一种滇中地区猪笼草穴盘苗规模化生产方法技术

一种滇中地区猪笼草穴盘苗规模化生产方法，该方法通过外植体预处理，初始、增殖、继代、壮苗和生根培养，组培苗移栽及田间管理7个步骤的紧凑衔接及技术措施集成，在同年3月至10月内实现1顶芽外植体繁育出50余株优质穴盘苗，通过外植体预处理、选用盐分含量低的改良WPM培养基解决了初始培养成活率低、后续各组培环节外植体褐化严重和生长缓慢问题；在增殖培养和壮苗培养环节分别采用LED组合光源Ⅰ和LED组合光源Ⅱ，与传统荧光灯相比，在节能43.7％

【技术实现步骤摘要】
一种滇中地区猪笼草穴盘苗规模化生产方法


[0001]本专利技术属于农业
，具体涉及一种滇中地区猪笼草穴盘苗规模化生产方法。

技术介绍

[0002]猪笼草又称猪仔笼、雷公壶等，是猪笼草科(Nepenthaceae)猪笼草属(Nepenthes)多年生攀援状木质藤本植物，原产于亚洲东南部和大洋洲北部，全世界约有100余种，虽然在我国海南和广东的湛江、珠海、中山等部分地区分布，但原生种很少应用。直到20世纪90年代以后，引入国外通过种间杂交获得的猪笼草优良品种后，才逐步用于生产应用。
[0003]猪笼草现已成为引人注目的观赏植物，其中由叶片变化而来的笼状变态叶造型独特，同时具有食虫特性，是目前食虫植物中最受人们青睐的种类之一。其大小和颜色各不相同，有的像小酒杯、有的像罐子，颜色五彩缤纷，具有极高的观赏价值，常用作盆栽或吊盆观赏，优雅别致。近年来，云南从美国独家授权引入了一批猪笼草新品种(Nepenthes.khasiana
×
(ventricosa
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maxima))，系葫芦猪笼草(Nepenthes ventricosa)、大猪笼草(Nepenthes maxima)和卡西猪笼草(Nepenthes khasiana)杂交品种，其笼状变态叶较大，颜色丰富，观赏性更佳。
[0004]猪笼草雌雄异株，结实率低，且种子萌发慢，发芽率低；扦插繁殖生根慢，不易成活，难以满足生产的要求。组培繁殖是猪笼草种苗生产上主要采用的方法，但现有的组培繁殖方法外植体褐化严重、能耗高，生产效率低。对于新引入的猪笼草品种(Nepenthes.khasiana
×
(ventricosa
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maxima))，以上种苗繁殖问题表现更为突出。此外，滇中地区干湿季明显，冬季低温干燥不适于猪笼草生长，甚至有冻害的发生，每年有效的生长期是3月至10月；其中，温湿条件比较最理想的生长季节是7月至9月；有限的生长周期增加了种苗的繁殖和生产的难度。因此，有必要结合滇中地区的气候条件栽培种类，研发一种猪笼草穴盘苗规模化生产方法，提高猪笼草种苗生产效率和质量，以便于新品种的推广和应用，满足市场需求。

技术实现思路

[0005]为解决现有猪笼草组培繁殖生产过程中初始培养成活率低、外植体严重褐化、能耗高、生产效率低等技术问题，针对滇中地区气候条件和有限的生长周期等客观实际，通过集成创新提供一种滇中地区猪笼草穴盘苗规模化生产方法。
[0006]本专利技术的技术方案如下：
[0007]1.一种滇中地区猪笼草穴盘苗规模化生产方法，包括如下步骤：
[0008](1)外植体的选择与处理
[0009]在3月中旬选择生长健壮的猪笼草植株，用75％(质量比)百菌清可湿性粉剂800倍液喷洒全株消毒，选取顶芽和侧芽的幼嫩茎段作为外植体，并对预选取为外植体的顶芽和侧芽用遮光自封袋套袋避光；套袋后7～10天，于3月下旬揭开所述自封袋，用消毒手术刀切
取长度为3～5cm的顶芽和侧芽作为外植体，切除叶片；在超净台上用75％(质量比)的酒精表面消毒30s；然后用无菌水清洗3～4次，再于混合消毒液中消毒8～10min，再用无菌水冲洗3～4次；混合消毒液为每100ml质量浓度为2％的次氯酸钠溶液中滴加0.1ml吐温
‑
20；
[0010](2)初始培养
[0011]将步骤(1)经处理的外植体于超净台上切除消毒伤口后，从顶端向下以单节位为单位切为3～4段，2分钟内接种到改良WPM+6
‑
BA 1.0～1.2mg/L+NAA 0.1～0.2mg/L+蔗糖30000mg/L+琼脂6250mg/L，pH为5.8～6.0的培养基中暗培养5～7天，培养温度25℃
±
2℃；
[0012](3)增殖培养
[0013]于步骤(1)当年的3月底，将步骤(2)中经初始培养的外植体转接到改良WPM+6
‑
BA1.5～2.0mg/L+NAA 0.1mg/L+蔗糖30000mg/L+琼脂6250mg/L，pH为5.8～6.0的培养基中，并在LED组合光源I光照条件下培养30～36d，所述LED组合光源I光照条件为：LED红光:LED蓝光:LED白光的光照强度比＝5:2:3，LED组合光源I下25厘米位置的光照强度为55～57μmol
·
m
‑2·
s
‑1，光照时间为12小时/天，光照培养温度28℃
±
2℃，无光培养温度为20℃
±
2℃；
[0014](4)继代培养
[0015]于步骤(1)当年的5月上旬，将步骤(3)增殖培养的芽丛切成带2～3个芽的小块，再将所有小块转接至继代培养基中，在与步骤(3)相同的LED组合光源I光照条件下培养30
‑
40d至小块上的芽体长大至高5～7厘米并继续分化出新的芽体；所述继代培养基为：改良WPM+6
‑
BA 1.0mg/L+NAA 0.1mg/L+蔗糖30000mg/L+琼脂6250mg/L，pH为5.8～6.0，光照时间为12小时/天，光照培养温度28℃
±
2℃，无光培养温度为20℃
±
2℃；
[0016](5)壮苗培养
[0017]于步骤(1)当年的6月上旬，将步骤(4)中的芽丛切成单芽再转接至壮苗培养基中，在LED组合光源Ⅱ光照条件下，培养24～30d，得壮苗；所述LED组合光源Ⅱ光照条件为：LED红光:LED蓝光:LED白光:LED远红光的光照强度比＝5:1:2:2，LED组合光源Ⅱ下25厘米的位置的光照强度为53～55μmol
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m
‑2·
s
‑1；所述壮苗培养基为：改良WPM+6
‑
BA0.5mg/L+NAA 0.1mg/L +活性炭0.05g/L+蔗糖30000mg/L+琼脂6250mg/L，pH为5.8～6.0；光照时间为12小时/天，光照培养温度28℃
±
2℃，无光培养温度为20℃
±
2℃；
[0018](6)生根培养
[0019]于步骤(1)当年的6月底至7月初，将步骤(5)中长度为2cm以上的单芽接种到盛有生根培养基的培养瓶内，盖膜后再将培养瓶移至覆盖有遮阳网(遮光率为70％)棚内苗床上培养21～28d(棚内自然温度为18～28℃)；所述生根培养基为：改良WPM+IBA1.0mg/L+NAA0.1mg/L+活性炭0.05g/L +蔗糖30000mg/L+琼脂6250mg/L，pH为5.8～6.0；
[0020](7)组培苗移栽与田间管理
[0021]于步骤(1)当年的7月下旬，将步骤(6)生根的组培苗取出，清水洗净培养基，放入质量浓度为0.1％的多菌灵溶液中消毒1～2min后，移栽至盛有栽培基质的育苗穴盘中，再将育苗穴盘置于棚内并在育苗穴盘上方的拱架上覆盖一层透明本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种滇中地区猪笼草穴盘苗规模化生产方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)外植体的选择与处理在3月中旬选择生长健壮的猪笼草植株，用75％百菌清可湿性粉剂800倍液喷洒全株消毒，选取顶芽和侧芽的幼嫩茎段作为外植体，并对预选取为外植体的顶芽和侧芽用遮光自封袋套袋避光；套袋后7～10天，于3月下旬揭开所述自封袋，用消毒手术刀切取长度为3～5cm的顶芽和侧芽作为外植体，切除叶片；(2)初始培养将步骤(1)经处理的幼芽茎段于超净台上切除消毒伤口后，从顶端向下以单节位为单位切为3～4段，2分钟内接种到改良WPM+6
‑
BA 1.0～1.2mg/L+NAA 0.1～0.2mg/L+蔗糖30000mg/L+琼脂6250mg/L，pH为5.8～6.0的培养基中暗培养5～7天，培养温度25℃
±
2℃；(3)增殖培养于步骤(1)当年的3月底，将步骤(2)中经初始培养的外植体转接到改良WPM+6
‑
BA 1.5～2.0mg/L+NAA 0.1mg/L+蔗糖30000mg/L+琼脂6250mg/L，pH为5.8～6.0的培养基中，并在LED组合光源I光照条件下培养30～36d，所述LED组合光源I光照条件为：LED红光:LED蓝光:LED白光的光照强度比＝5:2:3，LED组合光源I下25厘米位置的光照强度为55～57μmol
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‑1，光照时间为12小时/天，光照培养温度28℃
±
2℃，无光培养温度为20℃
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2℃；(4)继代培养于步骤(1)当年的5月上旬，将步骤(3)增殖培养的芽丛切成带2～3个芽的小块，再将所有小块转接至继代培养基中，在与步骤(3)相同的LED组合光源I光照条件下培养30
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40d至小块上的芽体长大至高5～7厘米并继续分化出新的芽体；所述继代培养基为：改良WPM+6
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BA 1.0mg/L+NAA 0.1mg/L+蔗糖30000mg/L+琼脂6250mg/L，pH为5.8～6.0，光照和温度管理同步骤(3)；(5)壮苗培养于步骤(1)当年的6月上旬，将步骤(4)中的芽丛切成单芽再转接至壮苗培养基中，在LED组合光源Ⅱ光照条件下，培养24～30d，得壮苗；所述LED组合光源Ⅱ光照条件为：LED红光:LED蓝光:LED白光:LED远红光的光照强度比＝5:1:2:2，LED组合光源Ⅱ下25厘米的位置的光照强度为53～55μmol
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【专利技术属性】
技术研发人员：阮继伟，余蓉培，瞿素萍，吴丽芳，杨春梅，单芹丽，吴旻，卢珍红，
申请(专利权)人：玉溪云星生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：