮改土能力，其材质优、速生、适应性强、用途广泛，成为许多热带国家/地区重要的造林树种。因其亲本的花粉粒极小且不易收集，采用人工控制授粉进行选育，难度非常大，生产上应用的马大杂种相思，主要来源于天然杂交种。无性繁殖技术(组培、扦插、嫁接等)是马大杂种相思苗木繁育的唯一手段。因此，建立成熟的无性繁殖技术，对马大杂种相思的生产推广具有重要的意义。
[0003]组培是无性繁殖技术的一个重要手段，繁殖速度快，繁殖系数高，能够保持品种的优良特性。目前，关于相思树种组培技术的报道较多，如曾少玲等【曾少玲,罗建华,容世清,曾凯,吴章丽.8个马大杂种相思无性系组培快繁试验初报[J].热带林业,2019,47(01):4
‑
9+15】报道了8个马大杂种相思无性系的组培技术体系，王鸿等【王鸿,黄烈健,胡峰.16年生大叶相思高效芽诱导、增殖体系研究[J].华南农业大学学报,2016,37(05):91
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97.】成功建立了大叶相思的组培技术体系，施琼等【施琼,胡峰,黄烈健,詹妮.马大杂种相思腋芽高效组培增殖体系[J].林业科学,2014,50(06):55
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60.】建立了马大杂种相思腋芽组培增殖体系。在组织培养各个阶段中，氮素是植物体内不可或缺的元素，是蛋白质、核酸、叶绿素以及一些生理活性物质所必须的组成元素，对植物生长发育起积极作用。培养基中氮素的主要来源是硝酸钾和硝酸铵，通常认为：硝酸钾和硝酸铵是组培过程中，培养基中必不可少的组成成分。在上述报道中，硝酸钾和硝酸铵也是组培过程中必不可少的重要氮素来源。
[0004]由于硝酸铵和硝酸钾是炸药生产的主要原料，近年来在大多数国家和地区都受到了严格管控，其也属于《危险化学品名录》中重点监管原料。由于硝酸钾和硝酸铵的购买和使用受到严格控制，对整个组培产业的推广应用造成严重影响。

技术实现思路

[0005]为了解决上述问题，本专利技术提供了一种马大杂种相思的芽诱导培养基及其应用。本专利技术提供的芽诱导培养基不含硝酸钾和硝酸铵等氮元素，依然能诱导马大杂种相思的外植体出芽，出芽率为90.63％，且诱导的芽并未表现明显的缺氮症状。
[0006]为了实现上述目的，本专利技术提供如下技术方案：
[0007]本专利技术提供了一种马大杂种相思的芽诱导培养基，所述芽诱导培养基以缺少硝酸铵和硝酸钾的1/2MS培养基为基础培养基，还包括百菌清0.15g/L、6
‑
BA1mg/L和琼脂7g/L。
[0008]优选的，百菌清包括有效成分为百菌清的制剂；所述制剂在芽诱导培养基中的浓度为0.15g/L
÷
百菌清在制剂中的质量百分含量。
[0009]优选的，所述制剂包括百菌清含量为75wt.％的杀菌剂。
[0010]优选的，所述芽诱导培养基的pH值为5.6～6.0。
[0011]本专利技术还提供了上述芽诱导培养基在培养马大杂种相思中的应用。
[0012]优选的，所述培养马大杂种相思包括诱导外植体出芽。
[0013]优选的，所述培养包括开放式组织培养。
[0014]本专利技术还提供了一种诱导马大杂种相思外植体出芽的方法，包括以下步骤：
[0015]采用上述的芽诱导培养基对马大杂种相思的外植体进行培养，得到出芽的外植体。
[0016]优选的，所述培养的条件包括：培养温度为23～27℃，光照时间为12h/d，光照强度为30mol
·
μ
‑2·
S
‑1。
[0017]优选的，所述外植体包括含腋芽的带叶茎段。
[0018]有益效果：
[0019]本专利技术提供了一种马大杂种相思的芽诱导培养基，所述芽诱导培养基以缺少硝酸铵和硝酸钾的1/2MS培养基为基础培养基，还包括百菌清0.15g/L、6
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BA1mg/L和琼脂7g/L。本专利技术为解决硝酸钾和硝酸铵难以购买对组培生产造成的影响，通过在缺氮培养基(不含硝酸钾和硝酸铵等氮元素的1/2MS培养基)的基础上添加适宜的百菌清、6
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BA和琼脂，筛选出马大杂种相思高诱导率的最佳缺氮培养基配方；利用本专利技术提供的芽诱导培养基诱导马大杂种相思外植体，其外植体出芽率为90.63％，且诱导的芽并未表现明显的缺氮症状；将诱导芽进行生根培养，其生根率为82.97％，与对照处理诱导芽(含硝酸钾和硝酸铵等氮元素的培养基处理得到的诱导芽)的生根率(90.37％)无显著差异。
[0020]进一步的本专利技术提供的芽诱导培养基(缺氮培养基)为马大杂种相思缺氮培养的相关研究奠定基础，同时也为今后组培技术的可持续发展提供一种思路。
附图说明
[0021]图1为采用应用例1方法培养40天后的马大杂种相思外植体；
[0022]图2为采用对比例12方法培养40天后的马大杂种相思外植体；
[0023]图3为对比例13中不同方法培养诱导的芽30天后的生根率柱状图；其中
‑
N为采用应用例1方法诱导的芽，全素为采用对比例12诱导的芽；
[0024]图4为采用应用例1方法诱导的芽在生根培养基中培养30天后的生根图；
[0025]图5为采用应用例1方法诱导的芽在生根培养基中培养30天后的组培瓶底部生根图；
[0026]图6为采用对比例12方法诱导的芽在生根培养基中培养30天后的生根图；
[0027]图7为采用对比例12方法诱导的芽在生根培养基中培养30天后的组培瓶底部生根图。
具体实施方式
[0028]本专利技术提供了一种马大杂种相思的芽诱导培养基，所述芽诱导培养基以缺少硝酸铵和硝酸钾的1/2MS培养基为基础培养基，还包括百菌清0.15g/L、6
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BA1mg/L和琼脂7g/L。在本专利技术中，所述芽诱导培养基的pH值优选为5.6～6.0，更优选为5.8。
[0029]本专利技术对所述芽诱导培养基的各组分来源没有特殊要求，采用本领域技术人员所
熟知的市售商品即可。
[0030]在本专利技术中，所述芽诱导培养基优选为不含有硝酸铵和硝酸钾；所述缺少硝酸铵和硝酸钾的1/2MS培养基优选为仅缺少硝酸铵和硝酸钾其余组分和浓度不变的1/2MS培养基。
[0031]在本专利技术中，所述百菌清优选包括有效成分为百菌清的制剂，所述制剂在芽诱导培养基中的浓度优选为0.15g/L
÷
百菌清在制剂中的质量百分含量；所述制剂优选包括百菌清含量为75wt.％的杀菌剂。本专利技术通过在培养基中复配适宜的百菌清，利用百菌清的抑菌作用，本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种马大杂种相思的芽诱导培养基，其特征在于，所述芽诱导培养基以缺少硝酸铵和硝酸钾的1/2MS培养基为基础培养基，还包括百菌清0.15g/L、6
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BA1mg/L和琼脂7g/L。2.根据权利要求1所述的芽诱导培养基，其特征在于，百菌清包括有效成分为百菌清的制剂；所述制剂在芽诱导培养基中的浓度为0.15g/L
÷
百菌清在制剂中的质量百分含量。3.根据权利要求2所述的芽诱导培养基，其特征在于，所述制剂包括百菌清含量为75wt.％的杀菌剂。4.根据权利要求1～3任一项所述的芽诱导培养基，其特征在于，所述芽诱导培养基的pH值为5.6～6.0。5.权利要求1～4任一项所述芽诱导培养基在培养马大杂...

【专利技术属性】
技术研发人员：黄烈健，卢艳平，陈玉军，李玫，
申请(专利权)人：中国林业科学研究院热带林业研究所，
类型：发明
国别省市：